目的:1.觀察琥珀酸脫氫酶黃素蛋白在缺氧后處理減輕正常成年大鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的作用;2.觀察高糖濃度環(huán)境對正常成年大鼠心肌細(xì)胞缺氧后處理的影響;3.觀察缺氧后處理在成年大鼠心肌細(xì)胞高糖狀態(tài)下減輕缺氧復(fù)氧作用下降與琥珀酸脫氫酶黃素蛋白的關(guān)系。方法:通過體外心臟灌注裝置（MPA）分離成年大鼠心肌細(xì)胞,并用正常葡萄糖濃度和高濃度葡萄糖培養(yǎng)基培養(yǎng)心肌細(xì)胞48h。隨機(jī)分為正常組（N組）、缺氧復(fù)氧組（HR組）、缺氧后處理組（HPO組）、si RNA沉默SDHA處理+缺氧復(fù)氧組（HR+si RNA SDHA組）、si RNA沉默SDHA處理+缺氧后處理組（HPO+si RNA SDHA組）和相應(yīng)的空白腺病毒感染到對照組中。按下述實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行處理:N組:37℃培養(yǎng)箱中持續(xù)培養(yǎng)105分鐘;HR組:缺氧45分鐘后,復(fù)氧60分鐘;HPO組:在HR基礎(chǔ)上,缺氧45分鐘后,氧合5分鐘,然后缺氧5分鐘,共3個循環(huán)后,再氧合30分鐘;HR+si RNA SDHA組:腺病毒成功感染沉默SDHA蛋白表達(dá)后給予相應(yīng)的HR處理;HPO+si RNA SDHA組:腺病毒成功感染沉默SDHA蛋白表達(dá)后給予相應(yīng)的HPO處... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

圖 1 蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)曲線圖2.8.3 制備 SDS-PAGE 凝膠（1）根據(jù)蛋白分子量大小 SDHA(72KD)配制 10%分離膠，β-actin (42KD)配制 12%分離膠各 5ml（表 3），加膠到玻璃之間至離最高點(diǎn)約 1.5cm。（2）加水覆蓋至最高平面待膠凝固。（3）配制 5%濃縮膠 2ml（表 3）�？滋� 0 1 2 3 4 5 6 7蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液（μL） 0 1 2 3 4 5 6 7去離子水（μL） 20 19 18 17 16 15 14 13對應(yīng)蛋白含量（μg） 0 5 10 15 20 25 30 35試劑 5%濃縮膠 10%分離膠 12%分離膠

圖 3 正常成年大鼠各組心肌細(xì)胞活力的變化注：與 N 組比較，*P<0.05；與 HR 組比較，#P<0.05.成年大鼠各組心肌細(xì)胞線粒體膜電位的變化心肌細(xì)胞線粒體膜電位較 N 組、HPO 組低，HPO 組心肌細(xì)胞低（P＜0.05），如表 5、圖 4-5。N 組 HR 組 HPO 組圖 4 正常成年大鼠各組心肌細(xì)胞線粒體膜電位的變化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：2915942