目的：探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUC-MSCs）對(duì)氣陰兩虛型難治性免疫性血小板減少癥（rITP）患者B淋巴細(xì)胞分化及免疫功能的影響。方法：按照患者納入及分組標(biāo)準(zhǔn),將rITP患者分為氣陰兩虛型組和非氣陰兩虛型組,健康供者為對(duì)照組；用酶消化法提取健康胎兒臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞；MTT法測(cè)hUC-MSCs生長(zhǎng)曲線；人外周血淋巴細(xì)胞分離液密度梯度離心法提取健康供者及rITP患者外周血單個(gè)核細(xì)胞；流式標(biāo)記CD44、CD31和CD19分別檢測(cè)hUC-MSCs純度和外周血B淋巴細(xì)胞數(shù)；ELISA法確定美洲商陸（PWM）刺激外周血B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞分泌抗體所需的濃度、時(shí)間,hUC-MSCs和單核細(xì)胞共培養(yǎng)的比例,檢測(cè)健康供者組、氣陰兩虛型組和非氣陰兩虛型組患者外周血B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞分泌IgG、IgM的含量；通過EnVision免疫組化法測(cè)每組CD138標(biāo)記的細(xì)胞陽性率確定Blimp-1蛋白表達(dá)程度。結(jié)果：（1）以酶消化法從健康胎兒臍帶提取的貼壁細(xì)胞主要為間充質(zhì)干細(xì)胞,其純度為99.8%,人外周血淋巴細(xì)胞分離液密度梯度離心法提取的外周血單個(gè)核細(xì)胞中B細(xì)胞占6.9%。（2）PWM可刺激人外周血B細(xì)胞分化發(fā)育為... 

【文章來源】：浙江中醫(yī)藥大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
一、材料與方法
    （一） 實(shí)驗(yàn)材料
        1. 實(shí)驗(yàn)試劑
        2. 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        3. 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的提取及培養(yǎng)
    （二） 實(shí)驗(yàn)方法
        1. 患者納入標(biāo)準(zhǔn)及分組
        2. 酶消化法提取間人臍帶充質(zhì)干細(xì)胞
        3. 流式細(xì)胞儀鑒定MSCs純度（CD44,CD31）
        4. MTT法測(cè)Huc-MSCs生長(zhǎng)曲線
        5. 人外周血淋巴細(xì)胞提取及共培養(yǎng)體系建立
        6. 流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血B細(xì)胞數(shù)
        7. ELISA法檢測(cè)上清液抗體分泌（IgM、IgG）
        8. EnVision免疫組化測(cè)細(xì)胞Blimp-1蛋白表達(dá)
    （三） 統(tǒng)計(jì)方法
二、結(jié)果
    （一） 流式測(cè)第三代臍帶MSCs純度和外周血B細(xì)胞數(shù)
    （二） MTT測(cè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
    （三） B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞分泌抗體與PWM濃度和作用時(shí)間相關(guān)
    （四） hUC-MSCs抑制抗體IgG、IgM的分泌
    （五） 臍帶MSCs抑制Blimp蛋白的表達(dá)
三、分析與討論
四、小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附圖
致謝
附：文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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