目的:1-磷酸神經(jīng)鞘氨醇（Sphingosine-1-phosphate,S1P）是血細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞釋放的具有調(diào)節(jié)免疫和保護(hù)血管功能的鞘脂類血源性化學(xué)信號(hào)分子。研究發(fā)現(xiàn)S1P與巨噬細(xì)胞膽固醇的轉(zhuǎn)運(yùn)過程密切相關(guān),但其具體機(jī)制尚不明確。因此,本研究的目的是探討S1P對(duì)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積的影響及可能機(jī)制。方法:1.THP-1細(xì)胞用60μg/ml ox-LDL（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL）處理不同時(shí)間（0,12,24,48h）使其荷脂,采用油紅O染色法檢測細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)蓄積及高效液相色譜檢測胞內(nèi)膽固醇含量。2.不同濃度的S1P（0.5,1.0,2.0μM）處理THP-1源性泡沫細(xì)胞24h,用1μM的S1P處理不同時(shí)間（0,6,12,24h）。采用Western blot免疫印跡檢測細(xì)胞中SR-BI（Scavenger receptor class B type I,SR-BI）和ABCA1（ATP binding cassette transporter A1,ABCA1）的表達(dá)。3.VPC23019干預(yù)S1P1/3受體的表達(dá),采用Western... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞及主要試劑
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及耗材
        2.1.3 主要試劑配置
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 THP-1細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 THP-1細(xì)胞的凍存
        2.2.3 THP-1細(xì)胞的復(fù)蘇
        2.2.4 油紅O染色
        2.2.5 細(xì)胞蛋白提取
        2.2.6 高效液相色譜法
        2.2.7 Westernblotting檢測蛋白表達(dá)
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 實(shí)驗(yàn)分組
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 S1P可影響THP-1細(xì)胞胞內(nèi)膽固醇蓄積
    3.2 不同濃度、時(shí)間S1P檢測THP-1細(xì)胞SR-BI與ABCA1的蛋白表達(dá)的影響
    3.3 S1P通過LXRα/SIRT1途徑抑制THP-1源性泡沫細(xì)胞
第4章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表的論文
致謝
基金


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]S1P/S1PR2的心血管調(diào)節(jié)作用及其信號(hào)通路[J]. 魯艷菊,王雙,伍榮,易光輝.  中國心血管雜志. 2015(02)



本文編號(hào)：3022153