背景：動脈粥樣硬化（atherosclerosis, AS）是臨床心腦血管疾病的病理基礎(chǔ)，嚴(yán)重威脅著人類健康。有研究證實,在AS形成的各個階段中炎癥都參與并起關(guān)鍵作用。AS的發(fā)生與脂代謝及內(nèi)皮細胞炎癥直接相關(guān)。MicroRNA（miRNA, miR）可通過抑制SIRT1相關(guān)的炎癥反應(yīng)有望用于治療AS,但是相關(guān)機制仍不清楚。目的：探討MiR-132抑制SIRT1調(diào)控脂代謝過程,進而誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞炎癥導(dǎo)致動脈粥樣硬化的機制。方法：明確調(diào)控SIRT1的miRNAs,并進一步在臍靜脈內(nèi)皮細胞（Human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）中下調(diào)其下游脂代謝相關(guān)調(diào)節(jié)基因SREBP以及脂質(zhì)和膽固醇代謝途徑。結(jié)果：在轉(zhuǎn)染了miR-132的臍靜脈內(nèi)皮細胞中，SIRT1的3’ UTR熒光素酶活性明顯減低（0.338±0.036）（P=0.000）。Western blot檢測SIRT1，SREBP-1c及其下游的FASN、HMGCR蛋白表達水平明顯下調(diào)。qRT-PCR分析顯示轉(zhuǎn)染miR-132的臍靜脈內(nèi)皮細胞中，SIRT1（0.53±0.06）、及SRE... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

在HUVECs細胞中，SIRT1是MiR-132的靶基因

在HUVECs細胞中，MiR-132抑制SIRT1的表達

FASNHMGCR圖3. 在HUVECs細胞中，MiR-132抑制 SIRT1及其下游SREBP-脂質(zhì)合成-膽固醇合成代謝通路中基因的蛋白表達水平。3. Mir-132 促進 TNF 誘導(dǎo) HUVECs 細胞炎癥反應(yīng)：我們進一步研究在HUVECs細胞中， miR-132通過調(diào)控SIRT1及其下游的SREBP-脂質(zhì)合成-膽固醇合成代謝通路，進而對細胞生物學(xué)功能的影響。將HUVECs細胞用不同濃度的TNF-α(5, 10 and 50 ng/mL) 分別處理4小時后，Western blot實驗檢測細胞炎癥標(biāo)志物ICAM1和MMP9分子的表達水平。結(jié)果提示，隨著TNF-α濃度的增加ICAM1和MMP9分子的蛋白表達水平均明顯增加，并呈劑量依賴關(guān)系（圖5）。ELISA實驗檢測細胞培養(yǎng)上清中炎癥標(biāo)志物ICAM1分子的分泌水平，結(jié)果提示sICAM1分泌水平明顯增加

【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性情緒應(yīng)激對高脂飲食大鼠炎癥反應(yīng)和主動脈Toll樣受體4表達的影響[J]. 趙詠梅,王希柱,劉寶義,于秀艷,陳秀清.  中國心血管雜志. 2013(01)
[2]血管內(nèi)皮祖細胞在治療動脈粥樣硬化中的作用[J]. 張美華,張偉,蓋凌,張艷萍,賈頤舫.  中國心血管雜志. 2012(01)



本文編號：3242315