目的動(dòng)脈粥樣硬化是一種嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的血管慢性炎癥性病變。隨著對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入,越來(lái)越多的證據(jù)表明固有免疫和適應(yīng)性免疫均參與了該疾病的發(fā)生和發(fā)展。近年來(lái)的結(jié)果顯示,補(bǔ)體系統(tǒng)在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展中發(fā)揮了重要的作用。補(bǔ)體系統(tǒng)是機(jī)體固有免疫反應(yīng)中重要的一部分,有三條不同的活化通路（經(jīng)典通路、MBL通路和替代通路）,分別通過(guò)不同的機(jī)制活化C3和C5轉(zhuǎn)化酶,最終形成攻膜復(fù)合體（membrane attack complex, MAC）, MAC可在靶細(xì)胞上形成貫通細(xì)胞膜的通道,最終導(dǎo)致靶細(xì)胞的裂解。研究顯示MAC除了具有裂解細(xì)胞的效應(yīng)外,還有亞裂解作用,即,當(dāng)細(xì)胞膜表面形成的MAC濃度較低而不足以裂解細(xì)胞的時(shí)候,可以活化細(xì)胞內(nèi)一系列的信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞釋放炎性介質(zhì),影響內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的功能,參與炎癥反應(yīng)和血栓形成等過(guò)程。機(jī)體為了保護(hù)自身細(xì)胞免受補(bǔ)體攻擊,存在著多種補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白,它們分別在不同階段調(diào)節(jié)補(bǔ)體的活化,其中C3、C5轉(zhuǎn)化酶及MAC是重要的調(diào)節(jié)節(jié)點(diǎn)。CD59是一種重要的膜結(jié)合型補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白,主要功能是抑制MAC形成（圖1）。本課題組及其他學(xué)者發(fā)現(xiàn),在高脂飼料誘導(dǎo)的... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：130 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
CATEGORY
中文摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
第一章 CD59在糖尿病誘導(dǎo)的動(dòng)脈粥樣硬化中的作用
    前言
        一、補(bǔ)體系統(tǒng)及其調(diào)控
        二、補(bǔ)體與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系
        三、研究目的
    材料
    方法
        一、糖尿病小鼠模型的建立
-/-/Apoe^-/-和Apoe^-/-小鼠的基因型鑒定">            （一） mCd59ab^-/-/Apoe^-/-和Apoe^-/-小鼠的基因型鑒定
            （二） STZ誘導(dǎo)的糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型的建立
        二、檢測(cè)CD59缺失對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化的影響
            （一） 主動(dòng)脈獲得和切片制備
            （二） 主動(dòng)脈油紅O染色
            （三） 冰凍切片HE染色
            （四） 冰凍切片油紅O染色
            （五） 冰凍切片免疫熒光染色檢測(cè)MAC和巨噬細(xì)胞
            （六） 小鼠血清脂質(zhì)檢測(cè)
            （七） 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法
    結(jié)果
        一、STZ誘導(dǎo)的糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型的建立
        二、CD59的缺失促進(jìn)了糖尿病誘導(dǎo)的動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展
        三、CD59的缺失促進(jìn)了斑塊局部MAC的沉積和巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)
    討論
    小結(jié)
第二章 CR2靶向的補(bǔ)體抑制分子Crry對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的治療作用
    前言
        一、CR2介導(dǎo)的靶向補(bǔ)體抑制劑
        二、研究目的
    材料
    方法
        一、CR2-Crry的制備純化與標(biāo)記
            （一） CR2-Crry的真核細(xì)胞表達(dá)及純化
            （二） CR2-Crry的生物素標(biāo)記
        二、CR2-Crry在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊局部的靶向性
        三、動(dòng)脈粥樣硬化小鼠模型的建立以及CR2-Crry的干預(yù)治療
-/-/Apoe^-/-和Apoe^-/-小鼠的基因型鑒定">            （一） mCd59ab^-/-/Apoe^-/-和Apoe^-/-小鼠的基因型鑒定
            （二） CR2-Crry處理動(dòng)脈粥樣硬化小鼠
        四、動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展程度的檢測(cè)分析
            （一） 主動(dòng)脈獲得和切片制備
            （二） 主動(dòng)脈油紅O染色
            （三） 冰凍切片HE染色及油紅0染色
            （四） 冰凍切片免疫熒光染色檢測(cè)C3、MAC、巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞
            （五） 小鼠血清脂質(zhì)檢測(cè)
            （六） 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法
    結(jié)果
        一、CR2-Crry重組蛋白在真核細(xì)胞的表達(dá)及純化
        二、系統(tǒng)應(yīng)用CR2-Crry重組蛋白可靶向至動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的局部
        三、CR2-Crry治療可以減緩動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展
        四、CR2-Crry抑制斑塊局部C3的活化、MAC的形成
        五、CR2-Crry抑制斑塊局部炎性細(xì)胞浸潤(rùn)
    討論
    小結(jié)
第三章 補(bǔ)體攻膜復(fù)合體促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制研究
    前言
        一、攻膜復(fù)合體MAC的亞裂解作用
        二、泡沫細(xì)胞的形成
        三、研究目的
    材料
    方法
        一、細(xì)胞培養(yǎng)
            （一） 巨噬細(xì)胞培養(yǎng)
            （二） 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)
            （三） 細(xì)胞凍存
            （四） 細(xì)胞復(fù)蘇
        二、補(bǔ)體攻膜復(fù)合體對(duì)巨噬細(xì)胞泡沫化的影響
            （一） MAC對(duì)巨噬細(xì)胞的亞裂解濃度
            （二） 亞裂解濃度MAC對(duì)巨噬細(xì)胞泡沫化的影響
            （三） 油紅O染色
            （四） qRT-PCR
    結(jié)果
        一、亞裂解濃度MAC可促進(jìn)ox-LDL誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞泡沫化
        二、亞裂解濃度MAC增強(qiáng)的泡沫化不依賴(lài)于非受體介導(dǎo)的胞飲作用
        三、亞裂解濃度MAC可能通過(guò)上調(diào)清道夫受體CD36表達(dá),抑制脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)分子ABCA1,ABCG1的表達(dá)促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成
        四、亞裂解濃度MAC促進(jìn)巨噬細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞炎性細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子的表達(dá)
    討論
    小結(jié)
附圖表
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間主要科研成果及獲得榮譽(yù)
附件
附表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The Complement System in Liver Diseases[J]. Xuebin Qin1, 3 and Bin Gao21Laboratory for Translational Research, Harvard Medical School, Cambridge, MA 02139, USA; 2Section on Liver Biology, Laboratory of Physiologic Studies, National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism, National Institutes of Health, Bethesda, MD 20892, USA;.  Cellular & Molecular Immunology. 2006(05)



本文編號(hào)：3043156