缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞釋放的微囊泡對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張功能的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-01-18 20:43
血管內(nèi)皮功能紊亂是多種心血管疾病致病機(jī)制的起始及核心環(huán)節(jié),是急性心肌梗死,動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病的致病基礎(chǔ)。研究表明,糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌缺血等心血管疾病的患者循環(huán)血液中MVs水平上升,這些MVs中包含內(nèi)皮細(xì)胞在受到刺激或凋亡時(shí)所釋放的EMVs。EMVs并非簡(jiǎn)單的生物學(xué)標(biāo)志物,它們同時(shí)在血管內(nèi)皮功能紊亂的致病機(jī)制中發(fā)揮著重要作用。不同病理狀態(tài)下產(chǎn)生的EMVs具有不同的生物學(xué)功能。I/R作為多種心血管疾病的病理生理基礎(chǔ),可引起血管內(nèi)皮功能紊亂及凋亡壞死。但有關(guān)H/R誘導(dǎo)產(chǎn)生的H/R-EMVs是否在血管內(nèi)皮功能紊亂中發(fā)揮作用以及H/R-EMVs是否可以削弱離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)的內(nèi)皮依賴性舒張反應(yīng)尚不清晰。因此,本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)H/R誘導(dǎo)HUVECs產(chǎn)生EMVs,探討H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張功能的影響。目的:研究H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張功能的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法:1.H/R誘導(dǎo)HUVECs損傷模型的建立用含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)HUVECs 24 h達(dá)到融合70-80%后,棄去培養(yǎng)上清液,換用缺氧液。將HUVECs放置于缺氧裝置中,使用95%N2...
【文章來(lái)源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)
前言
研究現(xiàn)狀及成果
研究目的、方法
一、H/R-EMVs的分離提取及鑒定
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 細(xì)胞
1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
1.1.3 實(shí)驗(yàn)耗材與器材
1.1.4 藥品與試劑
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 主要溶液的配制
1.2.2 HUVECs的復(fù)蘇、傳代與凍存
1.2.3 MTT法檢缺氧 12 h復(fù)氧 4 h HUVECs的存活率
1.2.4 H/R方法誘導(dǎo)HUVECs釋放MVs
1.2.5 H/R-EMVs的流式鑒定和計(jì)數(shù)
1.2.6 H/R-EMVs的蛋白定量(BCA法)
1.2.7 數(shù)據(jù)處理
1.3 結(jié)果
1.3.1 H/R誘導(dǎo)HUVECs損傷模型的建立
1.3.2 H/R-EMVs的流式鑒定和計(jì)數(shù)結(jié)果
1.3.3 H/R-EMVs的蛋白定量
1.4 小結(jié)
二、H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張功能的影響及相關(guān)機(jī)制的研究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.3 實(shí)驗(yàn)耗材與器械
2.1.4 藥品與試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 主要溶液的配制
2.2.2 H/R-EMVs處理離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)
2.2.3 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)實(shí)驗(yàn)
2.2.4 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)的凍存及組織勻漿
2.2.5 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)NO的測(cè)定
2.2.6 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)p-eNOS/t-eNOS的測(cè)定
2.2.7 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)SOD, MDA的測(cè)定
2.2.8 數(shù)據(jù)處理
2.3 結(jié)果
2.3.1 H/R-EMVs對(duì)ACh、SNP介導(dǎo)的離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張功能的影響
2.3.2 H/R-EMVs對(duì)NO含量的影響
2.3.3 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)中p-eNOS/t-eNOS含量的影響
2.3.4 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)中SOD, MDA含量的影響
2.4 小結(jié)
討論
1 MVs的生物學(xué)作用
2 H/R-EMVs的分離及鑒定
2.1 H/R-EMVs的分離及提取
2.2 H/R-EMVs的流式檢測(cè)及表型鑒定
3 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張率的影響
4 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)NO含量的影響
5 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)中p-eNOS/t-eNOS的影響
6 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)中SOD活性及MDA含量的影響
7 總結(jié)與展望
