研究背景絕大部分心跳驟停（Cardiac Arrest,CA）患者預后極差,美國出院存活率不足8%,而中國僅為1%。復蘇后心功能障礙（Post-resuscitation Myocardial Dysfunction,PRMD）與復蘇后早期死亡密切相關,但尚缺乏有效的治療手段。盡管有研究支持PRMD患者接受β受體阻滯劑治療可改善預后,但因其作用可能造成PRMD加重。因此尋找更安全有效的藥物替代β受體阻滯劑迫在眉睫。前期研究顯示伊伐布雷定（Ivabradine,IVA）在豬CPR模型中有心肌保護作用,可通過抗氧化應激保護線粒體功能等多種途徑去改善心功能,然而IVA對缺血再灌注后心肌尤其是心肌細胞的影響及調控機制尚未報道。因此,本研究以體外缺血缺氧誘導心肌細胞損傷模型為基礎,觀察IVA對缺血再灌注后心肌細胞的保護作用,以線粒體功能紊亂和氧化應激功能異常為切入點,探討AMPK/SIRT1/PGC-1α途徑IVA對缺血再灌注后心肌能量代謝的調節(jié)及作用機制。研究目的通過心肌細胞體外研究,探討IVA對缺血再灌注損傷后心肌的保護作用及是否與AMPK/SIRT1/PGC-1α途徑相關。研究方法本實驗是... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

能量代謝指標的比較

安徽醫(yī)科大學碩士學位論文31增殖的影響；（B）流式細胞術檢測對照組的細胞凋亡水平；（C）流式細胞術檢測IRI組的細胞凋亡水平；（D）流式細胞術檢測20μMIVA處理組的細胞凋亡水平（E）流式細胞術檢測100μMIVA處理組的細胞凋亡水平。#表示與control組比較P＜0.05，##表示與control組比較P＜0.01；*表示與IRI組比較P＜0.05，**表示與IRI組比較P＜0.01Fig2:Thecomparisonofcellviabilityandapoptosis(A)EffectsoncellproliferationwhenH9c2cellswerepretreatedwithdifferentIVAconcentrationsfor2,12,and24hpriortoIRI,asassessedbytheCCK-8assay.(B)Flowcytometrytodetectthelevelofapoptosisinthecontrolgroup.(C)FlowcytometrytodetectthelevelofapoptosisintheIRIgroup.(D)Flowcytometrytodetecttheapoptosislevelinthe20μMIVAtreatmentgroup.(E)Flowcytometrytodetecttheapoptosislevelinthe100μMIVAtreatmentgroup.Comparedwiththecontrolgroup,#indicatesP<0.05,##indicatesP<0.01.ComparedwiththeIRIgroup,*indicatesP<0.05,**Pindicates<0.01.3.4IVA對缺血再灌注后心肌細胞線粒體形態(tài)的影響透射電子顯微鏡檢查結果顯示，IRI組心肌細胞結構嚴重受損，存在許多液泡樣結構。線粒體變圓，腫脹，破碎甚至消失，與對照組相比，基質密度加深（圖3A、B）。IVA組能夠改善IRI誘導的線粒體結構損傷。100μMIVA組的線粒體僅有輕微溶脹的趨勢，具有少許清澈透明的空泡，基質顏色變淡，雙層膜相對完整（圖3C、D）。圖3IVA對缺血再灌注后H9c2細胞線粒體形態(tài)的影響（A）正常的線粒體形態(tài);（B）IRI組的線粒體形態(tài);（C）20μMIVA組的線粒體形態(tài);（D）100μMIVA組的線粒體形態(tài)Fig3:EffectofIVAonmitochondrialmorphologyinH9c2cellsafterIRI.

安徽醫(yī)科大學碩士學位論文33圖4IVA后IVA對H9c2細胞中ATP，ADP，AMP和NAD+含量的影響（A）HPLC色譜圖（標準樣品）；（B）HPLC色譜圖（H9c2細胞樣品）；（C）ATP，ADP，AMP和NAD+的標曲；（D）IVA對IRI后H9c2細胞中ATP，ADP，AMP和NAD+含量的影響；（E）IVA對AMP/ATP比的影響。與對照組相比，＃表示P<0.05，##表示P<0.01。與IRI組相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01。Fig4:EffectsofIVAontheATP,ADP,AMP,andNAD+contentsinH9c2cellsafterIRI.(A)HPLCchromatogramofthestandardsample.(B)HPLCchromatogramoftheH9c2cellsample.(C)ThestandardcurveforATP,ADP,AMP,andNAD+.(D)TheeffectsofIVAontheATP,ADP,AMP,andNAD+contentsinH9c2cellsafterIRI.(E)TheeffectsofIVAontheAMP/ATPratio.Comparedwiththecontrolgroup,#Pindicates<0.05,##indicatesP<0.01.ComparedwiththeIRIgroup,*indicatesP<0.05,**indicatesP<0.01.

【參考文獻】：
期刊論文
[1]生物能量分析儀在腫瘤細胞生物能量代謝中的應用研究[J]. 汪春龍,郭苗苗,吳藝琦,陳福紅,藍林華,徐翠翠,樓康誠,沈愷,徐浩,余曉敏,劉永章,呂斌,謝紅莉.  中國細胞生物學學報. 2016(09)
[2]缺血性心臟病發(fā)病機制的新觀點[J]. 張運,陳文強.  中華心血管病雜志. 2014 (02)
[3]關于心肌肥厚發(fā)生機制的探討[J]. 潘德思,田靫,陳蘭英.  生理科學進展. 1999(02)



本文編號：3027015