目的探討miR-587是如何通過(guò)調(diào)節(jié)TLR4的表達(dá)來(lái)影響人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的。方法通過(guò)real-time PCR分析ox-LDL誘導(dǎo)/非誘導(dǎo)的人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中miR-587和TLR4的表達(dá)。MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-587對(duì)細(xì)胞增殖的影響。通過(guò)JC-1實(shí)驗(yàn)分析miR-587對(duì)細(xì)胞凋亡的影響。MIRDB預(yù)測(cè)miR-587與TLR4的結(jié)合位點(diǎn)后,利用熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測(cè)miR-587對(duì)TLR4的靶向作用,并通過(guò)Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-587對(duì)TLR4和Caspase 8的調(diào)節(jié)作用。在過(guò)表達(dá)miR-587的細(xì)胞中轉(zhuǎn)染TLR4,通過(guò)MTT、JC-1和Western blot檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡和TLR4和Caspase 8的表達(dá)情況。結(jié)果 real-time PCR指出ox-LDL誘導(dǎo)能夠下調(diào)miR-587的表達(dá)并且促進(jìn)TLR4的表達(dá)。MTT實(shí)驗(yàn)表明,轉(zhuǎn)染miR-587后細(xì)胞的增殖受到了顯著的促進(jìn)。JC-1實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)miR-587可以抑制人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。隨后MIRDB預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)miR-587與TLR4的3′UTR區(qū)域具有結(jié)合位點(diǎn),熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證明了miR-587可... 

【文章來(lái)源】：廣東醫(yī)學(xué). 2020,41(13)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

miR-587和TLR4的表達(dá)情況

miR-587明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖,與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),TLR4可以恢復(fù)由miR-587過(guò)表達(dá)導(dǎo)致的細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用,與miR-587組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。圖3 miR-587與TLR4的結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)

miR-587與TLR4的結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測(cè)


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