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細(xì)粒棘球蚴囊液體外保護(hù)脂多糖誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞H9C2損傷的效果評(píng)價(jià)及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-07-09 01:28
  背景和目的:心肌炎是指由感染或非感染性因素引起的心臟病理免疫過程的臨床和組織學(xué)表現(xiàn),通常會(huì)繼發(fā)其他心血管疾病,如急性心力衰竭和慢性擴(kuò)張型心肌病等。心肌炎的臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣,且病程的輕重緩急懸殊,臨床上對(duì)心肌炎的治療方法有一定局限性,如非甾體類抗炎藥在小鼠柯薩奇B3病毒性心肌炎中被證明有毒害作用,現(xiàn)有的診治方法只能降低住院率,但是病死率并沒有明顯下降。因此對(duì)新型抗心肌炎藥物的研究應(yīng)運(yùn)而生。細(xì)粒棘球蚴囊液作為包蟲感染宿主后在宿主內(nèi)形成的包囊的主要成分,可以調(diào)節(jié)宿主免疫應(yīng)答,使包蟲長期寄生在宿主體內(nèi)但無明顯癥狀。細(xì)粒棘球蚴囊液可以通過調(diào)節(jié)宿主免疫系統(tǒng)抑制宿主炎癥反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)研究細(xì)粒棘球蚴囊液對(duì)LPS引起的大鼠心肌細(xì)胞H9C2炎性損傷的保護(hù)作用,并探討其發(fā)生的可能機(jī)制,為心肌炎的治療提供新的方法和思路。方法:體外培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞H9C2,使用LPS(終濃度為10μg/ml)建立心肌炎損傷模型,不同濃度細(xì)粒棘球蚴囊液(200μg/ml、100μg/ml、50μg/ml、25μg/ml)作用于該模型后,用相差顯微鏡觀察各組H9C2細(xì)胞形態(tài);使用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組H9C2細(xì)胞生存率。200μg/ml... 

【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:59 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

細(xì)粒棘球蚴囊液體外保護(hù)脂多糖誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞H9C2損傷的效果評(píng)價(jià)及機(jī)制研究


細(xì)粒棘球蚴包囊結(jié)構(gòu)

標(biāo)準(zhǔn)曲線,蛋白,標(biāo)準(zhǔn)曲線,濃度


蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)粒棘球蚴囊液體外保護(hù)脂多糖誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞H9C2損傷的效果評(píng)價(jià)及機(jī)制研究17y=0.6713x-0.0007,R2=0.9993。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,計(jì)算得到細(xì)粒棘球蚴囊液樣品濃度為0.73mg/ml(圖2-1)。用12.5%SDS-PAGE電泳對(duì)細(xì)粒棘球蚴囊液進(jìn)行蛋白定性鑒定,蛋白凝膠成像結(jié)果顯示,70kDa指示的條帶為牛宿主蛋白,38kDa指示的條帶為目標(biāo)蛋白即細(xì)粒棘球蚴囊液主要抗原成分(圖2-1)。圖2-1細(xì)粒棘球蚴囊液蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線與主要蛋白條帶Figure2-1TheproteinconcentrationstandardcurveofandmainproteinbandsofE.granulosuscystfluid2.9.2細(xì)粒棘球蚴囊液體外對(duì)H9C2細(xì)胞和HUVEC細(xì)胞生長的影響體外培養(yǎng)H9C2細(xì)胞和HUVEC細(xì)胞,設(shè)置不同濃度細(xì)粒棘球蚴囊液代替胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞以及使用胎牛血清常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞的對(duì)照組,培養(yǎng)48h。使用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞生存率,發(fā)現(xiàn)與FBS組相比,不同濃度細(xì)粒棘球蚴囊液培養(yǎng)組的H9C2細(xì)胞和HUVEC細(xì)胞的生存率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(圖2-2)。其中,CF200μg/ml組的H9C2細(xì)胞生存率(105.12%±12.87%)略高于FBS培養(yǎng)組(98.37%±5.56%)(圖2-2A)。圖2-2細(xì)粒棘球蚴囊液對(duì)H9C2細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞生長的影響(n.s代表沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)Figure2-2TheeffectsofE.granulosuscystfluidonsurvivalofH9C2andHUVEC(n.smeansnosignificance)

標(biāo)準(zhǔn)曲線,細(xì)胞,統(tǒng)計(jì)學(xué),蛋白


蘭州大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)粒棘球蚴囊液體外保護(hù)脂多糖誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞H9C2損傷的效果評(píng)價(jià)及機(jī)制研究17y=0.6713x-0.0007,R2=0.9993。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,計(jì)算得到細(xì)粒棘球蚴囊液樣品濃度為0.73mg/ml(圖2-1)。用12.5%SDS-PAGE電泳對(duì)細(xì)粒棘球蚴囊液進(jìn)行蛋白定性鑒定,蛋白凝膠成像結(jié)果顯示,70kDa指示的條帶為牛宿主蛋白,38kDa指示的條帶為目標(biāo)蛋白即細(xì)粒棘球蚴囊液主要抗原成分(圖2-1)。圖2-1細(xì)粒棘球蚴囊液蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線與主要蛋白條帶Figure2-1TheproteinconcentrationstandardcurveofandmainproteinbandsofE.granulosuscystfluid2.9.2細(xì)粒棘球蚴囊液體外對(duì)H9C2細(xì)胞和HUVEC細(xì)胞生長的影響體外培養(yǎng)H9C2細(xì)胞和HUVEC細(xì)胞,設(shè)置不同濃度細(xì)粒棘球蚴囊液代替胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞以及使用胎牛血清常規(guī)培養(yǎng)細(xì)胞的對(duì)照組,培養(yǎng)48h。使用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞生存率,發(fā)現(xiàn)與FBS組相比,不同濃度細(xì)粒棘球蚴囊液培養(yǎng)組的H9C2細(xì)胞和HUVEC細(xì)胞的生存率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(圖2-2)。其中,CF200μg/ml組的H9C2細(xì)胞生存率(105.12%±12.87%)略高于FBS培養(yǎng)組(98.37%±5.56%)(圖2-2A)。圖2-2細(xì)粒棘球蚴囊液對(duì)H9C2細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞生長的影響(n.s代表沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)Figure2-2TheeffectsofE.granulosuscystfluidonsurvivalofH9C2andHUVEC(n.smeansnosignificance)


本文編號(hào):3272731

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