研究背景及目的:動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）是一種多因素共同參與的慢性疾病,是眾多心血管疾病的病理基礎(chǔ)。據(jù)《中國心血管病報(bào)告2018》報(bào)道,我國心血管疾�。–ardiovascular disease,CVD）患病率處于持續(xù)上升狀態(tài),截止2018年我國CVD患者已高達(dá)2.9億,嚴(yán)重危害人們的健康。眾多研究表明,炎癥反應(yīng)參與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的各個(gè)階段,當(dāng)血管受到炎癥因素的刺激時(shí),受損的血管內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞相互作用引發(fā)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng),促進(jìn)單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附作用,此為動(dòng)脈粥樣硬化病程起始的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。白細(xì)胞介素1β（Interleukin-1β,IL-1β）是由單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生和釋放的多功能細(xì)胞因子,可刺激集落刺激因子、血小板生長因子等細(xì)胞因子的產(chǎn)生,并可在細(xì)胞粘附、組織修復(fù)中起作用。有研究提出,脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）可使IL-1β表達(dá)上調(diào),并促進(jìn)單核細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞粘附。但是,LPS調(diào)控IL-1β表達(dá)的具體機(jī)制尚不清楚,有待進(jìn)一步研究。囊泡型ATP酶（Vacuolar ATP-ase,V-ATPase）是一種細(xì)胞... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．ＬＰＳ對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中ＡＴＰ６ｖ０ｄ２表達(dá)的影響

水平??由上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在ＬＰＳ刺激下，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中ＩＬ－ｌｐ表達(dá)上調(diào)，??而ＡＴＰ６ｖ０ｄ２表達(dá)下調(diào)，然而ＡＴＰ６ｖ０ｄ２是否參與調(diào)節(jié)ＬＰＳ誘導(dǎo)的ＩＬ－ｉｐ表達(dá)上??調(diào)仍需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證明。因此我們設(shè)計(jì)了?ＡＴＰ６ｖ０ｄ２的小干擾ＲＮＡ??（ｓｉＲＮＡ－ＡＴＰ６ｖ０ｄ２），轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞后，從轉(zhuǎn)錄和翻譯水平檢測干擾??效果，選取干擾效果最佳的ｓｉＲＮＡ作為后續(xù)研究的靶片段。接下來，我們根據(jù)??是否使用ＬＰＳ處理和是否轉(zhuǎn)染ｓｉＲＮＡ－ＡＴＰ６ｖ０ｄ２，設(shè)置四個(gè)實(shí)驗(yàn)組，如圖３Ａ－３Ｃ??所示，與對照組相比，單純使用ＬＰＳ處理人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和單純轉(zhuǎn)染??ｓｉＲＮＡ－ＡＴＰ６ｖ０ｄ２時(shí)，均可見ＡＴＰ６ｖ０ｄ２表達(dá)下調(diào)，而ＩＬ－１（３表達(dá)上調(diào)；在使用??ＬＰＳ處理人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的同時(shí)轉(zhuǎn)染ｓｉＲＮＡ－ＡＴＰ６ｖ０ｄ２，可見ＡＴＰ６ｖ０ｄ２下調(diào)??更加顯著，于此同時(shí)ＩＬ－１Ｐ的上調(diào)效果也被顯著增強(qiáng)。由此推測ＬＰＳ可通過??ＡＴＰ６ｖ０ｄ２調(diào)控人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中ＩＬ－ｌｐ的表達(dá)水平。??ＡＢＣ??｜?＾０］?Ｍ?２５０１?■?ＮＣ??－?＊?１：?■?ＬＰＳ?＊??ｚ？?Ｔ?ｒ?ｃ?＾?２００－?■?ｓｉＲＮＡ－ＡＴＰ６ｖ０ｄ２?＊?Ｉ??〒?Ｓ?勝?＇ＨＰ?＝！?ＬＰＳ＋ｓ，ＲＮＡ?＊?Ｔ?＇??ｌ｜?；?ｉ?ＡＴ隨丨ＩＴ５０＇??ｆｏＷｌＬ?Ｋ｜ｉ：；?Ｉ??ＡＴＰ６ｖ０ｄ２?ＩＬ－ｉｐ??圖３．ＡＴＰ６ｖ０ｄ２介導(dǎo)ＬＰＳ誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中ＩＬ－ｉｐ的表達(dá)。??Ａ－Ｃ，用或不用ＬＰＳ處理人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的同時(shí)轉(zhuǎn)染或不轉(zhuǎn)染ｓｉＲＮＡ－ＡＴＰ６ｖ０ｄ２，繼續(xù)??培養(yǎng)２４小時(shí)提取總ＲＮＡ


本文編號(hào)：3074293