目的以動脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）兔為模型初步探究藥物全反式維甲酸（all-trans-retinoic acid,ATRA）對AS心肌細(xì)胞影響及機(jī)制。方法（1）動物模型的建立:普通純種大白兔24只,正常飼料喂養(yǎng)的為正常組;高脂飼料喂養(yǎng)的為模型組,高脂飼料由正常兔飼料、1%膽固醇、5%豬油混合組成;喂養(yǎng)高脂飼料的同時以ATRA（5 mg/kg.d）灌胃的為ATRA組。按上述方式喂養(yǎng)12周后,取頸動脈血液、剝離動脈和心臟,進(jìn)行各項實驗檢測,血液用于血脂檢測;油紅染色觀察動脈中斑塊;石蠟包埋心臟組織進(jìn)行石蠟切片,HE染色、Masson染色觀察心臟組織切片形態(tài)學(xué)變化;原位末端標(biāo)記法（Td T-mediated d UTP-biotin nick end labeling,TUNEL）檢測各組心肌組織細(xì)胞凋亡情況;免疫組織化學(xué)染色法（immunohistochemistry,IHC）檢測MLCK、CHOP、Caspase-3在各組心肌組織中的表達(dá)。Western blot法檢測MLCK蛋白的表達(dá)、ERK蛋白磷酸化水平、凋亡相關(guān)蛋白（Caspase-12、Bax、Bcl-... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞對照表（Abbreviation）
摘要
Abstract
1 前言
2 材料和方法
    2.1 實驗設(shè)備
    2.2 建立AS兔模型
    2.3 標(biāo)本的收取過程及處理
    2.4 血清中血脂水平的檢測
    2.5 油紅染色
    2.6 心臟組織切片HE染色
    2.7 心臟組織切片Masson染色
    2.8 原位末端標(biāo)記法檢測細(xì)胞凋亡
    2.9 免疫組織化學(xué)法檢測心臟組織切片相關(guān)蛋白表達(dá)
    2.10 蛋白免疫印跡法分析心臟組織中相關(guān)蛋白表達(dá)
    2.11 大鼠H9c2心肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)方法
    2.12 體外刺激H9c2心肌細(xì)胞的方法
    2.13 統(tǒng)計學(xué)分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 各組兔血清血脂檢測結(jié)果
    3.2 油紅染色檢測動脈粥樣斑塊結(jié)果
    3.3 HE染色結(jié)果
    3.4 Masson染色結(jié)果
    3.5 TUNEL結(jié)果
    3.6 免疫組化檢測各組兔心肌組織中MLCK、CHOP及Caspase-3 的結(jié)果
    3.7 ATRA對動脈粥樣硬化心臟組織中MLCK蛋白及ERK磷酸化水平的影響
    3.8 ATRA對動脈粥樣硬化心臟組織中凋亡相關(guān)蛋白的影響
    3.9 ATRA對動脈粥樣硬化心臟組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的影響
    3.10 MTT結(jié)果檢測棕櫚酸及ATRA對心肌細(xì)胞的抑制率
    3.11 Hoechst 33258 試劑盒檢測H9c2細(xì)胞凋亡結(jié)果
    3.12 ATRA對PA刺激的H9c2細(xì)胞中MLCK蛋白表達(dá)的影響
    3.13 ATRA對PA刺激的H9c2細(xì)胞中ERS以及凋亡相關(guān)蛋白的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
個人簡歷
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3152120