宮內(nèi)慢性缺氧對(duì)成年雄性大鼠心肌細(xì)胞eNOS表達(dá)及磷酸化的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-02-12 07:56
目的宮內(nèi)慢性缺氧將導(dǎo)致胎兒生長受限,從而誘發(fā)成年期心血管疾病。我們通過建立宮內(nèi)慢性缺氧大鼠模型,研究其對(duì)于成年期雄性心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)、心肌膠原纖維沉積、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial Nitric Oxide Synthase,eNOS)表達(dá)及eNOS磷酸化水平的影響,探討宮內(nèi)慢性缺氧導(dǎo)致成年期雄性心血管疾病的可能機(jī)制。方法健康SD孕鼠12只,于孕期第7天隨機(jī)分為兩組:缺氧組(H組)及對(duì)照組(C組)。缺氧組放置于低氧艙內(nèi),低氧艙內(nèi)氧氣濃度控制在(10.0±0.5)%,每日維持8小時(shí)。對(duì)照組同樣放置于低氧艙內(nèi),但通入空氣,維持氧氣濃度與艙外大氣相同,每日維持時(shí)長相同。重復(fù)上述過程直至孕鼠分娩(妊娠第21天)。孕鼠分娩后,使用隨機(jī)數(shù)字表法選取子代雄性大鼠各6只,正常喂養(yǎng)至11月齡。蘇木精-伊紅染色法(Hematoxylin-eosin Staining,HE)觀察及測量成年雄性大鼠心肌細(xì)胞直徑;馬松(Masson)染色法觀察及測量膠原纖維面積比例;實(shí)時(shí)定量熒光PCR法(Real Time PCR)檢測成年雄性大鼠心肌細(xì)胞eNOS mRNA表達(dá);蛋白質(zhì)印跡法(Western Blo...
【文章來源】:福建醫(yī)科大學(xué)福建省
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
部分標(biāo)本HE染色顯微鏡下對(duì)比(400倍)
圖 2.3 部分心肌組織 Masson 染色顯微鏡下形態(tài)(400 倍)表 2.2 兩組之間膠原纖維的面積百分比組別 膠原纖維的面積百分比(%)( x±s)對(duì)照組(C) 5.9828±2.4442缺氧組(H) 5.8604±1.6715:兩組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(F=0.23,P>0.05)01234567對(duì)照組(C) 缺氧組(H)膠原纖面積維分百(比%)
eal Time PCR 法檢測 eNOS mRNA 表達(dá)結(jié)果NA 完整性檢測 Trizol 提取 RNA,總 RNA 提取完成后檢測 OD260/OD280,結(jié)0/OD280 均處于 1.8~2.0,純度滿足實(shí)驗(yàn)要求。RNA 電泳(瓊脂,其結(jié)果顯示 RNA 完整性良好,未見明顯降解(見圖 2.5) 。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]《中國心血管病報(bào)告2016》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風(fēng),楊躍進(jìn),鄭哲,蔣立新,胡盛壽. 中國循環(huán)雜志. 2017(06)
[2]產(chǎn)前缺氧降低7月齡子鼠心臟舒張功能及其相關(guān)分子機(jī)制[J]. 陳幼芳,杜心清,吳淳淳,林惠通,林文東. 中華高血壓雜志. 2016(12)
[3]基于“二胎”再育趨勢的產(chǎn)科安全影響因素分析及對(duì)策探討[J]. 陳淑芳,張晨,陳焱,程蔚蔚. 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(05)
[4]eNOS在EPO調(diào)節(jié)慢性缺氧心肌細(xì)胞線粒體生物合成中的作用機(jī)制研究[J]. 秦川,陳林,肖穎彬. 重慶醫(yī)學(xué). 2015(16)
