冠心病是由于冠狀動脈阻塞造成的,血氧供應(yīng)不足引起的心肌損傷的一類心臟疾病,嚴重性損傷會導(dǎo)致心肌急性缺血,甚至心肌梗死。導(dǎo)致病情嚴重的原因就是在缺血后不能及時的打開阻塞的動脈,錯過了最佳恢復(fù)血氧供應(yīng)的最佳時間。因此,盡快恢復(fù)心肌血流灌注是解決心臟疾病的根本方法。目前,臨床上盡管使用藥物溶栓、冠狀動脈旁路移植術(shù)（CABG）、經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)（PCI）進行治療,但其在恢復(fù)血流供應(yīng)很容易引起的心肌缺血再灌注（Ischemiay Reperfiision,I/R）損傷,加速了心肌細胞凋亡和促進了炎癥因子、大量氧自由基的釋放。因此臨床上急需找到在短時間及時恢復(fù)氧供的藥物進行治療,為我們找到了新的研究方向。本課題采用戊二醛交聯(lián)劑合成的聚合豬血紅蛋白（pPolyHb）,不僅具有攜氧、釋氧能力,在組織中還可以有效的維持氧含量的穩(wěn)定。在I/R發(fā)生過程中有效的實現(xiàn)快速供氧,發(fā)揮心肌保護作用。近期研究中表明PI3K-Akt信號通路在心肌缺血再灌注損傷過程中發(fā)揮保護作用。因此,本實驗將進一步探討pPolyHb在心肌缺血再灌注損傷的作用保護機制,研究pPolyHb是否通過PI3K-Akt信號通路發(fā)揮保護作用,以... 

【文章來源】：西北大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略語表
第一章 引言
    1.1 心肌缺血再灌注損傷
        1.1.1 心肌缺血再灌注損傷的發(fā)生發(fā)展
        1.1.2 心肌缺血再灌注損傷的機制研究
        1.1.3 心肌缺血再灌注損傷的調(diào)控
    1.2 HBOCs的研究進展
        1.2.1 HBOCs的特點及分類
        1.2.2 pPolyHb
    1.3 線粒體自噬與I/R損傷
        1.3.1 線粒體自噬的保護作用
        1.3.2 線粒體自噬通路—PINKl/Parkin通路
        1.3.3 pPolyHb與線粒體自噬
    1.4 PI3K-Akt信號通路
        1.4.1 PI3K-Akt信號通路與細胞凋亡
        1.4.2 PI3K-Akt信號通路的保護作用
    1.5 本文研究的目的及意義
第二章 pPolyHb對心肌缺血再灌注損傷的影響
    2.1 引言
    2.2 實驗材料與儀器
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 儀器設(shè)備
    2.3 實驗方法
        2.3.1 H9C2大鼠心肌細胞培養(yǎng)
        2.3.2 構(gòu)建H9C2心肌細胞缺氧復(fù)氧損傷模型
        2.3.3 培養(yǎng)觀察H9C2大鼠心肌細胞狀態(tài)
        2.3.4 H9C2細胞生存活力的檢測
        2.3.5 乳酸脫氫酶（LDH）活性檢測
        2.3.6 肌酸激酶（CK）活性檢測
    2.4 結(jié)果分析
        2.4.1 H9C2心肌細胞形態(tài)改變
        2.4.2 檢測H9C2細胞生存活力
        2.4.3 LDH活性檢測結(jié)果
        2.4.4 肌酸激酶（CK）活性檢測結(jié)果
    2.5 討論
第三章 pPolyHb通過PI3K-Akt信號通路對缺血再灌注損傷的影響
    3.1 引言
    3.2 實驗材料與儀器
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 儀器設(shè)備
    3.3 主要溶液配制
    3.4 實驗方法
        3.4.1 實驗分組
        3.4.2 AnnexinV-FITC檢測細胞凋亡
        3.4.3 Westernblot檢測凋亡相關(guān)蛋白和信號通路蛋白的表達
    3.5 結(jié)果分析
        3.5.1 AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測各個實驗組大鼠心肌細胞凋亡率
        3.5.2 Westernblotting檢測蛋白Bax、Bcl-2蛋白的表達
        3.5.3 Westernblotting檢測蛋白Caspase-3蛋白的表達
        3.5.4 檢測各實驗組總Akt蛋白,p-Akt蛋白的表達
    3.6 討論
第四章 pPolyHb對心肌細胞缺血再灌注炎癥因子及NF-κBp65表達的影響
    4.1 引言
    4.2 實驗材料與儀器
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 儀器設(shè)備
    4.3 實驗方法
        4.3.1 ELISA方法測定炎癥因子TNF-α,IL-1β和TGF-β表達
        4.3.2 Westernblot法檢測NF-κB信號通路中P65蛋白表達
    4.4 結(jié)果分析
        4.4.1 pPolyHb對H9C2心肌細胞缺血再灌注損傷釋放炎癥因子的影響
        4.4.2 檢測NF-κB信號通路中P-65蛋白表達
    4.5 討論
第五章 pPolyHb誘導(dǎo)線粒體自噬機制研究
    5.1 引言
    5.2 實驗材料與儀器
        5.2.1 實驗材料
        5.2.2 儀器設(shè)備
    5.3 實驗方法
        5.3.1 實驗分組
        5.3.2 pPolyHb預(yù)處理對大鼠肌細胞中I/R誘導(dǎo)的線粒體自噬的影響
        5.3.3 線粒體自噬通路被抑制后p-Akt蛋白的表達
    5.4 結(jié)果分析
        5.4.1 pPolyHb復(fù)氧對I/R過程中H9C2心肌細胞自噬蛋白表達的影響
        5.4.2 線粒體自噬抑制后對細胞凋亡的影響
        5.4.3 線粒體自噬抑制后凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表達結(jié)果
        5.4.4 線粒體自噬通路被抑制后p-Akt蛋白的表達結(jié)果
    5.5 討論
結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3162100