[目的]溶血卵磷脂（LysoPC）為氧化型低密度脂蛋白主要成分之一。我們前期研究表明,LysoPC可引起Ca2+超載促使人冠狀動脈平滑肌細胞凋亡。本課題研究天然黃酮類化合物金合歡素（Acacetin）能否抑制LysoPC引起的動脈平滑肌細胞（VSMCs）因Ca2+超載導致的細胞凋亡并探討其可能的分子機制。[方法]以體外分離培養(yǎng)的SD大鼠主動脈平滑肌細胞為研究對象,利用多種生物化學與分子生物學方法測定Acacetin對LysoPC引起的VSMCs內(nèi)Ca2+超載與凋亡以及相關(guān)信號分子的影響。[結(jié)果]研究結(jié)果表明:與溶劑對照組比較,LysoPC能濃度依賴性的抑制VSMCs活力,其中30μM LysoPC作用VSMCs后,細胞凋亡率顯著增加,引起ROS的水平升高,促凋亡蛋白Caspase-3和Bax表達水平顯著上調(diào),抗凋亡蛋白Bcl-2的表達明顯減少。然而Acacetin并不影響LysoPC引起的細胞鈣離子內(nèi)流。Acacetin濃度依賴性地拮抗LysoPC引起的VSMCs活力降低、細胞凋亡和ROS水平增加,使促凋亡蛋白Caspase-3和Bax表達水平降低,抗凋亡蛋白Bcl-2的表達增加。Ac... 

【文章來源】：廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 血管平滑肌細胞凋亡與心血管疾病
        1.1.1 血管平滑肌細胞凋亡與動脈粥樣硬化
        1.1.2 血管平滑肌細胞凋亡與血管鈣化
        1.1.3 血管平滑肌細胞凋亡與主動脈夾層
    1.2 調(diào)控血管平滑肌細胞凋亡的因素
        1.2.1 溶血卵磷脂與血管平滑肌細胞凋亡
        1.2.2 活性氧與血管平滑肌細胞凋亡
    1.3 金合歡素在心血管疾病中的應用
        1.3.1 抗炎作用
        1.3.2 抗心律失常作用
        1.3.3 心肌保護作用
    1.4 碩士課題擬解決的問題
第二章 材料及方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要設(shè)備及耗材
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 VSMCs的提取與分離
        2.2.2 VSMCs的傳代培養(yǎng)與凍存
        2.2.3 VSMCs的鑒定
        2.2.4 細胞活力檢測
        2.2.5 細胞凋亡檢測
        2.2.6 細胞內(nèi)鈣離子測定
        2.2.7 細胞內(nèi)活性氧含量測定
        2.2.8 Western blot方法檢測細胞蛋白表達水平
        2.2.9 siRNA細胞轉(zhuǎn)染實驗
    2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 VSMCs的形態(tài)學觀察及免疫熒光鑒定
    3.2 Acacetin對LysoPC引起的VSMCs活力降低的影響
    3.3 Acacetin對LysoPC誘導的VSMCs凋亡的影響
    3.4 Acacetin對LysoPC引起的VSMCs Ca~(2+)超載及ROS水平增加的影響
    3.5 Acacetin對LysoPC引起的VSMCs抗氧化酶表達降低的影響
    3.6 Acacetin對抗氧化調(diào)節(jié)因子Nrf2的影響
    3.7 沉默Nrf2對Acacetin抗氧化作用的影響
    3.8 沉默Nrf2對Acacetin抗凋亡作用的影響
第四章 討論
附錄1 英文縮略詞中英文注釋表
參考文獻
攻讀碩士期間科研成果
致謝



本文編號：3189890