目的:本實驗主要目的是研究BBR在細胞水平抗缺氧/復氧損傷中的作用機制,并利用AMPKα的抑制劑Compound C,深入討論BBR對抗心肌缺氧/復氧損傷的保護作用是否通過AMPKα蛋白介導。方法:在本實驗中,以大鼠H9c2心肌細胞作為實驗載體,通過體外心肌細胞缺氧/復氧（A/R）損傷模型模擬體內(nèi)心肌缺血再灌注（I/R）損傷模型。實驗隨機分成4組,每組重復6次,具體分組如下:（1）正常組（Control組）;（2）A/R組;（3）20μM BBR+A/R組;（4）20μM BBR+1μM Compound C+A/R組。MTS法檢測細胞存活率;分光光度法檢測LDH活性;蛋白免疫印跡法（Western Blotting,WB）檢測AMPKα蛋白的表達;DCFH-DA法檢測心肌細胞內(nèi)ROS水平;AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法和TUNEL法檢測細胞凋亡。結果:1.與A/R組比較,20μM BBR預處理大鼠H9c2心肌細胞可減少LDH釋放,降低LDH活性,且差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）,增加細胞存活率（P<0.01）;2.蛋白免疫印跡法實驗結果表明,20μM BBR預... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 實驗細胞
    2.2 主要材料和試劑
    2.3 主要儀器和設備
    2.4 實驗方法
        2.4.1 培養(yǎng)H9c2心肌細胞
        2.4.2 心肌缺氧/復氧(A/R)損傷模型的構建及分組
        2.4.3 MTS法檢測H9c2心肌細胞存活率
        2.4.4 分光光度法檢測乳酸脫氫酶(LDH)的活性
        2.4.5 蛋白免疫印跡法(WesternBlotting)檢測AMPKα蛋白的表達
        2.4.6 流式細胞儀檢測H9c2心肌細胞內(nèi)ROS的生成情況
        2.4.7 AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法檢測H9c2心肌細胞凋亡
        2.4.8 TUNEL法檢測H9c2心肌細胞凋亡
        2.4.9 數(shù)據(jù)處理
第3章 實驗結果
    3.1 BBR預處理對心肌細胞A/R損傷的保護作用
        3.1.1 BBR預處理對細胞存活率的影響
        3.1.2 BBR預處理對LDH活性的影響
    3.2 BBR預處理對AMPKα蛋白表達的影響
    3.3 BBR預處理對ROS生成的影響
    3.4 BBR預處理對細胞凋亡的影響
第4章 討論
第5章 結論與展望
    5.1 結論
    5.2 展望
致謝
參考文獻
綜述
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
[1]中藥材黃連的研究現(xiàn)狀與展望[J]. 趙楠,李隆云,白志川.  重慶理工大學學報(自然科學). 2015(01)



本文編號：3229535