本文關(guān)鍵詞：Corin介導(dǎo)的pro-ANP活化途徑與糖尿病心肌病關(guān)系的實驗研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一組以慢性血糖水平增高為特征的代謝性疾病,是由于胰島素分泌和/或作用缺陷所引起。隨著糖尿病發(fā)病率的逐年上升,其并發(fā)的糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)也日益受到人們重視。糖尿病心肌病是糖尿病常見的心血管并發(fā)癥,是糖尿病患者心力衰竭及猝死的首要原因,其典型臨床癥狀是心臟增大、心律失常,較易發(fā)生充血性心力衰竭,而其發(fā)病機制目前尚不完全清楚。Corin是一種主要在心臟表達的絲氨酸蛋白酶,能夠高度特異的將心房鈉尿肽原(pro-atrial natriuretic peptide,pro-ANP)轉(zhuǎn)化為有活性的心房鈉尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)。ANP是一種可以促進腎臟排鈉、排水和舒張血管平滑肌的多肽類激素,主要在心房肌細(xì)胞中合成,其與心力衰竭和高血壓的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),Corin基因缺失或表達減少與重大心血管疾病如心力衰竭、心肌肥厚及高血壓等的發(fā)病密切相關(guān)。但心臟酶Corin介導(dǎo)的pro-ANP活化途徑在糖尿病心肌病中是否發(fā)揮作用,目前尚不清楚。因此,本課題采用鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)構(gòu)建的糖尿病心肌病SD大鼠動物模型、高糖誘導(dǎo)的乳鼠原代心肌細(xì)胞及高糖誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞株,從整體、細(xì)胞、分子等不同層面,通過體內(nèi)、體外實驗研究,探討Corin介導(dǎo)的pro-ANP活化途徑與糖尿病心肌病之間的關(guān)系。方法1.一次性腹腔注射STZ構(gòu)建糖尿病SD大鼠動物模型;2.超聲心動圖、血流動力學(xué)及大鼠心臟重量與體重的比值(心重/體重,HW/BW)檢測,以鑒定糖尿病心肌病SD大鼠動物模型;3.透射電子顯微鏡觀察大鼠心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變;4.RT-PCR和Real-Time PCR檢測Corin及ANP m RNA在DCM大鼠心肌組織中的表達;5.Western Blot和免疫組織化學(xué)檢測Corin及ANP蛋白在DCM大鼠心肌組織中的表達;6.Western Blot檢測Corin及ANP在注射STZ后第12、16、20和33周的DCM大鼠心肌組織中的表達;7.ELISA檢測DCM大鼠血漿中N末端心房鈉尿肽原(N-terminal pro-atrial natriuretic peptide,NT-pro ANP)的濃度;8.Real-Time PCR檢測Corin和ANP m RNA在高糖誘導(dǎo)的乳鼠原代心肌細(xì)胞中的表達;9.Western Blot和細(xì)胞免疫熒光染色檢測Corin和ANP蛋白在高糖誘導(dǎo)的乳鼠原代心肌細(xì)胞中的表達;10.Western Blot檢測Corin和ANP蛋白在高糖誘導(dǎo)36 h、48 h和60 h的乳鼠原代心肌細(xì)胞中的表達;11.Western Blot檢測Corin和ANP蛋白在高糖誘導(dǎo)36 h、48 h和60 h的H9c2心肌細(xì)胞株中的表達。結(jié)果1.成功構(gòu)建糖尿病SD大鼠動物模型:STZ注射一周后,DCM組大鼠隨機血糖水平大于16.7 mmol/L,尿糖陽性,且出現(xiàn)多飲、多食、多尿現(xiàn)象。與Ctrl組大鼠相比,DCM組大鼠隨機血糖水平明顯升高(P0.01),體重明顯降低(P0.01)。2.成功構(gòu)建糖尿病心肌病SD大鼠動物模型:超聲心動圖檢查顯示,與Ctrl組大鼠相比,DCM組大鼠IVSd、LVPWd與LVIDd均減弱(P0.05),LVIDs明顯升高(P0.01),FS%與EF%均明顯降低(P0.01);血流動力學(xué)檢查結(jié)果顯示,DCM組大鼠+dp/dt與-dp/dt明顯低于Ctrl組(P0.01),MABP無明顯差異(P0.05);DCM組HW/BW值明顯高于Ctrl組(P0.01);3.在透射電子顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),Ctrl組大鼠心肌組織肌纖維排列規(guī)則,心肌細(xì)胞形態(tài)正常,超微結(jié)構(gòu)完整,線粒體包膜完整,線粒體嵴分布均勻;而DCM組大鼠心肌組織肌纖維排列紊亂,心肌細(xì)胞形態(tài)異常,超微結(jié)構(gòu)改變明顯,線粒體包膜輪廓不清,亦可見線粒體包膜破損,線粒體嵴分布不均,線粒體嵴間距增大,甚至可見線粒體破潰死亡,可見較多糖原沉積;4.大鼠心肌組織RT-PCR及Real-Time PCR結(jié)果顯示,DCM組Corin和ANP m RNA表達水平均明顯低于Ctrl組(P0.05);5.大鼠心肌組織Western Blot及免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,DCM組Corin和ANP蛋白表達水平均明顯低于Ctrl組(P0.05);6.大鼠心肌組織Western Blot結(jié)果顯示,隨著DCM大鼠周齡的增加,Corin和ANP蛋白表達水平逐漸降低;7.大鼠血漿ELISA結(jié)果顯示,DCM組血漿NT-pro ANP濃度明顯低于Ctrl組(P0.01);8.乳鼠原代心肌細(xì)胞Real-Time PCR結(jié)果顯示,高糖(high glucose,HG)組誘導(dǎo)的乳鼠原代心肌細(xì)胞中Corin和ANP m RNA表達水平明顯低于正常對照(normal glucose,Ctrl)組(P0.01);9.乳鼠原代心肌細(xì)胞Western Blot及細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果顯示,HG組Corin和ANP蛋白表達水平均明顯低于Ctrl組(P0.05);10.乳鼠原代心肌細(xì)胞Western Blot結(jié)果顯示,隨著高糖環(huán)境誘導(dǎo)時間的延長,Corin和ANP蛋白表達水平逐漸降低;11.H9c2心肌細(xì)胞株Western Blot結(jié)果顯示,隨著高糖環(huán)境誘導(dǎo)時間的延長,Corin和ANP蛋白表達水平逐漸降低。結(jié)論1.成功構(gòu)建糖尿病SD大鼠動物模型;2.成功構(gòu)建糖尿病心肌病SD大鼠動物模型;3.在糖尿病心肌病中,Corin及ANP m RNA表達水平下降;4.在糖尿病心肌病中,Corin及ANP蛋白表達水平下降;5.Corin介導(dǎo)的pro-ANP活化途徑參與到糖尿病心肌病發(fā)病過程中,并與糖尿病心肌病病程密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：Corin心房鈉尿肽 活化途徑 心肌細(xì)胞 糖尿病心肌病
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R542.2
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-12
• 縮略語/符號說明12-14
• 前言14-20
• 研究現(xiàn)狀、成果14-19
• 研究目的、方法19-20
• 對象和方法20-39
• 結(jié)果39-52
• 討論52-57
• 結(jié)論57-58
• 參考文獻58-63
• 附錄63-66
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明66-67
• 綜述 Corin與心血管疾病的研究進展67-74
• 綜述參考文獻70-74
• 致謝74-75
• 個人簡歷75

