褪黑素對動脈粥樣硬化兔心肌細胞凋亡的影響及其機制的研究
發(fā)布時間:2021-04-20 07:03
目的探討褪黑素(melatonin)對實驗性動脈粥樣硬化兔心肌細胞凋亡的保護作用及其可能的分子機制。方法(1)動脈粥樣硬化兔模型:普通級純種新西蘭大耳白兔隨機分為3組,正常組:飼喂普通飼料;模型組:飼喂高脂飼料(普通飼料+1%膽固醇+5%豬油);褪黑素組:飼喂高脂飼料的同時MLT灌胃10 mg/(kg·d)治療。純種大耳白兔適應性飼養(yǎng)一周后,采用高脂飲食誘導造模,同時給予褪黑素藥物治療。于12周后處死進行采血,檢測血清中血脂等指標。取動脈進行油紅染色,檢測脂質(zhì)斑塊形成情況;取心臟組織,石蠟包埋后HE染色和Masson染色觀察心肌組織中細胞質(zhì)細胞核染色情況以及膠原纖維的分布變化;原位末端標記法(TUNEL)觀察心肌組織細胞凋亡情況;免疫組化(immunohistochemistry)檢測CHOP,Caspase-12等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激(endoplasmic reticulum stress)相關蛋白的表達水平。此外,為探討其可能的分子機制,Western blot法檢測凋亡相關蛋白(Caspase-9,Caspase-3,bcl-2,bax)的表達情況以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關蛋白(GRP78,CH...
【文章來源】:安徽醫(yī)科大學安徽省
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞對照表(Abbreviation)
摘要
Abstract
1 前言
2 材料與方法
2.1 做實驗所需器材
2.2 AS模型的建立
2.3 制作標本
2.4 檢測血清指標
2.5 石蠟切片
2.6 HE染色
2.7 Masson染色
2.8 檢測心肌細胞凋亡(TUNEL)法
2.9 免疫組織化學(IHC)
2.10 Western Blot
2.11 細胞培養(yǎng)
2.12 Hoechst33258染色
2.13 MTT法
2.14 Westernblot(心肌細胞)
2.15 統(tǒng)計學處理
3 實驗結(jié)果
3.1 油紅染色法檢測斑塊形成
3.2 血脂統(tǒng)計結(jié)果
3.3 HE染色結(jié)果
3.4 MASSON染色結(jié)果
3.5 TUNEL法檢測心肌細胞凋亡
3.6 兔心肌組織Caspase-12,CHOP表達變化
3.7 褪黑素對動脈粥樣硬化兔心肌細胞凋亡信號相關蛋白的影響
3.8 褪黑素對動脈粥樣硬化兔心肌細胞ERS相關蛋白表達的影響
3.9 不同濃度PA對心肌細胞H9C2的影響
3.10 棕櫚酸對H9c2細胞凋亡的影響
3.11 褪黑素對棕櫚酸處理的H9c2細胞ERS相關蛋白的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
附錄一 個人簡歷
附錄二 致謝
綜述
參考文獻
本文編號:3149214
【文章來源】:安徽醫(yī)科大學安徽省
【文章頁數(shù)】:59 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞對照表(Abbreviation)
摘要
Abstract
1 前言
2 材料與方法
2.1 做實驗所需器材
2.2 AS模型的建立
2.3 制作標本
2.4 檢測血清指標
2.5 石蠟切片
2.6 HE染色
2.7 Masson染色
2.8 檢測心肌細胞凋亡(TUNEL)法
2.9 免疫組織化學(IHC)
2.10 Western Blot
2.11 細胞培養(yǎng)
2.12 Hoechst33258染色
2.13 MTT法
2.14 Westernblot(心肌細胞)
2.15 統(tǒng)計學處理
3 實驗結(jié)果
3.1 油紅染色法檢測斑塊形成
3.2 血脂統(tǒng)計結(jié)果
3.3 HE染色結(jié)果
3.4 MASSON染色結(jié)果
3.5 TUNEL法檢測心肌細胞凋亡
3.6 兔心肌組織Caspase-12,CHOP表達變化
3.7 褪黑素對動脈粥樣硬化兔心肌細胞凋亡信號相關蛋白的影響
3.8 褪黑素對動脈粥樣硬化兔心肌細胞ERS相關蛋白表達的影響
3.9 不同濃度PA對心肌細胞H9C2的影響
3.10 棕櫚酸對H9c2細胞凋亡的影響
3.11 褪黑素對棕櫚酸處理的H9c2細胞ERS相關蛋白的影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
附錄一 個人簡歷
附錄二 致謝
綜述
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本文編號:3149214
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