宮內(nèi)慢性缺氧對成年雄性大鼠心肌細胞eNOS表達及磷酸化的影響
發(fā)布時間:2021-02-12 07:56
目的宮內(nèi)慢性缺氧將導致胎兒生長受限,從而誘發(fā)成年期心血管疾病。我們通過建立宮內(nèi)慢性缺氧大鼠模型,研究其對于成年期雄性心肌細胞形態(tài)學、心肌膠原纖維沉積、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial Nitric Oxide Synthase,eNOS)表達及eNOS磷酸化水平的影響,探討宮內(nèi)慢性缺氧導致成年期雄性心血管疾病的可能機制。方法健康SD孕鼠12只,于孕期第7天隨機分為兩組:缺氧組(H組)及對照組(C組)。缺氧組放置于低氧艙內(nèi),低氧艙內(nèi)氧氣濃度控制在(10.0±0.5)%,每日維持8小時。對照組同樣放置于低氧艙內(nèi),但通入空氣,維持氧氣濃度與艙外大氣相同,每日維持時長相同。重復上述過程直至孕鼠分娩(妊娠第21天)。孕鼠分娩后,使用隨機數(shù)字表法選取子代雄性大鼠各6只,正常喂養(yǎng)至11月齡。蘇木精-伊紅染色法(Hematoxylin-eosin Staining,HE)觀察及測量成年雄性大鼠心肌細胞直徑;馬松(Masson)染色法觀察及測量膠原纖維面積比例;實時定量熒光PCR法(Real Time PCR)檢測成年雄性大鼠心肌細胞eNOS mRNA表達;蛋白質(zhì)印跡法(Western Blo...
【文章來源】:福建醫(yī)科大學福建省
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
部分標本HE染色顯微鏡下對比(400倍)
圖 2.3 部分心肌組織 Masson 染色顯微鏡下形態(tài)(400 倍)表 2.2 兩組之間膠原纖維的面積百分比組別 膠原纖維的面積百分比(%)( x±s)對照組(C) 5.9828±2.4442缺氧組(H) 5.8604±1.6715:兩組之間差異無統(tǒng)計學意義。(F=0.23,P>0.05)01234567對照組(C) 缺氧組(H)膠原纖面積維分百(比%)
eal Time PCR 法檢測 eNOS mRNA 表達結(jié)果NA 完整性檢測 Trizol 提取 RNA,總 RNA 提取完成后檢測 OD260/OD280,結(jié)0/OD280 均處于 1.8~2.0,純度滿足實驗要求。RNA 電泳(瓊脂,其結(jié)果顯示 RNA 完整性良好,未見明顯降解(見圖 2.5) 。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]《中國心血管病報告2016》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風,楊躍進,鄭哲,蔣立新,胡盛壽. 中國循環(huán)雜志. 2017(06)
[2]產(chǎn)前缺氧降低7月齡子鼠心臟舒張功能及其相關分子機制[J]. 陳幼芳,杜心清,吳淳淳,林惠通,林文東. 中華高血壓雜志. 2016(12)
[3]基于“二胎”再育趨勢的產(chǎn)科安全影響因素分析及對策探討[J]. 陳淑芳,張晨,陳焱,程蔚蔚. 上海交通大學學報(醫(yī)學版). 2016(05)
[4]eNOS在EPO調(diào)節(jié)慢性缺氧心肌細胞線粒體生物合成中的作用機制研究[J]. 秦川,陳林,肖穎彬. 重慶醫(yī)學. 2015(16)
[5]慢性宮內(nèi)缺氧對子代大鼠心臟誘導型一氧化氮合酶、血清內(nèi)皮素1的影響[J]. 應紅安,黃子揚,王振華. 中國動脈硬化雜志. 2011(08)
[6]eNOS磷酸化與酶活性及中藥介入[J]. 史海霞,劉俊,薛永亮,俞林花,聶緒強,卞卡. 中國藥理學通報. 2011(03)
[7]宮內(nèi)慢性缺氧對子代大鼠血管內(nèi)皮功能的影響[J]. 王振華,黃子揚,呂國榮. 中國動脈硬化雜志. 2010(09)
碩士論文
[1]慢性間歇性缺氧對孕鼠子代鼠動脈粥樣硬化病變及Caveolin-1的影響[D]. 林輝煌.福建醫(yī)科大學 2013
本文編號:3030518
【文章來源】:福建醫(yī)科大學福建省
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
部分標本HE染色顯微鏡下對比(400倍)
圖 2.3 部分心肌組織 Masson 染色顯微鏡下形態(tài)(400 倍)表 2.2 兩組之間膠原纖維的面積百分比組別 膠原纖維的面積百分比(%)( x±s)對照組(C) 5.9828±2.4442缺氧組(H) 5.8604±1.6715:兩組之間差異無統(tǒng)計學意義。(F=0.23,P>0.05)01234567對照組(C) 缺氧組(H)膠原纖面積維分百(比%)
eal Time PCR 法檢測 eNOS mRNA 表達結(jié)果NA 完整性檢測 Trizol 提取 RNA,總 RNA 提取完成后檢測 OD260/OD280,結(jié)0/OD280 均處于 1.8~2.0,純度滿足實驗要求。RNA 電泳(瓊脂,其結(jié)果顯示 RNA 完整性良好,未見明顯降解(見圖 2.5) 。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]《中國心血管病報告2016》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風,楊躍進,鄭哲,蔣立新,胡盛壽. 中國循環(huán)雜志. 2017(06)
[2]產(chǎn)前缺氧降低7月齡子鼠心臟舒張功能及其相關分子機制[J]. 陳幼芳,杜心清,吳淳淳,林惠通,林文東. 中華高血壓雜志. 2016(12)
[3]基于“二胎”再育趨勢的產(chǎn)科安全影響因素分析及對策探討[J]. 陳淑芳,張晨,陳焱,程蔚蔚. 上海交通大學學報(醫(yī)學版). 2016(05)
[4]eNOS在EPO調(diào)節(jié)慢性缺氧心肌細胞線粒體生物合成中的作用機制研究[J]. 秦川,陳林,肖穎彬. 重慶醫(yī)學. 2015(16)
[5]慢性宮內(nèi)缺氧對子代大鼠心臟誘導型一氧化氮合酶、血清內(nèi)皮素1的影響[J]. 應紅安,黃子揚,王振華. 中國動脈硬化雜志. 2011(08)
[6]eNOS磷酸化與酶活性及中藥介入[J]. 史海霞,劉俊,薛永亮,俞林花,聶緒強,卞卡. 中國藥理學通報. 2011(03)
[7]宮內(nèi)慢性缺氧對子代大鼠血管內(nèi)皮功能的影響[J]. 王振華,黃子揚,呂國榮. 中國動脈硬化雜志. 2010(09)
碩士論文
[1]慢性間歇性缺氧對孕鼠子代鼠動脈粥樣硬化病變及Caveolin-1的影響[D]. 林輝煌.福建醫(yī)科大學 2013
本文編號:3030518
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