研究背景絕大部分心跳驟停（Cardiac Arrest,CA）患者預(yù)后極差,美國(guó)出院存活率不足8%,而中國(guó)僅為1%。復(fù)蘇后心功能障礙（Post-resuscitation Myocardial Dysfunction,PRMD）與復(fù)蘇后早期死亡密切相關(guān),但尚缺乏有效的治療手段。盡管有研究支持PRMD患者接受β受體阻滯劑治療可改善預(yù)后,但因其作用可能造成PRMD加重。因此尋找更安全有效的藥物替代β受體阻滯劑迫在眉睫。前期研究顯示伊伐布雷定（Ivabradine,IVA）在豬CPR模型中有心肌保護(hù)作用,可通過(guò)抗氧化應(yīng)激保護(hù)線粒體功能等多種途徑去改善心功能,然而IVA對(duì)缺血再灌注后心肌尤其是心肌細(xì)胞的影響及調(diào)控機(jī)制尚未報(bào)道。因此,本研究以體外缺血缺氧誘導(dǎo)心肌細(xì)胞損傷模型為基礎(chǔ),觀察IVA對(duì)缺血再灌注后心肌細(xì)胞的保護(hù)作用,以線粒體功能紊亂和氧化應(yīng)激功能異常為切入點(diǎn),探討AMPK/SIRT1/PGC-1α途徑IVA對(duì)缺血再灌注后心肌能量代謝的調(diào)節(jié)及作用機(jī)制。研究目的通過(guò)心肌細(xì)胞體外研究,探討IVA對(duì)缺血再灌注損傷后心肌的保護(hù)作用及是否與AMPK/SIRT1/PGC-1α途徑相關(guān)。研究方法本實(shí)驗(yàn)是... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

能量代謝指標(biāo)的比較

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文31增殖的影響；（B）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)對(duì)照組的細(xì)胞凋亡水平；（C）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)IRI組的細(xì)胞凋亡水平；（D）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)20μMIVA處理組的細(xì)胞凋亡水平（E）流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)100μMIVA處理組的細(xì)胞凋亡水平。#表示與control組比較P＜0.05，##表示與control組比較P＜0.01；*表示與IRI組比較P＜0.05，**表示與IRI組比較P＜0.01Fig2:Thecomparisonofcellviabilityandapoptosis(A)EffectsoncellproliferationwhenH9c2cellswerepretreatedwithdifferentIVAconcentrationsfor2,12,and24hpriortoIRI,asassessedbytheCCK-8assay.(B)Flowcytometrytodetectthelevelofapoptosisinthecontrolgroup.(C)FlowcytometrytodetectthelevelofapoptosisintheIRIgroup.(D)Flowcytometrytodetecttheapoptosislevelinthe20μMIVAtreatmentgroup.(E)Flowcytometrytodetecttheapoptosislevelinthe100μMIVAtreatmentgroup.Comparedwiththecontrolgroup,#indicatesP<0.05,##indicatesP<0.01.ComparedwiththeIRIgroup,*indicatesP<0.05,**Pindicates<0.01.3.4IVA對(duì)缺血再灌注后心肌細(xì)胞線粒體形態(tài)的影響透射電子顯微鏡檢查結(jié)果顯示，IRI組心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)嚴(yán)重受損，存在許多液泡樣結(jié)構(gòu)。線粒體變圓，腫脹，破碎甚至消失，與對(duì)照組相比，基質(zhì)密度加深（圖3A、B）。IVA組能夠改善IRI誘導(dǎo)的線粒體結(jié)構(gòu)損傷。100μMIVA組的線粒體僅有輕微溶脹的趨勢(shì)，具有少許清澈透明的空泡，基質(zhì)顏色變淡，雙層膜相對(duì)完整（圖3C、D）。圖3IVA對(duì)缺血再灌注后H9c2細(xì)胞線粒體形態(tài)的影響（A）正常的線粒體形態(tài);（B）IRI組的線粒體形態(tài);（C）20μMIVA組的線粒體形態(tài);（D）100μMIVA組的線粒體形態(tài)Fig3:EffectofIVAonmitochondrialmorphologyinH9c2cellsafterIRI.

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文33圖4IVA后IVA對(duì)H9c2細(xì)胞中ATP，ADP，AMP和NAD+含量的影響（A）HPLC色譜圖（標(biāo)準(zhǔn)樣品）；（B）HPLC色譜圖（H9c2細(xì)胞樣品）；（C）ATP，ADP，AMP和NAD+的標(biāo)曲；（D）IVA對(duì)IRI后H9c2細(xì)胞中ATP，ADP，AMP和NAD+含量的影響；（E）IVA對(duì)AMP/ATP比的影響。與對(duì)照組相比，＃表示P<0.05，##表示P<0.01。與IRI組相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01。Fig4:EffectsofIVAontheATP,ADP,AMP,andNAD+contentsinH9c2cellsafterIRI.(A)HPLCchromatogramofthestandardsample.(B)HPLCchromatogramoftheH9c2cellsample.(C)ThestandardcurveforATP,ADP,AMP,andNAD+.(D)TheeffectsofIVAontheATP,ADP,AMP,andNAD+contentsinH9c2cellsafterIRI.(E)TheeffectsofIVAontheAMP/ATPratio.Comparedwiththecontrolgroup,#Pindicates<0.05,##indicatesP<0.01.ComparedwiththeIRIgroup,*indicatesP<0.05,**indicatesP<0.01.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]生物能量分析儀在腫瘤細(xì)胞生物能量代謝中的應(yīng)用研究[J]. 汪春龍,郭苗苗,吳藝琦,陳福紅,藍(lán)林華,徐翠翠,樓康誠(chéng),沈愷,徐浩,余曉敏,劉永章,呂斌,謝紅莉.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2016(09)
[2]缺血性心臟病發(fā)病機(jī)制的新觀點(diǎn)[J]. 張運(yùn),陳文強(qiáng).  中華心血管病雜志. 2014 (02)
[3]關(guān)于心肌肥厚發(fā)生機(jī)制的探討[J]. 潘德思,田靫,陳蘭英.  生理科學(xué)進(jìn)展. 1999(02)



本文編號(hào)：3027015