【摘要】：目的擬構(gòu)建肥厚型心肌病特異性誘導(dǎo)多能干細(xì)胞模型。方法通過(guò)收集肥厚型心肌病患者外周血液標(biāo)本,分離培養(yǎng)其中的單核細(xì)胞;然后,將編碼Oct4、Sox2、KIf4、L-Myc、Lin28、mp53DD和EBNAl的附加型質(zhì)粒組合電轉(zhuǎn)外周血單核細(xì)胞進(jìn)行重編程;最后,通過(guò)形態(tài)學(xué)、AP染色、干細(xì)胞多能表面標(biāo)志物免疫熒光、RT-PCR及EB自發(fā)三胚層分化潛能實(shí)驗(yàn)對(duì)獲得的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)分析。結(jié)果誘導(dǎo)獲得的多能干細(xì)胞顯現(xiàn)出明顯的干細(xì)胞樣形態(tài),AP染色、多能標(biāo)志物檢測(cè)均符合干細(xì)胞特征與人胚胎干細(xì)胞H9相似。此外,EB自發(fā)分化實(shí)驗(yàn)也證實(shí)具有完全的三胚層分化發(fā)育潛力。結(jié)論成功獲得肥厚型心肌病特異性誘導(dǎo)多能干細(xì)胞系,為后續(xù)疾病特異性心肌分化模型的建立、疾病發(fā)生機(jī)制的研究及藥物開(kāi)發(fā)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to construct a specific pluripotent stem cell model induced by hypertrophic cardiomyopathy. Methods Mononuclear cells were isolated from peripheral blood samples of patients with hypertrophic cardiomyopathy, and then reprogrammed by electroporation of additional plasmids encoding Oct4,Sox2,KIf4,L-Myc,Lin28,mp53DD and EBNAl. The pluripotent stem cell surface markers were detected by RT-PCR and EB spontaneous tridermal differentiation potential test. Results the induced pluripotent stem cells showed obvious stem cell like morphological AP staining, and the multipotent markers were similar to human embryonic stem cells H9. In addition, Epstein-Barr spontaneous differentiation experiment also confirmed the full potential of tridermal differentiation and development. Conclusion the multifunctional cell lines specifically induced by hypertrophic cardiomyopathy were successfully obtained, which laid a foundation for the establishment of the model of specific myocardial differentiation, the study of the pathogenesis of the disease, and the development and application of drugs.
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院心血管內(nèi)科;中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No:81170092)
【分類號(hào)】：R542.2

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本文編號(hào)：2244150