化學(xué)發(fā)光免疫成像法同時檢測血清氧化脂蛋白(a)、低密度脂蛋白方法的建立及臨床應(yīng)用
發(fā)布時間:2021-06-08 09:41
氧化脂蛋白目前被認(rèn)為是動脈粥樣硬化(atherosclerosis,As)性心血管疾病發(fā)生、發(fā)展的重要因素。高氧化脂蛋白(a)[oxidized lipoprotein(a),ox-Lp(a)]、氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)水平可評估冠心。╟oronary artery disease,CAD)發(fā)生的危險性、程度及As斑塊的穩(wěn)定性。目前,檢測循環(huán)ox-LDL和ox-Lp(a)含量的最常用方法是酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)。Ox-LDL亦可采用化學(xué)發(fā)光酶免疫法測定。Ox-Lp(a)水平的檢測通過測定Lp(a)中的apo(a)和/或氧化apoB位點的氧化水平,以評估Lp(a)的氧化程度。然而,上述檢測方法在單個分析流程中僅能檢測單一組分且靈敏度低。目的:(1)建立同時檢測血清ox-Lp(a)和ox-LDL的化學(xué)發(fā)光(chemiluminescence,CL)免疫成像分析方法。(2)CL法與ELISA法測定結(jié)果比較。(3)采用CL法檢測血清ox-Lp(a...
【文章來源】:南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:78 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
一. 動脈粥樣硬化與冠心病
1.1 動脈粥樣硬化
1.2 冠心病
二、脂蛋白與As
2.1 低密度脂蛋白與As
2.2 脂蛋白(a)與As
三、化學(xué)發(fā)光免疫分析
3.1 化學(xué)發(fā)光免疫分析法的類型
3.2 固相材料的選擇
3.3 化學(xué)發(fā)光免疫分析聯(lián)用技術(shù)
3.4 多組分免疫分析
第二章 化學(xué)發(fā)光免疫成像分析法同時檢測人血清氧化脂蛋白(a)、低密度脂蛋白方法的建立
一、引言
二、材料和方法
2.1 Lp(a)的提取
2.2 LDL的提取
2.3 蛋白定量
2.4 脂蛋白的氧化
2.5 HRP標(biāo)記羊抗人apo(a)、apoB抗體的制備
2.6 ELISA法測定血清ox-Lp (a)、ox-LDL
2.7 免疫傳感陣列的制備
2.8 化學(xué)發(fā)光免疫成像分析法同時測定血清ox-Lp(a)、ox-LDL
三、實驗結(jié)果
3.1 反應(yīng)條件的優(yōu)化
3.2 方法學(xué)評價
四、討論
第三章 冠心病患者血清氧化脂蛋白(a)、低密度脂蛋白的檢測
一、引言
二、材料和方法
2.1 研究對象和血樣收集
2.2 血清ox-Lp(a)、ox-LDL的測定
2.3 血脂水平及各生化指標(biāo)的測定
2.4 數(shù)據(jù)分析
三、實驗結(jié)果
3.1 研究對象的基本臨床特征和血脂水平
3.2 ACS、SCAD患者ox-Lp(a)、ox-LDL水平
3.3 血清ox-Lp(a)、ox-LDL與CAD的關(guān)系
3.4 ROC曲線分析
四、討論
全文小結(jié)
附錄A 材料和試劑
附錄B 常用溶液配制
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]氧化低密度脂蛋白的臨床意義與檢測方法的新進(jìn)展[J]. 楊錦濤,李克,汪俊軍. 臨床檢驗雜志. 2009(02)
[2]氧化、丙二醛修飾低密度脂蛋白的ELISA檢測法及臨床應(yīng)用[J]. 周助權(quán),汪俊軍,付麗,張春妮. 臨床檢驗雜志. 2007(06)
[3]脂蛋白(a)氧化和自身免疫與動脈粥樣硬化的關(guān)系[J]. 汪俊軍,顧振華,張春妮,范樂明. 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2005(08)
