目的:本研究旨在探討血漿miR-423-5p(microRNA-423-5p)對(duì)老年下肢骨折患者深靜脈血栓形成(Deep Vein Thrombosis,DVT)的診斷和預(yù)測(cè)價(jià)值。方法:前瞻性收集2017年4-8月河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院創(chuàng)傷急救中心老年骨科行手術(shù)治療的老年下肢骨折患者(≥65歲)84例,20名年齡和性別匹配的健康志愿者。參與本次實(shí)驗(yàn)的所有患者和志愿者均簽署了知情同意書。所有老年下肢骨折患者均于術(shù)前、術(shù)后行雙下肢深靜脈彩超檢查,并根據(jù)術(shù)前、術(shù)后的超聲檢查結(jié)果將患者分為兩組:DVT組和no-DVT組(住院期間未發(fā)生DVT)。在患者入院第1天,術(shù)前1天,術(shù)后1天和術(shù)后7天抽取患者空腹靜脈血6ml。獲得血漿樣本后,首先通過microRNA測(cè)序方法,找出對(duì)DVT最敏感的miRNA(miR-423-5p)。然后通過酶聯(lián)熒光試驗(yàn)法和實(shí)時(shí)PCR(RT-PCR)測(cè)定血漿中D-二聚體和miR-423-5p的水平。并通過SPSS軟件分析年齡、高血壓、糖尿病、創(chuàng)傷、手術(shù)和DVT等因素對(duì)血漿中D-二聚體和miR-423-5p的水平的影響。結(jié)果:與對(duì)照組(Con)和no-DVT組相比,DVT組住院第一天血漿miR-423-5p顯著上調(diào)(P0.05),且倍數(shù)變化分別為15.47和2.37。no-DVT組患者在入院第1天和術(shù)后1天,血漿miR-423-5p表達(dá)水平會(huì)一過性的上調(diào),但在創(chuàng)傷和手術(shù)打擊過后,我們發(fā)現(xiàn)血漿miR-423-5p的表達(dá)水平呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。圍手術(shù)期(入院第1天,術(shù)前1天,術(shù)后1天和術(shù)后7天),DVT組血漿miR-423-5p表達(dá)明顯高于no-DVT組,且保持在較高水平。受試者工作特征曲線(Receiver Operating Characteristic,ROC)分析顯示血漿miR-423-5p和D-二聚體的受試者工作特征曲線下面積(Area Under Curve,AUC)分別為0.663(95%CI:0.545-0.781)和0.491(95%CI:0.364-0.617)。結(jié)論:年齡、高血壓、糖尿病等因素對(duì)老年下肢骨折患者血漿miR-423-5p表達(dá)水平的影響較小。創(chuàng)傷和手術(shù)打擊都可使老年下肢骨折患者血漿miR-423-5p表達(dá)水平一過性升高,創(chuàng)傷和手術(shù)打擊過后血漿miR-423-5p表達(dá)水平便會(huì)降低。只有DVT患者可使血漿miR-423-5p表達(dá)水平持續(xù)保持在較高水平,在住院期間不會(huì)出現(xiàn)下降趨勢(shì)。血漿D-二聚體對(duì)老年下肢骨折患者DVT的診斷能力較低。通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn):血漿miR-423-5p對(duì)老年下肢骨折患者DVT的診斷價(jià)值高于血漿D-二聚體。因此我們可得出結(jié)論:血漿miR-423-5p可作為老年下肢骨折患者DVT的新型非侵入性生物標(biāo)志物。
【學(xué)位單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R687.3;R543.6
【部分圖文】：

表 6 PCR 反應(yīng)體系Table 6 PCR reaction system試劑組成 劑量uantiTectsYBR Green PCR Master Mix 12.5umiScript Universal Primer 2.5uCe_miR-39_1 miScript PrimerAssay 2.5ule-free water 5.5u表 5 的 cDNA 2ul量 25ul 充分混勻，按照 Table 3 的條件設(shè)置 PCR 反應(yīng)（。10）從 mspike-In Control 的每個(gè)反應(yīng)中獲取 CT 值信息。（11）根據(jù) mspike-In Control 的拷貝數(shù)和 CT 值生成一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線（如

圖 2 解離曲線分析n curve analysis. Dissociation curve analysis of 2e A yields only one peak, resulting from tduct . Sample B shows a peak from the specific temperature from amplification of primer–dimers特異性和特性解離曲線CR 產(chǎn)物的特異性和特性，在 PCR 反應(yīng)程序完利用 PCR 解離曲線進(jìn)行 PCR 產(chǎn)物的特異性分：在溫度非常緩慢地增加從低溫（例如 65℃）溫度，PCR 產(chǎn)物是雙鏈的，因此 SYBR Green但在高溫下，PCR 產(chǎn)物變性，導(dǎo)致熒光迅速連續(xù)測(cè)量熒光值與溫度作圖，產(chǎn)生一條曲線，單峰是合格樣品，樣品 B 解離曲線為雙峰是不

在 DVT 組中，發(fā)現(xiàn)性別，高血壓和糖尿病對(duì)血漿 miR-423-5p 水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著影響（圖 4B，C，D），P> 0.05。在 no-DVT 組中，性別，高血壓和糖尿病患者血漿 miR-423-5p 水平同樣無顯著差異（P> 0.05）結(jié)果如圖 4E，F(xiàn)，G 所示。這些數(shù)據(jù)表明血漿 miR-423-5p 的表達(dá)水平受DVT 的影響較大，受性別、高血壓和糖尿病等因素的影響較小。表 9 研究對(duì)象的一般臨床數(shù)據(jù)Table 9 General clinical data of study subject變量 對(duì)照組（20） no-DVT 組（37） DVT 組（47） 共計(jì)（104）年齡（歲） 71.25±5.95 75.38±7.76 79.45±8.13 76.42±8.18男/女 6/14 12/25 14/33 32/72糖尿病(是/否) 7/13 9/28 7/40 23/81高血壓(是/否) 12/8 15/22 15/32 42/62
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 丁夢(mèng)圓;何楊;阮長(zhǎng)耿;;循環(huán)microRNA在靜脈血栓栓塞診斷中的研究進(jìn)展[J];中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2016年10期

2 張成歡;劉云;;骨科手術(shù)患者相關(guān)血栓形成風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2015年04期

3 魏禮清;李穎;胡建華;孔德勇;孔曉宇;盧忠心;;循環(huán)微小RNA-500在丙型肝炎肝硬化到肝癌病程中的表達(dá)[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2014年06期

4 潘長(zhǎng)福;汪泱;沈曉黎;婁遠(yuǎn)蕾;阮瓊芳;鄧志鋒;;顱腦損傷后海馬區(qū)notch信號(hào)分子及其相關(guān)miRNA的表達(dá)變化[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2011年02期

5 曾俊杰;孫凱;吳承堂;雷尚通;王偉;;結(jié)直腸癌與毗鄰癌旁組織中microRNA-221與CDKN1C/p57的差異表達(dá)[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2011年01期

本文編號(hào)：2854769