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 余國膺;糖尿病心肌病:一種特異的表型[J];中國慢性病預(yù)防與控制;2005年01期

2 任駿;糖尿病心肌病的基礎(chǔ)與臨床研究現(xiàn)狀[J];心血管病學(xué)進展;2001年05期

3 李偉 ,吳智勇;糖尿病心肌病的研究進展[J];海南醫(yī)學(xué);2002年04期

4 張風(fēng)雷,玄軍華,崔良民;腫瘤壞死因子-α與糖尿病心肌病關(guān)系的研究[J];濟寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2003年03期

5 安濰洲,龔敏,董硯虎;糖尿病心肌病發(fā)病機理的研究進展[J];遼寧實用糖尿病雜志;2004年03期

6 王先銀,李樹森,廖明松;糖尿病心肌病的防治研究進展[J];西南國防醫(yī)藥;2004年04期

7 李長江,胡燕燕;糖尿病心肌病的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊;2004年04期

8 龔明,肖謙;過氧化物酶體增殖物激活受體α與糖尿病心肌病[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊;2004年06期

9 曾琳琳,張曉剛;糖尿病心肌病發(fā)病機制的研究[J];國外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊;2005年05期

10 王先銀,李樹森,廖明松;糖尿病心肌病的研究進展[J];西部醫(yī)學(xué);2005年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 白淑芝;孫健;張寧;李宏霞;侯俊青;孔凡娟;徐長慶;;鈣敏感受體在糖尿病心肌病發(fā)生中的作用[A];第八屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會論文集[C];2011年

2 崔金濤;許祖建;;糖尿病心肌病的研究近況[A];第七次中國中西醫(yī)結(jié)合糖尿病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

