目的:本研究采用ox-LDL誘導(dǎo)HCAEC損傷,建立動(dòng)脈粥樣硬化細(xì)胞模型,探討SIRT1對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化中炎癥的影響及可能機(jī)制。方法:1.Sirt1基因表達(dá)的驗(yàn)證。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HCAEC,分為正常對(duì)照組、空質(zhì)粒對(duì)照組、空質(zhì)粒+ox-LDL組、Sirt1過(guò)表達(dá)+ox-LDL組、Sirt1干擾+ox-LDL組,PDTC（NF-κB阻滯）+Sirt1干擾+ox-LDL組。利用Lipofectamine 2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞株24h后加入ox-LDL繼續(xù)培養(yǎng)24h,熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染情況;應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中Sirt1的mRNA水平;Western blot方法檢測(cè)細(xì)胞中SIRT1的蛋白表達(dá)水平。2.研究SIRT1對(duì)HCEAC炎癥反應(yīng)的影響。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HCAEC,分為正常對(duì)照組、空質(zhì)粒對(duì)照組、空質(zhì)粒+ox-LDL組、Sirt1過(guò)表達(dá)+ox-LDL組、Sirt1干擾+ox-LDL組。應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)ICAM-1的mRNA水平;Western blot方法檢測(cè)細(xì)胞中ICAM-1蛋白表達(dá)水平;ELISA法檢測(cè)各組IL-1、hs-CRP的表達(dá)。3.探討SIRT1發(fā)揮抗... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

-1MTT檢測(cè)24h不同濃度ox-LDL對(duì)HCAEC存活率的影響

圖 3-1-2-1 各組 ICAM-1 mRNA 相對(duì)表達(dá)量注： ***p＜0.001，****p＜0.0001。n blot 檢測(cè) ICAM-1 的蛋白表達(dá)常對(duì)照組、PBS 組、25μg/ml ox-LDL 組、50μg/ml 序上樣檢測(cè)，結(jié)果如圖 3-1-2-2-1。析結(jié)果顯示：25μg/ml ox-LDL 組（0.401±0.012）ICA04±0.005）比較，未見(jiàn)顯著性差異；隨著 ox-LDL 濃度.527±0.006）、100μg/ml ox-LDL 組（0.724±0.008）I比顯著升高（p<0.05），100μg/ml ox-LDL 組升高）與正常對(duì)照組未見(jiàn)明顯差異，見(jiàn)圖 3-1-2-2-2。

內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文（2019） 表 3-1-2-3 細(xì)胞上清液中炎癥因子的比較（pg/ml）Table 3-1-2-3 Comparison of inflammatory factors in cell supernatant (pg/ml)組別 n IL-1 hs-CRP正常對(duì)照組 3 1.621±0.061 1.663±0.045PBS 組 3 1.602±0.039 1.656±0.05725μg / ml ox-LDL 組 3 1.646±0.046 1.848±0.12650μg / ml ox-LDL 組 3 1.731±0.034 4.511±0.139****100μg / ml ox-LDL 組 3 2.889±0.113**** 7.366±0.240****注：****p<0.0001

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：2920084