泡沫化巨噬細(xì)胞滯留在斑塊內(nèi)已經(jīng)成為動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）損傷的標(biāo)志性事件。本研究證實(shí),ox-LDL誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞形成巨噬源性泡沫細(xì)胞后,神經(jīng)導(dǎo)向因子netrin-1及其受體UNC5b的表達(dá)上調(diào),導(dǎo)致巨噬源性泡沫細(xì)胞遷移、能力下降,從而滯留斑塊內(nèi),促進(jìn)AS的進(jìn)展。然而,netrin-1和UNC5b影響泡沫細(xì)胞遷移能力的機(jī)制目前還不是很清楚。UNC5b是巨噬細(xì)胞膜上的受體糖蛋白,巨噬細(xì)胞泡沫化后UNC5b巖藻糖基化修飾是否改變,與泡沫細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力下降是否相關(guān),目前還不是很清楚。本課題利用糖生物學(xué)和分子生物學(xué)技術(shù),深入探討UNC5b巖藻糖基化修飾對泡沫細(xì)胞移動(dòng)能力的影響以及相關(guān)分子機(jī)制。進(jìn)而,闡明UNC5b糖基化修飾與泡沫巨噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力的關(guān)系,探究泡沫化巨噬細(xì)胞游出動(dòng)脈內(nèi)膜,促進(jìn)斑塊消退的可能途徑,為血管炎癥損傷疾病的防治提供一個(gè)新的治療靶點(diǎn)及思路。第一部分ox-LDL誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞泡沫化后UNC5b表達(dá)變化及運(yùn)動(dòng)能力的改變目的:以Raw264.7巨噬細(xì)胞和腹膜巨噬細(xì)胞為研究對象,ox-LDL誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞模型,研究UNC5b是否能夠抑制泡沫化巨噬細(xì)胞的遷移、運(yùn)動(dòng)... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

ox-LDL對Raw264.7巨噬細(xì)胞存活率的影響（*p<0.05）

圖 2 ox-LDL 對 Raw264.7 巨噬細(xì)胞內(nèi)脂滴數(shù)量的影響。A:濃度梯度 ox-LDL 對細(xì)內(nèi)脂滴數(shù)量的影響；B: 時(shí)間梯度 ox-LDL 對細(xì)胞內(nèi)脂滴數(shù)量的影響。Figure 2 ox-LDL enhances the lipid droplets of Raw264.7 macrophages.A: Raw264.7 macrophages were treated with 0, 25, 50 and 100 μg/ml ox-LDL for 24 hand their adipogenesis was analyzed by Oil Red O staining. B: Raw264.7 macrophagwere treated with 50 μg/ml ox-LDL for 0, 6, 12 and 24 h, and their adipogenesis wasanalyzed by Oil Red O staining.膽固醇酯是構(gòu)成細(xì)胞的重要成分，在正常細(xì)胞內(nèi)膽固醇一直處于動(dòng)態(tài)衡中，但細(xì)胞內(nèi)如果積累的大量的游離膽固醇，會(huì)對細(xì)胞造成損害甚至死亡巨噬細(xì)胞內(nèi)如果積累大量的游離膽固醇和脂質(zhì)則會(huì)導(dǎo)致巨噬細(xì)胞泡沫化，致巨噬細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)能力下降。AS 斑塊內(nèi)的這種泡沫化巨噬細(xì)胞過度聚集AS 的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。因此檢測了巨噬細(xì)胞泡沫化后，細(xì)胞內(nèi)的游離固醇酯比例。結(jié)果顯示，ox-LDL 誘導(dǎo) Raw264.7 巨噬細(xì)胞 24 h，隨著 ox-LD

圖 3 濃度梯度 ox-LDL 對細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯比例的影響（* >50%）。Figure 3 Effects of different concentrations of ox-LDLA on the cholester(* >50%).-LDL 誘導(dǎo) Raw264.7 巨噬細(xì)胞泡沫化后，遷移運(yùn)動(dòng)能力巨噬細(xì)胞吞噬大量脂質(zhì)形成巨噬源性泡沫細(xì)胞。泡沫細(xì)胞滯留S 損害的標(biāo)志性事件。在 AS 斑塊內(nèi)已經(jīng)形成的泡沫化的巨噬細(xì)力明顯減弱，導(dǎo)致滯留在斑塊內(nèi)。巨噬源性泡沫細(xì)胞滯留斑塊內(nèi)脂質(zhì)核心形成，招募更多的吞噬細(xì)胞加重炎癥反應(yīng)，這也可消退的原因之一。因此，在體外用 ox-LDL 誘導(dǎo) Raw264.7 巨噬細(xì)胞，利用 Transwell 實(shí)驗(yàn)和劃痕實(shí)驗(yàn)來檢測其遷移運(yùn)動(dòng)能力的示，Raw264.7 巨噬細(xì)胞經(jīng) ox-LDL 誘導(dǎo)泡沫化后 Transwell 實(shí)驗(yàn)


本文編號：3269586