目的研究過氧化物還原酶1（peroxiredoxin 1,Prdx1）在大鼠心肌缺血/再灌注損傷（myocardial ischemia/reperfusion injury,MIRI）模型中的表達變化,并分析其通過ROS誘導的MAPK通路在MIRI模型中對心肌細胞凋亡的影響。方法成年雄性清潔級SD（Sprague Dawley）大鼠64只,隨機分為8組,假手術組作為對照,實驗組包括:缺血30 min后再灌注0 h,2 h,4 h,6 h,8 h,12 h,24 h組。采用結扎-松開冠脈左前降支的方法,構建大鼠缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion,I/R）損傷模型;采用原代心肌細胞及H9c2細胞缺氧復氧（Hypoxia/Reoxygenation,H/R）刺激,構建體外模型。應用心電圖（electrocardiogram,ECG）驗證在體模型構建是否成功;采用蛋白免疫印跡（Western Blot,WB）、免疫組織化學（Immunohistochemistry,IHC）檢測Prdx1等蛋白表達變化;采用免疫熒光染色（Immunofluorescence,IF）檢測Pr... 

【文章來源】：南通大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 課題來源、研究的目的和意義
    1.2 國內(nèi)外研究概況
        1.2.1 國外研究概況
        1.2.2 國內(nèi)研究概況
    1.3 論文的主要研究內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 研究資料及儀器設備
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 構建大鼠心肌缺血/再灌注損傷模型
        2.2.2 原代心肌細胞的提取
        2.2.3 細胞的培養(yǎng)、刺激及轉染
        2.2.4 蛋白免疫印跡實驗（western blot）分析
        2.2.5 免疫組化
        2.2.6 免疫熒光
        2.2.7 TUNEL檢測細胞凋亡
        2.2.8 CCK8檢測細胞活性
        2.2.9 細胞活性氧檢測
        2.2.10 流式細胞術檢測細胞凋亡
        2.2.11 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計學分析
第三章 結果
    3.1 大鼠心肌缺血/再灌注損傷模型驗證
    3.2 Prdx1在大鼠心肌缺血/再灌注損傷模型中的表達變化
    3.3 Prdx1在大鼠心肌缺血/再灌注損傷模型中的定位變化
    3.4 Prdx1表達定位于大鼠心肌組織
    3.5 大鼠原代心肌細胞形態(tài)學觀察
    3.6 大鼠原代心肌細胞鑒定
    3.7 構建細胞缺氧復氧模型
    3.8 Prdx1與缺血/再灌注誘導的細胞凋亡相關
    3.9 MAPK通路對心肌細胞凋亡的調節(jié)
    3.10 Prdx1通過MAPK通路調節(jié)心肌細胞的凋亡
    3.11 ROS是MAPK通路的上游調節(jié)因子
第四章 討論
    4.1 心肌缺血/再灌注損傷與ROS誘導的細胞凋亡
    4.2 心肌缺血/再灌注損傷與MAPK通路
    4.3 Prdx1與心肌缺血/再灌注損傷
第五章 結論
參考文獻
英文縮寫詞表
綜述
    綜述參考文獻
在攻讀碩士學位期間公開發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]甲基原薯蕷皂苷對心肌細胞內(nèi)鈣及ATP酶功能的影響及其機制[J]. 寧宗,李貽奎,張榮利.  中國中藥雜志. 2010(01)



本文編號：3083952