發(fā)布時間：2021-05-12 13:34

　　目的:探討AngⅡ誘導(dǎo)VSMCs內(nèi)生物鐘基因Per1、Per2表達(dá),通過激活RAS/ERK通路,從而促進(jìn)Cyclin E基因的表達(dá),影響血管平滑肌細(xì)胞的異常增殖,進(jìn)而影響血壓晝夜節(jié)律。方法:組織貼壁法提取SD大鼠原代血管平滑肌細(xì)胞,用50%血清刺激2 h進(jìn)行細(xì)胞授時,記為Control組,加用100 nM AngⅡ記為AngⅡ組,分別加入抑制劑VAL、U0126和SCH772984記為抑制劑組。于CT 3、CT 7、CT 11、CT 15、CT 19、CT 23分別取樣,采用RT-PCR技術(shù)檢測各組Per1、Per2、Cyclin E基因的表達(dá);采用WB技術(shù)分別檢測各組Per1、Per2、RAS、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK、Cyclin E蛋白的表達(dá)。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期分布,MTT法檢測細(xì)胞活力,SiRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)沉默Per1、Per2基因后,采用RT-PCR技術(shù)檢測各組Cyclin E基因的表達(dá);采用WB檢測各組Cyclin E、RAS、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:（1）AngⅡ能夠誘導(dǎo)VSMCs異常增殖,且存在劑量效應(yīng),這與誘導(dǎo)Cy... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1 試劑與儀器
    2 大鼠原代血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定
    3 細(xì)胞分組
    4 熒光實時定量PCR實驗
    5 免疫印跡實驗
    6 細(xì)胞增殖實驗
    7 細(xì)胞周期檢測
    8 SiRNA轉(zhuǎn)染實驗
    9 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
討論
總結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Regulation of Circadian Genes by the MAPK Pathway:Implications for Rapid Antidepressant Action[J]. Xin-Ling Wang,Kai Yuan,Wen Zhang,Su-Xia Li,George Fu Gao,Lin Lu.  Neuroscience Bulletin. 2020(01)
[2]纈沙坦/氨氯地平復(fù)方制劑擇時用藥對非杓型高血壓患者血壓晝夜節(jié)律的影響[J]. 欒家杰,劉曉云,張文,許金紅,邢文,王安才,宋建國.  中國藥理學(xué)通報. 2015(03)
[3]大鼠血管平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定[J]. 張浩,王志維,吳紅兵,胡小平,任宗力,李羅成,周楨,胡志鵬,李柏軍.  武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2014(03)

碩士論文
[1]纈沙坦對AngⅡ誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞收縮及增殖調(diào)控作用的生物鐘機制研究[D]. 楊魁.皖南醫(yī)學(xué)院 2019
[2]纈沙坦調(diào)控自發(fā)性高血壓大鼠血壓晝夜節(jié)律的生物鐘機制研究[D]. 王亞芹.皖南醫(yī)學(xué)院 2017



本文編號：3183506