背景:肺動(dòng)脈高壓（Pulmonary Hypertension,PH）是以肺血管阻力（pulmonary vascular resistance,PVR）進(jìn)行性升高為主要特征的病理過程,最終導(dǎo)致右心功能進(jìn)行性衰竭和死亡。持續(xù)的肺血管收縮、過度的肺血管重塑、原位血栓的形成和肺血管硬度增大是引起PVR增高、導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓的主要因素。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs）和內(nèi)皮細(xì)胞的過度增殖是造成血管壁增厚和管腔阻塞、引起小肺動(dòng)脈和小動(dòng)脈血管結(jié)構(gòu)重塑,最終導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓的關(guān)鍵因素。部分家族性肺動(dòng)脈高壓和特發(fā)性肺動(dòng)脈高壓與骨形成蛋白Ⅱ型受體（BMPR2）基因突變相關(guān),其它多種刺激和因子如低氧等都與該病有關(guān),但大部分肺動(dòng)脈高壓形成的具體分子機(jī)制尚不完全明確。Notch基因家族編碼一組負(fù)責(zé)細(xì)胞間信號(hào)傳遞的單鏈跨膜蛋白。研究顯示Notch信號(hào)在調(diào)控PASMC增殖、分化過程中起重要作用。PH患者樣本中Notch3的m RNA和蛋白表達(dá)明顯增高,Notch3-HES5信號(hào)通路在人PH和小鼠低氧誘導(dǎo)造成的PH形成中發(fā)揮重要作用。Not... 

【文章來源】：首都醫(yī)科大學(xué)北京市

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        1.2 試劑和藥品
        1.3 主要儀器設(shè)備
    2 方法
        2.1 溶液配制
        2.2 細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        2.3 PCR和Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.4 鈣成像實(shí)驗(yàn)
結(jié)果
    1 細(xì)胞增殖結(jié)果
        1.1 MTT法檢測低氧對(duì)的HPASMCs生長曲線的影響
        1.2 Brdu法檢測低氧誘導(dǎo)的HPASMCs增殖能力改變
    2 低氧誘導(dǎo)HPASMCs的Notch3蛋白表達(dá)和基因轉(zhuǎn)錄變化
        2.1 低氧誘導(dǎo)HPASMCs的Notch3蛋白表達(dá)和基因轉(zhuǎn)錄變化
        2.2 低氧誘導(dǎo)HPASMCs的HES5蛋白表達(dá)變化
    3 敲低Notch3對(duì)低氧誘導(dǎo)的HPASMCs增殖的影響
        3.1 不同濃度DAPT對(duì)低氧HPASMCs增殖的抑制
        3.2 MTT法檢測DAPT對(duì)低氧和常氧培養(yǎng)的HPASMCs生長曲線的影響
        3.3 Brdu法檢測DAPT對(duì)常氧和低氧培養(yǎng)的HPASMCs增殖的影響
        3.4 DAPT抑制低氧誘導(dǎo)的Notch3ICD蛋白表達(dá)增高
        3.5 Brdu法檢測Notch3-siRNA對(duì)低氧誘導(dǎo)HPASMCs增殖的影響
        3.6 Notch3-siRNA在轉(zhuǎn)錄水平敲低Notch3在低氧誘導(dǎo)HPASMCs的過表達(dá)
        3.7 Notch3-siRNA抑制低氧誘導(dǎo)的Notch3ICD蛋白表達(dá)增高
    4 低氧誘導(dǎo)對(duì)HPASMCs的細(xì)胞鈣離子變化的影響
        4.1 低氧對(duì)HPASMCs的細(xì)胞靜息鈣、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣和CCE的影響
        4.2 抑制Notch3對(duì)低氧誘導(dǎo)的HPASMCs的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣和CCE的影響
    5 抑制Notch3對(duì)低氧誘導(dǎo)HPASMCs的mTOR信號(hào)通路的影響
        5.1 DAPT對(duì)低氧誘導(dǎo)HPASMCs的p-mTOR表達(dá)影響
        5.2 DAPT對(duì)低氧誘導(dǎo)HPASMCs的p-P70S6K表達(dá)影響
        5.3 DAPT對(duì)低氧誘導(dǎo)HPASMCs的p-4EBP1表達(dá)影響
        5.4 siRNA敲低Notch3對(duì)mTOR通路中p-P70S6K蛋白表達(dá)影響
討論
    1 Notch3信號(hào)通路與PH
        1.1 Notch信號(hào)通路
        1.2 Notch3信號(hào)通路與PH
    2 細(xì)胞庫容性鈣釋放與PH
    3 mTOR信號(hào)通路與PH
        3.1 mTOR信號(hào)通路
        3.2 mTOR信號(hào)通路與PH
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄:攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
攻讀學(xué)位期間參加學(xué)術(shù)會(huì)議交流情況
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：3110275