3 吳濤;胡申江;;結(jié)締組織生長因子在糖尿病心肌病中作用的研究進展[A];2004年浙江省心血管病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2004年

4 黃靜;倪青;;糖尿病心肌病的中西醫(yī)研究進展[A];5TH全國中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌代謝病學(xué)術(shù)大會暨糖尿病論壇論文集[C];2012年

5 張薇;鐘明;張運;;糖尿病心肌病心肌損傷機制研究進展[A];中華醫(yī)學(xué)會第十一次全國心血管病學(xué)術(shù)會議專題報告匯編[C];2009年

6 王東;周麗諾;;糖尿病心肌病大鼠的心肌基因表達譜分析及意義[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會第十次全國糖尿病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

7 劉冬戈;喬旭柏;杜俊;楊重慶;方芳;馬正中;陳曼麗;錢貽簡;;糖尿病心肌病的病理組織學(xué)觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會2007年學(xué)術(shù)年會暨第九屆全國病理大會論文匯編[C];2007年

8 張冉;江力勤;趙圣剛;陳善漿;葉先才;;新西蘭大白兔糖尿病心肌病模型的建立[A];2012年浙江省內(nèi)科學(xué)年會論文集[C];2012年

9 廖明松;王先銀;鄧旦;陳重;梁燕;賴小今;;糖尿病心肌病左室功能的多普勒組織成像評價實驗研究[A];2013中國西部聲學(xué)學(xué)術(shù)交流會論文集（下）[C];2013年

10 夏國蓮;馬偉斌;江榮林;雷澍;王靈聰;吳建濃;黃立權(quán);吳艷春;智屹惠;朱美飛;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白在糖尿病心肌病大鼠表達的變化[A];第三屆全國中西醫(yī)結(jié)合重癥醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 記者 白毅;燈盞花素為糖尿病心肌病治療辟新徑[N];中國醫(yī)藥報;2009年

2 記者　應(yīng)洪舒;糖尿病心肌病中氧自由基作用新研究[N];中國醫(yī)藥報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王佳興;Pink1/Parkin介導(dǎo)的線粒體自噬在糖尿病心肌病中的作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 柏丹娜;Inpp5f在糖尿病心肌病變中的作用及其機制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 肖鳳英;崔金濤學(xué)術(shù)思想與臨床經(jīng)驗總結(jié)及益氣養(yǎng)陰法治療糖尿病心肌病臨床與實驗研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 李建濤;Peli1蛋白在糖尿病心肌病中的作用及其機制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

5 相田園;中藥有效組分配伍調(diào)控p38MAPK通路改善糖尿病心肌病的機理研究[D];中國中醫(yī)科學(xué)院;2016年

6 瞿華;1,25(OH)_2D_3對PARP1/SIRT1/mTOR通路介導(dǎo)的糖尿病心肌病的保護作用研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

7 叢麗;心肌胃促胰酶與糖尿病心肌病變關(guān)系的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

8 張楠;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療糖尿病心肌病的研究[D];浙江大學(xué);2007年

9 常文光;黃連素對糖尿病心肌病的保護作用及機制研究[D];吉林大學(xué);2013年

10 鄒敬韜;九里香葉總黃酮及其單體對糖尿病心肌病的保護作用及機制[D];吉林大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 秦瑞婕;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病心肌病中的分子機制及蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];山東大學(xué);2015年

2 初銘鈺;糖心舒合劑改善糖尿病心肌病的臨床及實驗研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2015年

3 王瑩;ACE2-ACE平衡及炎癥反應(yīng)與糖尿病心肌病[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王巖飛;基于ERS介導(dǎo)的凋亡信號通路探討中藥治療糖尿病心肌病的機制[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

5 黃玉妹;糖心康治療氣陰兩虛兼絡(luò)脈瘀阻型糖尿病心肌病的臨床研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 荊哲;MICU1下調(diào)介導(dǎo)的線粒體鈣攝取障礙在糖尿病心肌病發(fā)生中的作用及機制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

7 周鵬飛;Corin介導(dǎo)的pro-ANP活化途徑與糖尿病心肌病關(guān)系的實驗研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

8 胡亞會;Corin在糖尿病心肌病發(fā)病機制中的作用[D];天津醫(yī)科大學(xué);2016年

9 谷青;組織同步成像評價糖尿病心肌病左心室運動同步性的初步研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2011年

10 齊東旭;糖尿病心肌病的早期臨床診斷[D];吉林大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：Corin介導(dǎo)的pro-ANP活化途徑與糖尿病心肌病關(guān)系的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：307403