【摘要】：目的:完善對心肌組織樣結構的鑒定,探究不同心肌組織裂解液對骨髓間充質干細胞(BMSCs)定向分化的影響;探究組織工程化心肌的構建。方法:以全心組織裂解液定向誘導BMSCs分化為心肌組織樣結構為實驗對照,分別用心房肌組織裂解液、心室肌組織裂解液誘導BMSCs定向分化。倒置相差顯微鏡下觀察誘導過程中細胞的形態(tài)變化,透射電鏡觀察細胞的超微結構,免疫熒光細胞化學染色檢測各組細胞相關蛋白(α-actin和cTnI),qRT-PCR檢測各組細胞ANP、HCN4和MLC-2v基因的表達。采用免疫熒光組織化學染色方法,檢測心肌組織樣結構內相關蛋白(collagenⅠ、collagenⅢ、VEGF、vWF、CD31以及cTnI),探究心肌組織樣結構的構成。結果:(1)全心組織裂解液能誘導BMSC分化為較復雜的心肌組織樣結構,經免疫熒光染色法檢測,可見結構內有cTn I、VEGF、vWF、CD31陽性細胞,細胞間檢測出collagenⅠ、collagenⅢ,且以collagenⅠ為主。(2)全心組織裂解液能誘導BMSCs分化為較復雜的心肌組織樣結構,在同等條件下,心房肌組織裂解液和心室肌組織裂解液不能誘導出心肌組織樣結構。(3)心房肌組織裂解液組,在誘導分化的過程中,觀察到有大量的分泌顆粒產生。(4)心房肌組織裂解液誘導組中可檢測到ANP、HCN4高表達,MLC-2v不表達。心室肌組織裂解液誘導組中可檢測到MLC-2v高表達,ANP、HCN4不表達。結論:全心組織裂解液誘導BMSCs形成的心肌組織樣結構,不僅有心肌樣細胞,還有早期分化的內皮樣細胞;結締組織包裹心肌樣細胞形成束狀結構,內含大量主要成分為Ⅰ型膠原蛋白的膠原纖維。心房肌組織裂解液可誘導BMSCs向心房肌細胞方向分化,心鈉素ANP高表達,竇房結細胞標志物HCN4高表達。心室肌組織裂解液可誘導BMSCs向心室肌細胞方向分化,心室肌細胞特異性肌球蛋白輕鏈MLC-2v高表達。功能活動對形態(tài)與結構的發(fā)生、發(fā)育有重要的促進作用,是形態(tài)與結構發(fā)育成熟的必備條件。
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R542.2
【圖文】：

-aP0BMSCs培養(yǎng)3d（×5）

-bP0BMSCs培養(yǎng)7d（×5）

-c P3 BMSCs 培養(yǎng) 3d（×5） 圖 1-1-d P3 BMSCs 培養(yǎng) 7d（×5）

【參考文獻】

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本文編號：2743926