MiR-324-3p靶向trim27抑制CVB3復(fù)制的機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-26 11:54
背景:病毒性心肌炎(Viral myocarditis)是由病毒引起的心肌疾病,多見于兒童,成人散發(fā)。該疾病大多患者預(yù)后良好,少數(shù)可發(fā)展為擴(kuò)張性心肌病,引發(fā)急性心力衰竭、心源性休克甚至猝死。有多種病毒可以引起病毒性心肌炎,其中柯薩奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)是導(dǎo)致病毒性心肌炎的主要病毒之一。CVB3屬于小RNA病毒科腸道病毒屬,基因組為單股正鏈RNA,只編碼一個(gè)開放閱讀框(open reading frame,ORF)。MicroRNA(miRNA)是真核生物中一類長度約為 18-25個(gè)核苷酸組成的非編碼小分子單鏈RNA,通過與靶基因的3’-UTR特異序列完全和或不完全互補(bǔ)結(jié)合的形式,使靶基因mRNA降解或抑制翻譯,達(dá)到反向調(diào)控靶基因的作用,miRNA形成復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)多種細(xì)胞進(jìn)程。目的:本研究擬通過了解CVB3感染過程中差異表達(dá)的miR-324-3p的作用機(jī)制,探索miR-324-3p及靶基因?qū)VB3復(fù)制的調(diào)控作用及機(jī)制,希望能為CVB3感染的診斷和治療提供理論依據(jù)和分子靶點(diǎn)。方法:1.大腸桿菌原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)CVB3的3C蛋白并進(jìn)行兔多克隆...
【文章來源】:江蘇大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:88 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
‘1亡V由偽基周組給構(gòu)瓏1.1仁汾I功I玲疏診獄
姻大麵文???1.2.5體外過表達(dá)/沉默miR-324-3p或其靶基因后,感染CVB3后檢測炎癥相??細(xì)胞因子,闡明miR-324-3p及其靶基因在CVB3復(fù)制中的調(diào)控機(jī)制。??1.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案:??根據(jù)本研究的實(shí)驗(yàn)?zāi)康,設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線圖:??基因芯片檢測并篩選CVB3感染后差異miRNA??
?2.1.3質(zhì)粒:??原核表達(dá)載體pET28a?(質(zhì)粒圖譜見圖2.1)由江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī).學(xué)研??究所保存。??Xho?1(158)??Not?1(166)??Eag?1(166)??Hind?111(173)??Sal?1(179)??Sac?1(190)??EcoR?1(192)??BamH?1(198)??卩工丨裂??Dra?111(5127).?I?r^<r?NCO?l(296)?????一l(335)??一-?11(401)??<^^9〇3-5358y^^^<^SgrA?l(442)??'N^Phl(598>??PVU?1(4426)?x?///^?\\??\\??Sma?1(4300)?J//|?VVmIu?1(1123
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Microarray analysis of extracellular matrix genes expression in myocardium of mouse with Coxsackie virus B3 myocarditis[J]. 張召才,李雙杰,楊英珍,陳瑞珍,葛均波,陳灝珠. Chinese Medical Journal. 2004(08)
本文編號:3001065
【文章來源】:江蘇大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:88 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
‘1亡V由偽基周組給構(gòu)瓏1.1仁汾I功I玲疏診獄
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【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Microarray analysis of extracellular matrix genes expression in myocardium of mouse with Coxsackie virus B3 myocarditis[J]. 張召才,李雙杰,楊英珍,陳瑞珍,葛均波,陳灝珠. Chinese Medical Journal. 2004(08)
本文編號:3001065
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