生物起搏近年來已成為心臟起搏的研究熱點。所謂生物起搏，就是利用具有起搏或傳導功能的細胞、組織來替代病變或損傷的起搏和傳導組織，重建心臟正常的起搏和傳導功能。目前，實現(xiàn)生物起搏的主要策略有：基因治療、干細胞移植和組織工程構建。從理論上講，用再生醫(yī)學的理念構建出生物起搏器不僅具有較高的安全性和自控性，并能克服電子起搏器的諸多缺陷，是未來治療各型心律失常的理想選擇和發(fā)展方向。種子細胞是生物起搏的關鍵環(huán)節(jié)之一，因此，研究干細胞向起搏細胞的分化及機制，尋找可用于替代移植的種子細胞，具有重要的理論和臨床意義。目前，生物起搏研究領域中所用的種子細胞主要包括（1）成體細胞：竇房結細胞、幼稚心臟細胞及經(jīng)基因修飾的心肌工作細胞；（2）全能干細胞：胚胎干細胞（embryonic stem cells, ES）和誘導性多能干細胞（induced pluripotent stem cells, iPS）；（3）成體多能干細胞（somatic multipotent stem cells, SMSC）,：來源于骨髓、臍帶血、月經(jīng)血、羊膜、脂肪等組織的間充質干細胞（mesenchymal stem cells, M... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞對照表
前言
第一部分 棕色脂肪源性干細胞的生物學特性
    一、 前言
    二、 材料和設備
        （一） 實驗動物
        （二） 主要實驗試劑
        （三） 主要實驗設備
    三、 方法
        （一） BASCs 的分離
        （二） 新鮮分離 BASCs 表面標志的檢測
        （三） BASCs 三向分化能力的檢測
        （四） BASCs 培養(yǎng)早期的細胞成分鑒定
        （五） 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析
    四、 結果
        （一） 新鮮分離的 BASCs 的表面標志
        （二） BASCs 三向分化的檢測
        （三） 培養(yǎng)早期 BASCs 的細胞組成
    五、 討論
第二部分 棕色脂肪源性干細胞向起搏樣細胞的分化
    一、 前言
    二、 材料和設備
        （一） 實驗動物
        （二） 主要實驗試劑
        （三） qPCR 引物和蛋白電泳主要溶液的配制
        （四） 主要儀器設備
    三、 方法
        （一） BASCs 的常規(guī)培養(yǎng)
        （二） BASCs 增殖曲線的繪制
        （三） qPCR 檢測 SAN 細胞結構基因的表達
        （四） Western Blot 檢測蛋白水平的表達情況
        （五） 免疫細胞化學染色
        （六） 透射電鏡觀察細胞超微結構
        （七） 細胞內胞漿鈣瞬變測定
        （八） 細胞自發(fā)動作電位記錄
        （九） 藥理學功能檢測
        （十） 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    四、 結果
        （一） BASCs 在分化過程中的形態(tài)學觀察
        （二） SAN 細胞特異性結構基因在分化后 BASCs 中的表達檢測
        （三） 分化后的 BASCs 鈣瞬變檢測
        （四） 分化后的 BASCs 電生理檢測
        （五） 分化后的 BASCs 藥理學功能檢測
    五、 討論
第三部分 TBX18 在 BASCS 向起搏樣細胞分化中的作用
    一、 前言
    二、 實驗材料和設備
        （一） 實驗動物
        （二） 主要試劑
        （三） qPCR 引物和蛋白電泳主要溶液的配制
        （四） 主要儀器設備
    三、 方法
        （一） qPCR 檢測 SAN 細胞分化相關轉錄因子的表達
        （二） Western Blot 檢測蛋白水平的表達情況
        （三） BASCs 慢病毒轉染實驗
        （四） 細胞增殖活力檢測
        （五） 免疫細胞化學染色
        （六） 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
    四、 結果
        （一） BASCs 在分化中 SAN 細胞分化相關轉錄因子的表達
        （二） BASCs 在 Tbx18 被干擾后的分化改變
    五、 討論
參考文獻
全文小結
創(chuàng)新點和意義
研究不足及下一步工作
在讀期間發(fā)表的論文
文獻綜述
    參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]寒冷刺激誘導大鼠棕色脂肪組織中的心臟干細胞增多[J]. 楊俊杰,劉志強,王海濱,劉劍鋒,陳韻岱.  中國循環(huán)雜志. 2011(05)
[2]Mini-review:Plasticity of human menstrual blood stem cells derived from the endometrium[J]. Dennis XIANG,Julie ALLICKSON,Charlie XIANG.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2011(05)



本文編號：3157206