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血管損傷反應對血管平滑肌合酶Ⅰ和轉錄釋放因子表達的影響及機制

發(fā)布時間:2019-01-07 16:15
【摘要】:目的探討聚合酶Ⅰ和轉錄釋放因子(polymeraseⅠand transcript release factor,PTRF or Cavin~(-1))在損傷血管后血管再狹窄病理過程的作用及分子機制。方法將200~220 g雄性Sprague Dawley大鼠采用數(shù)字表法隨機分為假手術組和血管損傷組,血管損傷組制備頸動脈損傷動物模型。用蘇木精伊紅染色顯示損傷后頸動脈的結構,免疫熒光、Western blotting檢測損傷后血管的Cavin~(-1)蛋白表達,real-time RT-PCR方法檢測損傷后血管的Cavin~(-1) mRNA表達,免疫組織化學、Western blotting、免疫共沉淀法檢測頸動脈泛素化蛋白的表達。大鼠動脈平滑肌細胞實驗分為(1)空白對照組(control,CTRL);(2)CHX組:用放線菌酮(cycloheximide,CHX,25μmol/L)預處理1 h;(3)CHX+MG組:用CHX預處理1 h后,接著用MG 132(蛋白酶體抑制劑,10μmol/L)處理24 h;(4)CHX+CQ組:用CHX預處理1 h后,接著用氯喹(chloroquin,CQ,10μmol/L)處理24 h。應用Western blotting檢測細胞Cavin~(-1)蛋白濃度。結果動物模型中,球囊損傷后,血管壁明顯增厚,Cavin~(-1)表達顯著下降(P0.05),Cavin~(-1) mRNA表達差異不明顯,泛素化蛋白表達顯著上調(P0.05)。細胞實驗中,應用CHX預處理可明顯降低平滑肌細胞Cavin~(-1)的表達(P0.05),而CHX+MG可以明顯對抗CHX上述作用過程(P0.05)。結論球囊損傷頸動脈后,血管的Cavin~(-1)蛋白表達下調,其機制可能與增加的泛素化-蛋白酶體降解途徑有關。
[Abstract]:Objective to investigate the role and molecular mechanism of polymerase 鈪,

本文編號:2403864

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