[5]慢性宮內(nèi)缺氧對(duì)子代大鼠心臟誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、血清內(nèi)皮素1的影響[J]. 應(yīng)紅安,黃子揚(yáng),王振華. 中國動(dòng)脈硬化雜志. 2011(08)
[6]eNOS磷酸化與酶活性及中藥介入[J]. 史海霞,劉俊,薛永亮,俞林花,聶緒強(qiáng),卞卡. 中國藥理學(xué)通報(bào). 2011(03)
[7]宮內(nèi)慢性缺氧對(duì)子代大鼠血管內(nèi)皮功能的影響[J]. 王振華,黃子揚(yáng),呂國榮. 中國動(dòng)脈硬化雜志. 2010(09)
碩士論文
[1]慢性間歇性缺氧對(duì)孕鼠子代鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變及Caveolin-1的影響[D]. 林輝煌.福建醫(yī)科大學(xué) 2013
本文編號(hào):3030518
【文章來源】:福建醫(yī)科大學(xué)福建省
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
部分標(biāo)本HE染色顯微鏡下對(duì)比(400倍)
圖 2.3 部分心肌組織 Masson 染色顯微鏡下形態(tài)(400 倍)表 2.2 兩組之間膠原纖維的面積百分比組別 膠原纖維的面積百分比(%)( x±s)對(duì)照組(C) 5.9828±2.4442缺氧組(H) 5.8604±1.6715:兩組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(F=0.23,P>0.05)01234567對(duì)照組(C) 缺氧組(H)膠原纖面積維分百(比%)
eal Time PCR 法檢測 eNOS mRNA 表達(dá)結(jié)果NA 完整性檢測 Trizol 提取 RNA,總 RNA 提取完成后檢測 OD260/OD280,結(jié)0/OD280 均處于 1.8~2.0,純度滿足實(shí)驗(yàn)要求。RNA 電泳(瓊脂,其結(jié)果顯示 RNA 完整性良好,未見明顯降解(見圖 2.5) 。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]《中國心血管病報(bào)告2016》概要[J]. 陳偉偉,高潤霖,劉力生,朱曼璐,王文,王擁軍,吳兆蘇,李惠君,顧東風(fēng),楊躍進(jìn),鄭哲,蔣立新,胡盛壽. 中國循環(huán)雜志. 2017(06)
[2]產(chǎn)前缺氧降低7月齡子鼠心臟舒張功能及其相關(guān)分子機(jī)制[J]. 陳幼芳,杜心清,吳淳淳,林惠通,林文東. 中華高血壓雜志. 2016(12)
[3]基于“二胎”再育趨勢的產(chǎn)科安全影響因素分析及對(duì)策探討[J]. 陳淑芳,張晨,陳焱,程蔚蔚. 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(05)
[4]eNOS在EPO調(diào)節(jié)慢性缺氧心肌細(xì)胞線粒體生物合成中的作用機(jī)制研究[J]. 秦川,陳林,肖穎彬. 重慶醫(yī)學(xué). 2015(16)
[5]慢性宮內(nèi)缺氧對(duì)子代大鼠心臟誘導(dǎo)型一氧化氮合酶、血清內(nèi)皮素1的影響[J]. 應(yīng)紅安,黃子揚(yáng),王振華. 中國動(dòng)脈硬化雜志. 2011(08)
[6]eNOS磷酸化與酶活性及中藥介入[J]. 史海霞,劉俊,薛永亮,俞林花,聶緒強(qiáng),卞卡. 中國藥理學(xué)通報(bào). 2011(03)
[7]宮內(nèi)慢性缺氧對(duì)子代大鼠血管內(nèi)皮功能的影響[J]. 王振華,黃子揚(yáng),呂國榮. 中國動(dòng)脈硬化雜志. 2010(09)
碩士論文
[1]慢性間歇性缺氧對(duì)孕鼠子代鼠動(dòng)脈粥樣硬化病變及Caveolin-1的影響[D]. 林輝煌.福建醫(yī)科大學(xué) 2013
本文編號(hào):3030518
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