研究背景:當(dāng)前,心血管疾病仍是危及人類健康的主要疾病,心肌損傷后病理性修復(fù)是主要的病理生理過程。哺乳動物心臟為終末分化器官,心肌壞死后不可再生,壞死的心肌相繼出現(xiàn)炎癥反應(yīng)、細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）沉積、膠原形成,最終發(fā)生心肌纖維化（myocardial fibrosis,MF）。但影響MF的因素和機(jī)制仍未完全闡明。一方面,致力于研究心肌再生,為臨床解決心肌再生性疾病提供廣闊的前景。既往的研究認(rèn)為:低等脊椎動物如成年斑馬魚心臟切除20%左右后可完全再生;后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)新生小鼠心臟有短暫的再生能力,這種能力在出生1周后消失;這些研究結(jié)果目前均未轉(zhuǎn)化為臨床;干細(xì)胞治療既往認(rèn)為可促進(jìn)心肌再生,目前仍飽受質(zhì)疑。另一方面,心臟受到損傷等刺激后,心臟成纖維細(xì)胞（cardiac fibroblast,CF）被激活,大量增殖及分化,或轉(zhuǎn)化為有更強(qiáng)分泌活性并有平滑肌樣收縮特性的肌成纖維細(xì)胞（myofibroblast,Myo FB）,這是MF最重要的病理過程;CF和Myo FB均可分泌大量的ECM);MF的過程其本質(zhì)就是ECM過度積聚和或降解減少所致。因此任何抑制CF的... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

加尾法設(shè)計(jì)miRNA引物及qPCR示意圖

有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（5.38±1.05 vs 0.31±0.09mm2，p<0.01）(詳見圖1-2A)。14dap：已經(jīng)明確7dap時M組心臟損傷后CM壞死明顯，心肌增殖不明顯；進(jìn)一步觀察14dap時兩組心臟修復(fù)情況。S組H&E及Masson染色后低高倍光學(xué)顯微鏡心尖部組織未見異常；M組H&E染色提示疤痕形成，周圍未見明顯炎癥反應(yīng)；Masson染色：修復(fù)的疤痕為膠原纖維改變，表明已形成纖維化心肌，與正常心肌組織分界清楚，提示修復(fù)完成。表明新生2天SD大鼠心臟損傷后沒有完全再生，以病理性再生為主（詳見圖1-2B）。偏振光觀察7、14dap膠原沉積情況：判斷M組異常修復(fù)組織所含的膠原成份，天狼猩紅染色后利用偏振光顯微鏡觀察：低高倍鏡下，7dap時可見少量散在膠原沉積，以Ⅲ型膠原為主（呈綠色）；14dap時可見較多的散在呈橙黃色和亮紅色的以Ⅰ型膠原為主的膠原纖維

（二）miRNA 芯片微陣序列分析結(jié)果1、S組和M組樣本各3例（標(biāo)記樣本時S組為A3、A4、A5，M組為B1、B2、B3），心臟組織提取RNA后同質(zhì)性檢測符合要求(見圖1-3)：圖1-3：樣本RNA的同質(zhì)性檢測結(jié)果Fig1-3：The homogeneity results of the RNA samples2、各樣本RNA濃度測定及質(zhì)量分析（Quantification and Quality Assurance）紫外分光光度計(jì)測定RNA濃度及純度：光密度值（optical density，OD）要求：A260/280≈2.0，A260/230≥1.8各RNA的濃度測值如下，均符合實(shí)驗(yàn)樣本檢測質(zhì)控要求。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]《中國心血管病報(bào)告2017》要點(diǎn)解讀[J]. 馬麗媛,吳亞哲,王文,陳偉偉.  中國心血管雜志. 2018(01)

博士論文
[1]運(yùn)動上調(diào)Neuregulin1表達(dá)促進(jìn)心梗心臟修復(fù)和抑制骨骼肌萎縮的機(jī)制探討[D]. 蔡夢昕.陜西師范大學(xué) 2016



本文編號：3269877