目的:固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白（SCAP）又稱膽固醇敏感器,在機(jī)體內(nèi)膽固醇調(diào)節(jié)中起重要作用。以往研究也主要在脂代謝方面,近年來,對(duì)該基因在發(fā)育中的認(rèn)識(shí)進(jìn)一步加深,特別是胚胎時(shí)期引起各種器官異常改變。本研究中,主要探討了該基因缺失在轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎心臟流出道中的影響及機(jī)制。方法:本研究選擇了采用Cre/loxp系統(tǒng)構(gòu)建血管平滑肌細(xì)胞特異性表達(dá)Cre酶的（SM22-Cre）敲除SCAP的轉(zhuǎn)基因小鼠作為工具鼠,包括SCAP^flox/flox和SM22-Cre^+/-小鼠。將雌性SCAP^flox/flox與雄性SM22-Cre^+/-小鼠交配,得到SM22-Cre;SCAP^flox/+,即實(shí)驗(yàn)所需的血管平滑肌特異性SCAP敲除小鼠。進(jìn)一步行DNA鑒定,再篩所需基因型。將得到的SM22-Cre/SCAP^flox/+小鼠進(jìn)行交配,于小鼠胚胎期按時(shí)間點(diǎn)E9.5、E10.5、E11.5、E12.5d、E13.5、E14.5d、E16.5d、E18.5d取胚胎鼠尾鑒定,統(tǒng)... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

血管平滑肌細(xì)胞特異性敲除SCAP小鼠交配方案

圖 1 血管平滑肌細(xì)胞特異性敲除 SCAP 小鼠交配方案ating protocol in mice with SCAP knockout by vascular smcellsPCR 方法行基因型鑒定 PCR 鑒定小鼠基因型，在下圖中分別可見各中基因型小鼠CAP WT 條帶可見 SCAP 在 400bp 處，SCAPflox/+SCAP 條帶顯，SCAPflox/flox條帶顯示在 450bp 處。在 B 圖中 Cre-/- e+/- 條帶在 324bp 和 100bp 兩處均有顯像。（圖 3）

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文組小鼠中，心臟 SCAP 的表達(dá)有明顯下降超過 70%，與對(duì)照組相比，差學(xué)意義，而在肝臟和肺組織中，SCAP 的表達(dá)在兩組中無差異，說明 具有血管平滑肌的特異性。（圖 4）


本文編號(hào)：3099940