第一部分TRPV4通道在心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧（H/R）損傷中的作用目的:近年研究表明TRPV4通道高表達(dá)于心腦血管系統(tǒng),并在小鼠腦室和心臟缺血再灌注損傷過程中發(fā)揮重要作用,然而具體起關(guān)鍵作用的細(xì)胞和機(jī)制尚不明確。本文旨在探究TRPV4通道在心肌細(xì)胞H/R損傷中的作用。方法:分離培養(yǎng)乳大鼠心肌細(xì)胞（NRVMs）和大鼠心肌H9C2細(xì)胞系,構(gòu)建細(xì)胞H/R模型,采用實(shí)時定量PCR以及western blot方法檢測TRPV4通道的表達(dá)水平,利用Fluo-4/AM鈣熒光染料觀察心肌細(xì)胞對TRPV4特異性激動劑GSK1016790A的反應(yīng)性。在復(fù)氧時給予TRPV4特異性激動/抑制劑干預(yù),并用CCK-8和LDH試劑盒檢測細(xì)胞損傷,AV/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡。此外,制備特異性的TRPV4-siRNA沉默TRPV4基因。結(jié)果:TRPV4通道在NRVMs和H9C2心肌細(xì)胞上均有mRNA和蛋白水平的表達(dá),而且GSK1016790A呈濃度依賴性的誘導(dǎo)胞外鈣離子內(nèi)流,表明心肌細(xì)胞上TRPV4通道具有功能。H/R后NRVMs和H9C2心肌細(xì)胞上TRPV4通道在mRNA和蛋白水平的表達(dá)均明顯增加,而且復(fù)氧后心肌細(xì)胞... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英語縮略詞表和中文對照
中文摘要
英文摘要
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 TRPV4 通道在心肌細(xì)胞H/R損傷中的作用
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 TRPV4通道在心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷中的作用機(jī)制：鈣超載、氧化應(yīng)激和線粒體損傷
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 TRPV4通道介導(dǎo)心肌氧化應(yīng)激損傷的作用及其具體作用機(jī)制
    材料與方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
綜述 TRPV4通道在氧化應(yīng)激中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
附錄 在校期間發(fā)表文章
致謝



本文編號：3185749