【摘要】：目的探討miR-142-5p在動(dòng)脈粥樣硬化組織中的表達(dá)及對(duì)人巨噬細(xì)胞凋亡的作用。方法構(gòu)建動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型,qRT-PCR檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化組織中miR-142-5p的表達(dá)水平。50μg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激人巨噬細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)、內(nèi)皮細(xì)胞24 h后,提取細(xì)胞RNA,qRT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中miR-142-5p的表達(dá)水平。靶基因預(yù)測(cè)軟件預(yù)測(cè)miR-142-5p的靶基因,雙熒光素酶報(bào)告基因鑒定靶基因的正確性。細(xì)胞轉(zhuǎn)染miR-142-5p mimic、mimic control、miR-142-5p inhibitor、inhibitor control,Western blot和qRT-PCR檢測(cè)miR-142-5p對(duì)靶基因的調(diào)控作用,流式細(xì)胞儀檢測(cè)miR-142-5p和靶基因?qū)奘杉?xì)胞凋亡的作用。結(jié)果 miR-142-5p在動(dòng)脈粥樣硬化組織中表達(dá)上調(diào),與正常組織相比差異顯著(P0.01)。血管平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)ox-LDL刺激后miR-142-5p的表達(dá)水平與刺激前沒有明顯變化,而巨噬細(xì)胞經(jīng)ox-LDL刺激后miR-142-5p的表達(dá)水平較刺激前明顯升高(P0.01)。預(yù)測(cè)miR-142-5p的靶基因?yàn)檗D(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)。miR-142-5p mimic與TGF-β2共轉(zhuǎn)染后熒光素酶活性最低;miR-142-5p mimic組TGF-β2蛋白和mRNA的表達(dá)水平與mimic control組相比明顯下降,miR-142-5p inhibitor組TGF-β2蛋白和mRNA的表達(dá)水平與inhibitor control組相比明顯升高(P0.01);miR-142-5p mimic組細(xì)胞凋亡率明顯高于mimic control組,TGF-β2 siRNA組細(xì)胞凋亡率明顯高于siRNA control組(P0.01)。結(jié)論 miR-142-5p在動(dòng)脈粥樣硬化中過(guò)度表達(dá),miR-142-5p通過(guò)下調(diào)靶基因TGF-β2促進(jìn)人巨噬細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of miR-142-5p in atherosclerosis and its effect on apoptosis of human macrophages. Methods Atherosclerosis rat model was established. The expression of miR-142-5p in atherosclerotic tissue was detected by qRT-PCR. 50 渭 g / L oxidized low density lipoprotein (ox-LDL) stimulated human macrophages and vascular smooth muscle cell (VSMC), endothelial cells for 24 h. The expression of miR-142-5p in vascular smooth muscle cells was detected by RNA,qRT-PCR. The target gene prediction software predicted the correctness of target gene identification of miR-142-5p target gene and double luciferase reporter gene. The regulatory effect of miR-142-5p on target gene was detected by miR-142-5p mimic,mimic control,miR-142-5p inhibitor,inhibitor control,Western blot and qRT-PCR, and the effect of miR-142-5p and target gene on macrophage apoptosis was detected by flow cytometry. Results the expression of miR-142-5p in atherosclerotic tissues was up-regulated, which was significantly different from that in normal tissues (P 0.01). The expression level of miR-142-5p in vascular smooth muscle cells and endothelial cells stimulated by ox-LDL had no significant change compared with that before stimulation, but the expression level of miR-142-5p in macrophages stimulated by ox-LDL was significantly higher than that before stimulation (P 0.01). The target of miR-142-5p was predicted to be transforming growth factor 尾 2 (TGF- 尾 2). The luciferase activity of miR-142-5p mimic and TGF- 尾 2 co-transfected group was the lowest, the expression level of TGF- 尾 2 protein and mRNA in miR-142-5p mimic group was significantly lower than that in mimic control group, and the expression level of TGF- 尾 2 protein and mRNA in miR-142-5p inhibitor group was significantly higher than that in inhibitor control group (P 0.01). The apoptosis rate of miR-142-5p mimic group was significantly higher than that of mimic control group, and the apoptosis rate of TGF- 尾 2 siRNA group was significantly higher than that of siRNA control group (P 0.01). Conclusion miR-142-5p is overexpressed in atherosclerosis. MiR-142-5p promotes apoptosis of human macrophages by down-regulating the target gene TGF- 尾 2.
【作者單位】： 鄭州大學(xué)附屬南陽(yáng)中心醫(yī)院特需病房一病區(qū);
【分類號(hào)】：R543.5

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本文編號(hào)：2503009