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞釋放膜微囊條件探索[J]. 畢曉云,黃舒,陳晶礪,王芳,王燕,郭子寬. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2014(02)
[2]Effects of endothelial microvesicles induced by A23187 on H9c2 cardiomyocytes[J]. Man SHANG,Qi ZHANG,Meng-xiao ZHANG,Yao WANG,Yan CHEN,Yan-na WU,Jun-qiu SONG,Ming-lin LIU,Yan-xia LIU. 中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2013(06)
[3]飲食誘導(dǎo)糖調(diào)節(jié)受損大鼠睪丸細(xì)胞抗氧化水平、細(xì)胞周期進(jìn)程和凋亡的變化[J]. 方芳,張桂英,高田林,肖宛凝,劉宇欣,劉婭,王志成. 中華男科學(xué)雜志. 2013(05)
本文編號(hào):2985638
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【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)
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中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)
前言
研究現(xiàn)狀及成果
研究目的、方法
一、H/R-EMVs的分離提取及鑒定
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 細(xì)胞
1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
1.1.3 實(shí)驗(yàn)耗材與器材
1.1.4 藥品與試劑
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 主要溶液的配制
1.2.2 HUVECs的復(fù)蘇、傳代與凍存
1.2.3 MTT法檢缺氧 12 h復(fù)氧 4 h HUVECs的存活率
1.2.4 H/R方法誘導(dǎo)HUVECs釋放MVs
1.2.5 H/R-EMVs的流式鑒定和計(jì)數(shù)
1.2.6 H/R-EMVs的蛋白定量(BCA法)
1.2.7 數(shù)據(jù)處理
1.3 結(jié)果
1.3.1 H/R誘導(dǎo)HUVECs損傷模型的建立
1.3.2 H/R-EMVs的流式鑒定和計(jì)數(shù)結(jié)果
1.3.3 H/R-EMVs的蛋白定量
1.4 小結(jié)
二、H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張功能的影響及相關(guān)機(jī)制的研究
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
2.1.3 實(shí)驗(yàn)耗材與器械
2.1.4 藥品與試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 主要溶液的配制
2.2.2 H/R-EMVs處理離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)
2.2.3 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)實(shí)驗(yàn)
2.2.4 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)的凍存及組織勻漿
2.2.5 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)NO的測(cè)定
2.2.6 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)p-eNOS/t-eNOS的測(cè)定
2.2.7 離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)SOD, MDA的測(cè)定
2.2.8 數(shù)據(jù)處理
2.3 結(jié)果
2.3.1 H/R-EMVs對(duì)ACh、SNP介導(dǎo)的離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張功能的影響
2.3.2 H/R-EMVs對(duì)NO含量的影響
2.3.3 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)中p-eNOS/t-eNOS含量的影響
2.3.4 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)中SOD, MDA含量的影響
2.4 小結(jié)
討論
1 MVs的生物學(xué)作用
2 H/R-EMVs的分離及鑒定
2.1 H/R-EMVs的分離及提取
2.2 H/R-EMVs的流式檢測(cè)及表型鑒定
3 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)舒張率的影響
4 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)NO含量的影響
5 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)中p-eNOS/t-eNOS的影響
6 H/R-EMVs對(duì)離體大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)中SOD活性及MDA含量的影響
7 總結(jié)與展望
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞釋放膜微囊條件探索[J]. 畢曉云,黃舒,陳晶礪,王芳,王燕,郭子寬. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志. 2014(02)
[2]Effects of endothelial microvesicles induced by A23187 on H9c2 cardiomyocytes[J]. Man SHANG,Qi ZHANG,Meng-xiao ZHANG,Yao WANG,Yan CHEN,Yan-na WU,Jun-qiu SONG,Ming-lin LIU,Yan-xia LIU. 中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2013(06)
[3]飲食誘導(dǎo)糖調(diào)節(jié)受損大鼠睪丸細(xì)胞抗氧化水平、細(xì)胞周期進(jìn)程和凋亡的變化[J]. 方芳,張桂英,高田林,肖宛凝,劉宇欣,劉婭,王志成. 中華男科學(xué)雜志. 2013(05)
本文編號(hào):2985638
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