泡沫化巨噬細胞滯留在斑塊內已經成為動脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）損傷的標志性事件。本研究證實,ox-LDL誘導巨噬細胞形成巨噬源性泡沫細胞后,神經導向因子netrin-1及其受體UNC5b的表達上調,導致巨噬源性泡沫細胞遷移、能力下降,從而滯留斑塊內,促進AS的進展。然而,netrin-1和UNC5b影響泡沫細胞遷移能力的機制目前還不是很清楚。UNC5b是巨噬細胞膜上的受體糖蛋白,巨噬細胞泡沫化后UNC5b巖藻糖基化修飾是否改變,與泡沫細胞運動能力下降是否相關,目前還不是很清楚。本課題利用糖生物學和分子生物學技術,深入探討UNC5b巖藻糖基化修飾對泡沫細胞移動能力的影響以及相關分子機制。進而,闡明UNC5b糖基化修飾與泡沫巨噬細胞運動能力的關系,探究泡沫化巨噬細胞游出動脈內膜,促進斑塊消退的可能途徑,為血管炎癥損傷疾病的防治提供一個新的治療靶點及思路。第一部分ox-LDL誘導的巨噬細胞泡沫化后UNC5b表達變化及運動能力的改變目的:以Raw264.7巨噬細胞和腹膜巨噬細胞為研究對象,ox-LDL誘導泡沫細胞模型,研究UNC5b是否能夠抑制泡沫化巨噬細胞的遷移、運動... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數】：108 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

ox-LDL對Raw264.7巨噬細胞存活率的影響（*p<0.05）

圖 2 ox-LDL 對 Raw264.7 巨噬細胞內脂滴數量的影響。A:濃度梯度 ox-LDL 對細內脂滴數量的影響；B: 時間梯度 ox-LDL 對細胞內脂滴數量的影響。Figure 2 ox-LDL enhances the lipid droplets of Raw264.7 macrophages.A: Raw264.7 macrophages were treated with 0, 25, 50 and 100 μg/ml ox-LDL for 24 hand their adipogenesis was analyzed by Oil Red O staining. B: Raw264.7 macrophagwere treated with 50 μg/ml ox-LDL for 0, 6, 12 and 24 h, and their adipogenesis wasanalyzed by Oil Red O staining.膽固醇酯是構成細胞的重要成分，在正常細胞內膽固醇一直處于動態(tài)衡中，但細胞內如果積累的大量的游離膽固醇，會對細胞造成損害甚至死亡巨噬細胞內如果積累大量的游離膽固醇和脂質則會導致巨噬細胞泡沫化，致巨噬細胞遷移運動能力下降。AS 斑塊內的這種泡沫化巨噬細胞過度聚集AS 的發(fā)生、發(fā)展密切相關。因此檢測了巨噬細胞泡沫化后，細胞內的游離固醇酯比例。結果顯示，ox-LDL 誘導 Raw264.7 巨噬細胞 24 h，隨著 ox-LD

圖 3 濃度梯度 ox-LDL 對細胞內膽固醇酯比例的影響（* >50%）。Figure 3 Effects of different concentrations of ox-LDLA on the cholester(* >50%).-LDL 誘導 Raw264.7 巨噬細胞泡沫化后，遷移運動能力巨噬細胞吞噬大量脂質形成巨噬源性泡沫細胞。泡沫細胞滯留S 損害的標志性事件。在 AS 斑塊內已經形成的泡沫化的巨噬細力明顯減弱，導致滯留在斑塊內。巨噬源性泡沫細胞滯留斑塊內脂質核心形成，招募更多的吞噬細胞加重炎癥反應，這也可消退的原因之一。因此，在體外用 ox-LDL 誘導 Raw264.7 巨噬細胞，利用 Transwell 實驗和劃痕實驗來檢測其遷移運動能力的示，Raw264.7 巨噬細胞經 ox-LDL 誘導泡沫化后 Transwell 實驗


本文編號：3269586