ACSL1影響甘油三酯機(jī)制的研究
發(fā)布時間:2021-05-22 03:45
研究背景和目的本課題組在前期臨床研究中發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死(AMI)患者外周血白細(xì)胞中長鏈;-輔酶A合成酶1(ACSL1基因)高表達(dá)可以作為心肌梗死診斷的分子標(biāo)記物。AMI患者血漿甘油三酯水平顯著高于健康人,我們設(shè)想,ACSL1基因高表達(dá),升高了甘油三酯的水平,這是ACSL1基因促進(jìn)AMI的發(fā)病機(jī)制之一,本研究擬采用細(xì)胞學(xué)研究手段,明確我們的設(shè)想。研究長鏈;-輔酶合成酶1(ACSL1)基因?qū)χx的影響及機(jī)制。方法本研究通過培養(yǎng)健康人的肝臟細(xì)胞,構(gòu)建ACSL1的過表達(dá)及干擾載體,瞬時轉(zhuǎn)染到肝細(xì)胞,使用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染情況。轉(zhuǎn)染48小時后用Elisa方法定量分析細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量,采用PCR array技術(shù)研究ACSL1基因影響脂代謝的機(jī)制。結(jié)果過表達(dá)ACSL1基因后,過表達(dá)組ACSL1的m RNA表達(dá)量明顯高于陰性對照組,(17.49±5.10 vs 1.00±0.05,P=0.032);及過表達(dá)組ACSL1蛋白水平的表達(dá)量明顯升高,細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量明顯上升(97.27±2.22 vs 72.35±0.44,P<0.001)。過表達(dá)ACSL1后與對照組相比顯著下調(diào)了脂肪酸氧化...
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
abstract
中英文縮略詞對照表
第1章 引言
第2章 綜述
2.1 心肌梗死概念及流行病學(xué)特征
2.2 心肌梗死與血脂異常
2.3 心肌梗死基因診斷的進(jìn)展
2.4 血脂異;蛑委煹倪M(jìn)展
第3章 材料與方法
3.1 研究材料及器械
3.2 研究方法
3.2.1 載體的構(gòu)建
3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
3.2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3.2.4 Western Blot檢測ACSL1 基因在蛋白質(zhì)水平的表達(dá).
3.2.5 ACSL1 基因的 mRNA 表達(dá)及采用 PCR array 技術(shù)檢測脂代謝相關(guān)基因
3.2.6 甘油三酯含量檢測
3.3 統(tǒng)計分析
第4章 結(jié)果
4.1 ACSL1 基因過表達(dá)及干擾載體轉(zhuǎn)染健康人肝細(xì)胞
4.2 Western blot 分析
4.3 過表達(dá)ACSL1 基因結(jié)果RT-qPCR分析
4.4 過表達(dá)ACSL1 后甘油三脂含量測定結(jié)果
4.5 過表達(dá)ACSL1 基因后PCR array結(jié)果分析
4.6 干擾ACSL1 基因結(jié)果RT-qPCR分析
4.7 干擾ACSL1 后甘油三脂含量測定結(jié)果
4.8 干擾ACSL1 基因后PCR array結(jié)果分析
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
作者簡介
在學(xué)期間取得的科研成果
致謝
本文編號:3200918
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
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中英文縮略詞對照表
第1章 引言
第2章 綜述
2.1 心肌梗死概念及流行病學(xué)特征
2.2 心肌梗死與血脂異常
2.3 心肌梗死基因診斷的進(jìn)展
2.4 血脂異;蛑委煹倪M(jìn)展
第3章 材料與方法
3.1 研究材料及器械
3.2 研究方法
3.2.1 載體的構(gòu)建
3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
3.2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
3.2.4 Western Blot檢測ACSL1 基因在蛋白質(zhì)水平的表達(dá).
3.2.5 ACSL1 基因的 mRNA 表達(dá)及采用 PCR array 技術(shù)檢測脂代謝相關(guān)基因
3.2.6 甘油三酯含量檢測
3.3 統(tǒng)計分析
第4章 結(jié)果
4.1 ACSL1 基因過表達(dá)及干擾載體轉(zhuǎn)染健康人肝細(xì)胞
4.2 Western blot 分析
4.3 過表達(dá)ACSL1 基因結(jié)果RT-qPCR分析
4.4 過表達(dá)ACSL1 后甘油三脂含量測定結(jié)果
4.5 過表達(dá)ACSL1 基因后PCR array結(jié)果分析
4.6 干擾ACSL1 基因結(jié)果RT-qPCR分析
4.7 干擾ACSL1 后甘油三脂含量測定結(jié)果
4.8 干擾ACSL1 基因后PCR array結(jié)果分析
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
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在學(xué)期間取得的科研成果
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