[4]微板式磁化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法對人絨毛膜促性腺激素(HCG)的靈敏快速測定[J]. 趙利霞,林金明,屈鋒. 化學(xué)學(xué)報. 2004(01)
[5]低密度脂蛋白亞組分氧化易感性的檢測及臨床應(yīng)用[J]. 汪俊軍,劉小傳,莊一義. 臨床檢驗雜志. 1999(02)
[6]人淋巴細(xì)胞低密度脂蛋白受體酶聯(lián)測定法的研究[J]. 洪瑛,劉秉文,傅明德. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1993(04)
本文編號:3218173
【文章來源】:南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:78 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
一. 動脈粥樣硬化與冠心病
1.1 動脈粥樣硬化
1.2 冠心病
二、脂蛋白與As
2.1 低密度脂蛋白與As
2.2 脂蛋白(a)與As
三、化學(xué)發(fā)光免疫分析
3.1 化學(xué)發(fā)光免疫分析法的類型
3.2 固相材料的選擇
3.3 化學(xué)發(fā)光免疫分析聯(lián)用技術(shù)
3.4 多組分免疫分析
第二章 化學(xué)發(fā)光免疫成像分析法同時檢測人血清氧化脂蛋白(a)、低密度脂蛋白方法的建立
一、引言
二、材料和方法
2.1 Lp(a)的提取
2.2 LDL的提取
2.3 蛋白定量
2.4 脂蛋白的氧化
2.5 HRP標(biāo)記羊抗人apo(a)、apoB抗體的制備
2.6 ELISA法測定血清ox-Lp (a)、ox-LDL
2.7 免疫傳感陣列的制備
2.8 化學(xué)發(fā)光免疫成像分析法同時測定血清ox-Lp(a)、ox-LDL
三、實驗結(jié)果
3.1 反應(yīng)條件的優(yōu)化
3.2 方法學(xué)評價
四、討論
第三章 冠心病患者血清氧化脂蛋白(a)、低密度脂蛋白的檢測
一、引言
二、材料和方法
2.1 研究對象和血樣收集
2.2 血清ox-Lp(a)、ox-LDL的測定
2.3 血脂水平及各生化指標(biāo)的測定
2.4 數(shù)據(jù)分析
三、實驗結(jié)果
3.1 研究對象的基本臨床特征和血脂水平
3.2 ACS、SCAD患者ox-Lp(a)、ox-LDL水平
3.3 血清ox-Lp(a)、ox-LDL與CAD的關(guān)系
3.4 ROC曲線分析
四、討論
全文小結(jié)
附錄A 材料和試劑
附錄B 常用溶液配制
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]氧化低密度脂蛋白的臨床意義與檢測方法的新進(jìn)展[J]. 楊錦濤,李克,汪俊軍. 臨床檢驗雜志. 2009(02)
[2]氧化、丙二醛修飾低密度脂蛋白的ELISA檢測法及臨床應(yīng)用[J]. 周助權(quán),汪俊軍,付麗,張春妮. 臨床檢驗雜志. 2007(06)
[3]脂蛋白(a)氧化和自身免疫與動脈粥樣硬化的關(guān)系[J]. 汪俊軍,顧振華,張春妮,范樂明. 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2005(08)
[4]微板式磁化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法對人絨毛膜促性腺激素(HCG)的靈敏快速測定[J]. 趙利霞,林金明,屈鋒. 化學(xué)學(xué)報. 2004(01)
[5]低密度脂蛋白亞組分氧化易感性的檢測及臨床應(yīng)用[J]. 汪俊軍,劉小傳,莊一義. 臨床檢驗雜志. 1999(02)
[6]人淋巴細(xì)胞低密度脂蛋白受體酶聯(lián)測定法的研究[J]. 洪瑛,劉秉文,傅明德. 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 1993(04)
本文編號:3218173
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