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靶向沉默HDAC6對乳鼠心房肌成纖維細(xì)胞活化增殖的作用

發(fā)布時間:2019-04-22 20:17
【摘要】:目的探究組蛋白去乙;(HDAC6)對乳鼠心房肌成纖維細(xì)胞活化增殖的影響作用。方法將50只乳鼠(雄性)分別提取心房肌成纖維細(xì)胞,應(yīng)用Western blot法測定HDAC6和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達情況;運用qRT-PCR技術(shù)檢測HDAC6和α-SMA mRNA的表達情況;MTT法檢測心房肌成纖維細(xì)胞的細(xì)胞增殖活性;使用LipofectamineTM2000 Reagent向心房肌成纖維細(xì)胞中轉(zhuǎn)染小干擾RNA HDAC6(siRNA-HDAC6)后觀察對心房肌成纖維細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果轉(zhuǎn)染心房肌成纖維細(xì)胞siRNA-HDAC6組HDAC6和α-SMA的蛋白表達明顯下降;qRT-PCR技術(shù)檢測siRNA-HDAC6組中HDAC6和α-SMA的mRNA表達明顯下降;轉(zhuǎn)染siRNA-HDAC6明顯抑制心房肌成纖維細(xì)胞的增殖活性。結(jié)論靶向沉默HDAC6可抑制心房肌成纖維細(xì)胞活化增殖,提示其在心房纖維化中可能發(fā)揮調(diào)控作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of histone deacetylase (HDAC6) on activation and proliferation of neonatal rat atrial fibroblasts. Methods the expression of HDAC6 and 偽-smooth muscle actin (偽-SMA), HDAC6 and 偽-SMA mRNA were detected by Western blot, HDAC6 and 偽-SMA mRNA in atrial fibroblasts of 50 neonatal rats (male), respectively, and the expression of 偽-smooth muscle actin (偽-SMA) and 偽-smooth muscle actin (偽-actin) were measured by qRT-PCR. The proliferation activity of atrial fibroblasts was measured by MTT assay, and the effects of small interfering RNA HDAC6 (siRNA-HDAC6) transfection on the proliferation of atrial fibroblasts were observed after LipofectamineTM2000 Reagent was used to transfect the cells into atrial fibroblasts. Results the expression of HDAC6 and 偽-SMA protein in atrial fibroblasts transfected with siRNA-HDAC6 was significantly decreased, and the expression of HDAC6 and 偽-SMA mRNA in siRNA-HDAC6 group was significantly decreased by qRT-PCR technique, and the expression of HDAC6 and 偽-SMA in siRNA-HDAC6 group was significantly lower than that in siRNA-HDAC6 group. Transfection of siRNA-HDAC6 significantly inhibited the proliferation of atrial fibroblasts. Conclusion targeting silencing HDAC6 can inhibit the activation and proliferation of atrial fibroblasts, suggesting that it may play a regulatory role in atrial fibrosis.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院心胸外科安徽醫(yī)科大學(xué)心血管病研究中心;
【基金】:安徽省高校自然科學(xué)研究項目(編號:KJ2015A320) 安徽省科技攻關(guān)項目(編號:1501041148)
【分類號】:R541.75

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