目的:程序性壞死,也稱為壞死性凋亡,在心肌缺血/再灌注損傷（MIRI）中起重要作用。球狀脂聯(lián)素（gAd）是一種蛋白質(zhì)激素,其調(diào)節(jié)許多代謝過程并在心血管穩(wěn)態(tài)中起重要作用,包括在MIRI期間保護(hù)心肌細(xì)胞,但在缺氧/復(fù)氧條件下gAd對(duì)心肌細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制仍不清楚。我們使用SD新生大鼠心室肌細(xì)胞（NRVMs）建立心肌缺氧/復(fù)氧模型,旨在研究gAd在缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和壞死性凋亡中的作用方法:本實(shí)驗(yàn)將gAd（0,0.5,1和2μg/ml,24小時(shí)）預(yù)處理培養(yǎng)的SD新生大鼠心室肌細(xì)胞（NRVM）暴露于缺氧/復(fù)氧條件下,然后分別使用MTT和LDH測(cè)定分析細(xì)胞活力和LDH水平;使用TUNEL染色的方法來區(qū)分細(xì)胞凋亡和壞死之間的發(fā)生的情況及比例;Western Blot用于評(píng)估細(xì)胞凋亡和程序性壞死相關(guān)蛋白的的表達(dá)水平（包括caspase3,RIP1,RIP3,p38/MAPK,NF-κB,Bcl-2和Bax等蛋白）。根據(jù)免疫熒光法來檢測(cè)活性氧（ROS）水平,然后分別通過丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒來檢測(cè)其活性,從而評(píng)估氧化應(yīng)激。結(jié)果:1.gAd通過增加細(xì)胞活力和細(xì)胞數(shù)量,減少LD... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
常用縮寫詞中英文對(duì)照表
前言
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)分組
        1.1.3 主要試劑
        1.1.4 試劑盒
        1.1.5 主要耗材及儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 主要試劑的配置
        1.2.2 細(xì)胞缺氧/復(fù)氧培養(yǎng)
        1.2.3 細(xì)胞活力測(cè)定
        1.2.4 caspase3免疫熒光和TUNEL雙染色
        1.2.5 NF-κB免疫熒光染色
        1.2.6 乳酸脫氫酶（LDH）
        1.2.7 原位檢測(cè)活性氧（ROS）
        1.2.8 T-SOD和MDA的測(cè)量
        1.2.9 Western blotting測(cè)定蛋白表達(dá)
        1.2.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析
2 結(jié)果
    2.1 球狀脂聯(lián)素減輕缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的新生大鼠心室肌細(xì)胞損傷
    2.2 gAd可以抑制缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的程序性壞死和細(xì)胞凋亡
    2.3 球狀脂聯(lián)素通過減弱細(xì)胞凋亡和程序性壞死來保護(hù)缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷
    2.4 球形脂聯(lián)素在減輕缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡和程序性壞死中的合理作用
    2.5 球狀脂聯(lián)素可以通過減少ROS的產(chǎn)生,減少缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷
    2.6 球狀脂聯(lián)素主要通過p38MAPK/NF-κB信號(hào)通路抑制缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡和程序性壞死
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 脂聯(lián)素及其受體在心血管疾病中的作用和機(jī)制研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
    承擔(dān)/參與的科研課題
    研究成果
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3085977