多氯聯(lián)苯（Polychlorinated biphenyls,PCBs）是一類典型的持久性有機(jī)污染物,由于其穩(wěn)定的理化性質(zhì),在工業(yè)領(lǐng)域曾被廣泛應(yīng)用。雖然在二十世紀(jì)七十年代就開(kāi)始被禁止生產(chǎn),但PCBs在環(huán)境中極難分解,能夠在生物體內(nèi)大量富集,并代謝生成多氯聯(lián)苯醌（Polychlorinated biphenyl quinones,PCBQs）類化合物,在機(jī)體中產(chǎn)生大量ROS,造成氧化應(yīng)激,導(dǎo)致多種毒性效應(yīng)。動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）是冠心病和卒中的主要病因,近年來(lái)很多研究發(fā)現(xiàn)PCBs與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)聯(lián),是誘導(dǎo)AS的危險(xiǎn)因素之一。本文研究了PCBs典型的醌類代謝產(chǎn)物PCB29-pQ對(duì)AS的影響及其作用的分子機(jī)制。第一部分:該部分旨在研究PCB29-pQ對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的形成產(chǎn)生的影響。通過(guò)高脂飼養(yǎng)ApoE^-/-小鼠構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化模型并用PCB29-pQ干預(yù)。動(dòng)物隨機(jī)分為對(duì)照組和PCB29-pQ組,同時(shí)高脂飼養(yǎng),PCB29-pQ組每周一次腹腔注射玉米油溶解的PCB29-pQ,對(duì)照組給予等量的玉米油。給藥10周后,取小鼠主動(dòng)脈進(jìn)... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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摘要
ABSTRACT
縮寫(xiě)符號(hào)對(duì)照表
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 多氯聯(lián)苯
        1.2.1 多氯聯(lián)苯的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)
        1.2.2 多氯聯(lián)苯的國(guó)內(nèi)外污染現(xiàn)狀
        1.2.3 多氯聯(lián)苯的暴露與毒性
        1.2.4 多氯聯(lián)苯的代謝
    1.3 小窩蛋白caveolin-1
        1.3.1 caveolin-1的結(jié)構(gòu)
        1.3.2 caveolin-1的功能
    1.4 microRNA的特點(diǎn)和作用方式
    1.5 動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制
        1.5.1 炎癥與動(dòng)脈粥樣硬化
        1.5.2 凋亡與動(dòng)脈粥樣硬化
        1.5.3 非編碼RNA與動(dòng)脈粥樣硬化
    1.6 持久性有機(jī)污染物與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系
    1.7 立體依據(jù)及意義
-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成">第二章 PCB 29-pQ加速ApoE^-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型建立及PCB 29-pQ干預(yù)
        2.3.2 小鼠取材
        2.3.3 主動(dòng)脈整體油紅0染色
        2.3.4 HE染色
        2.3.5 免疫熒光組化
        2.3.6 組織TUNEL實(shí)驗(yàn)
        2.3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
-/-小鼠主動(dòng)脈斑塊面積的影響">        2.4.1 PCB 29-pQ對(duì)ApoE^-/-小鼠主動(dòng)脈斑塊面積的影響
-/-小鼠主動(dòng)脈的聚集">        2.4.2 PCB 29-pQ誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞在ApoE^-/-小鼠主動(dòng)脈的聚集
-/-小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡">        2.4.3 PCB 29-pQ誘導(dǎo)ApoE^-/-小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡
    2.5 討論
第三章 PCB 29-pQ通過(guò)CAV1磷酸化誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)和動(dòng)脈粥樣硬化的形成
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.4 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
        3.3.2 動(dòng)物分組
        3.3.3 細(xì)胞總蛋白提取與定量
        3.3.4 Western Blot實(shí)驗(yàn)
        3.3.5 細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        3.3.6 免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
        3.3.7 單核細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)
        3.3.8 siRNA轉(zhuǎn)染
        3.3.9 油紅O染色
        3.3.10 HE染色
        3.3.11 免疫組化
        3.3.12 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)
        3.3.13 活性氧（ROS）檢測(cè)
        3.3.14 統(tǒng)計(jì)分析
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 PCB 29-pQ激活內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)
        3.4.2 CAV1磷酸化參與PCB 29-pQ誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)
        3.4.3 CAV1與eNOS的相互作用影響PCB 29-pQ誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)
        3.4.4 PCB 29-pQ通過(guò)CAV1磷酸化誘導(dǎo)TLR4結(jié)合到CAV1
        3.4.5 PCB 29-pQ通過(guò)CAV1磷酸化誘導(dǎo)IRAK1從CAV1解離
        3.4.6 敲除CAV1抑制PCB 29-pQ誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化形成
-/-小鼠主動(dòng)脈炎癥因子表達(dá)">        3.4.7 敲除CAV1抑制PCB 29-pQ誘導(dǎo)的ApoE^-/-小鼠主動(dòng)脈炎癥因子表達(dá)
    3.5 討論
第四章 PCB 29-pQ通過(guò)調(diào)控miR-7-5p誘導(dǎo)HUVECs的凋亡和動(dòng)脈粥樣硬化的形成
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        4.2.2 細(xì)胞株
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.4 實(shí)驗(yàn)試劑
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型建立及PCB 29-pQ干預(yù)
        4.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.3.3 核酸原位雜交
        4.3.4 細(xì)胞microRNA測(cè)序
        4.3.5 細(xì)胞存活率實(shí)驗(yàn)
        4.3.6 蛋白提取和Western blot實(shí)驗(yàn)
        4.3.7 血管生成實(shí)驗(yàn)
        4.3.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        4.3.9 線粒體膜電位（JC-1）檢測(cè)
        4.3.10 miRNA mimics/inhibitor轉(zhuǎn)染
        4.3.11 雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
        4.3.12 生物信息學(xué)分析
        4.3.13 統(tǒng)計(jì)分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 PCB 29-pQ抑制HUVECs血管生成并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
        4.4.2 PCB 29-pQ改變HUVECs中microRNA和mRNA的表達(dá)
        4.4.3 干擾miR-7-5p后影響PCB 29-pQ誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷
        4.4.4 miR-7-5p靶向作用于PPME1和TGF-β2
        4.4.5 干擾PPME1和TGF-β2影響PCB 29-pQ誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡
-/-小鼠主動(dòng)脈miR-7-5p,下調(diào)PPME1和TGF-β2的表達(dá)">        4.4.6 PCB 29-pQ上調(diào)ApoE^-/-小鼠主動(dòng)脈miR-7-5p,下調(diào)PPME1和TGF-β2的表達(dá)
    4.5 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]多氯聯(lián)苯（PCBs）污染現(xiàn)狀分析[J]. 胡芳,許振成.  廣東化工. 2012(01)



本文編號(hào)：3151457