發(fā)布時(shí)間：2021-07-14 15:50

　　目的Toll樣受體活化MAPK信號(hào)途徑誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)參與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展，MKP-1負(fù)向調(diào)節(jié)MAPK信號(hào)傳導(dǎo)抑制炎癥反應(yīng)。本研究通過分析活化TLR2誘導(dǎo)MKP-1表達(dá)及其信號(hào)傳導(dǎo)途徑，闡明脂蛋白肽活化TLR2誘導(dǎo)可控炎癥反應(yīng)的分子機(jī)制，為臨床干預(yù)心血管疾病的發(fā)生發(fā)展提供線索和依據(jù)。方法利用DMEM和RPMI1640常規(guī)方法分別培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）和人單核細(xì)胞（THP-1）至穩(wěn)定對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，進(jìn)行干預(yù)實(shí)驗(yàn)。Pam3CSK4的劑量相關(guān)性分析濃度為0、0.01、0.05、0.1、0.5、1μg/ml，時(shí)間相關(guān)性分析的劑量為1μg/ml，處理時(shí)間為0、1、3、6、12、24小時(shí)。細(xì)胞干預(yù)以后mRNA表達(dá)水平檢測(cè)采用RT-PCR方法，蛋白質(zhì)表達(dá)水平檢測(cè)采用western blot方法。信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑的濃度為10μM；信號(hào)傳導(dǎo)分子的磷酸性蛋白水平檢測(cè)采用Western blot方法。對(duì)結(jié)果進(jìn)行灰度掃描半定量分析，所用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用t檢驗(yàn)，P值<0.05視為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.不同濃度Pam3CSK4處理HUVCE細(xì)胞1小時(shí)，RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示TLR2的mRNA表達(dá)水... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同劑量Pam3CSK4對(duì)HUVEC表達(dá)TLR2的影響（*:P<0.05）

m3CSK4 處理不同時(shí)間對(duì) HUVEC 表達(dá) TLR2 的影響：m3CSK4 對(duì) HUVEC 表達(dá)細(xì)胞因子的影響樣受體的主要功能是通過誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生活化中，利用的 TLR2 配體 Pam3CSK4 處理血管內(nèi)皮細(xì)胞 HULR2 對(duì)促炎細(xì)胞因子如：TNF-α、IL-6 和 Cox-2 的表達(dá)l - 1μg/ml 的Pam3CSK4處理HUVCE細(xì)胞1小時(shí)后細(xì)胞上調(diào)，并具有劑量依賴性(圖 3)。

16劑量 Pam3CSK4 對(duì) HUVEC 表達(dá)促炎細(xì)胞g/ml Pam3CSK4 處理 HUVEC 細(xì)胞 1-24 小NA 表達(dá)水平。結(jié)果顯示：Pam3CSK4 時(shí)F-α、MCP-1 和 Cox-2 的 mRNA 表達(dá)水平反應(yīng)，細(xì)胞因子的上調(diào)峰值在 1-3 小時(shí)時(shí)


本文編號(hào)：3284440