第一部分動(dòng)脈粥樣硬化小鼠病程進(jìn)展中的腸道菌群表達(dá)變化目的:動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）是一種發(fā)病機(jī)制復(fù)雜的慢性炎癥與代謝相關(guān)性疾病,其具體的發(fā)病機(jī)制還未被闡明,限制了臨床對(duì)該病的治療。本研究旨在發(fā)現(xiàn)AS病程進(jìn)展中腸道菌群的表達(dá)變化,為該病的發(fā)病機(jī)制提供新思路。方法:apo E-/-小鼠和野生型（wide type,WT）小鼠高脂喂養(yǎng)（high-fat diet,HFD）12周分別設(shè)為AS組和AS對(duì)照（atherosclerosis control,AS CTL）組,WT小鼠普通喂養(yǎng)12周設(shè)為空白對(duì)照（control,CTL）組。于喂養(yǎng)0、4、8、12周時(shí)分別采集三組小鼠新鮮糞便,提取糞便菌群DNA后進(jìn)行16S r DNA高通量測(cè)序。喂養(yǎng)12周時(shí)采集血漿,測(cè)定三組小鼠血清總膽固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglycerides,TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

三組小鼠體重及糖脂代謝變化.apoE-/-小鼠和WT小鼠分別喂養(yǎng)12周設(shè)為AS組和AS CTL組,WT小鼠普通喂養(yǎng)12周設(shè)為CTL組。A)每周定時(shí)記錄小鼠體重;B)小鼠每日平均食物攝入量(g/d/只);喂養(yǎng)12周后,采用摘眼球取血法收集小鼠血液,離心取上層血漿,測(cè)定C)三組小鼠血漿TG水平;D)三組小鼠血漿TC水平;E)三組小鼠血漿HDL-C水平;F)三組小鼠血漿LDL-C水平;G)三組小鼠血漿VLDL-C水平;H)血糖水平。NAS=12,NAS CTL=12,NCTL=12。每組數(shù)據(jù)均采用(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)的形式來(lái)表示,兩組數(shù)據(jù)間比較采用student-t檢驗(yàn)。與AS組相比,*p<0.05,**p<0.01,***p<0.001;與AS CTL組相比,#p<0.05,

喂養(yǎng)12周后,我們?nèi)S組和AS CTL組小鼠的主動(dòng)脈弓段血管,可見AS CTL組小鼠主動(dòng)脈弓段血管圓滑、平整,管壁未見明顯黃白色脂質(zhì)沉著(圖2A),血管腔內(nèi)壁光滑完整,未見明顯狹窄(圖2B);而AS組小鼠主動(dòng)脈弓段外形不規(guī)則、僵硬,可見明顯的黃白色脂質(zhì)斑塊(圖2C),血管腔內(nèi)壁可見向管腔內(nèi)生長(zhǎng)的脂質(zhì)斑塊,造成血管腔明顯狹窄(圖2D);統(tǒng)計(jì)圖可見AS組血管損傷橫截面積為AS CTL組的2.3倍(p<0.001)(圖2H)。另外,主動(dòng)脈段大體油紅O染色可見AS小鼠主動(dòng)脈管腔內(nèi)有明顯的脂質(zhì)附著(圖2E-F),統(tǒng)計(jì)圖可見AS組小鼠血管脂質(zhì)含量約為AS CTL組的2倍(p<0.001)(圖2G)。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果均證明HFD喂養(yǎng)apo E-/-小鼠12周后可建立AS模型,而WT小鼠對(duì)AS疾病具有抵抗性,喂養(yǎng)12周后主動(dòng)脈未見明顯斑塊形成。3.3 動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過(guò)程中腸道菌群的變化

根據(jù)每個(gè)糞便DNA樣品在屬分類水平下的微生物物種注釋及其豐度,挑選出豐度排名前35的物種,然后根據(jù)該物種在每個(gè)樣本中的豐度,從物種和樣品兩個(gè)層面進(jìn)行聚類并生成可以呈現(xiàn)樣本中各物種聚集多少的熱圖(圖3B)。是豐度排名前35的屬在每組中的豐度信息熱圖,可見根據(jù)喂養(yǎng)方式、時(shí)間和基因型的不同,小鼠腸道菌屬豐度組成也不同(圖3D)。3.3.2四個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)AS小鼠腸道菌群Alpha多樣性分析


本文編號(hào)：3000310