【摘要】：目的:探討白藜蘆醇(resveratrol)是否可通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激機制保護缺氧心肌細胞。方法:(1)H9c2心肌細胞隨機分為對照組和缺氧組(1~8 h),Western blot法檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)特征性分子伴侶葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94(GRP94)的表達以確定缺氧誘導(dǎo)ERS的時間。(2)培養(yǎng)H9c2心肌細胞建立缺氧模型,隨機分為對照組、缺氧組、白藜蘆醇+缺氧組、白藜蘆醇組。Western blot檢測缺氧對GRP 78,GRP 94,糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的表達,觀察白藜蘆醇對缺氧所致GRP 78,GRP 94,GSK-3β磷酸化的影響;共聚焦顯微鏡觀察白藜蘆醇對缺氧所致線粒體通透性轉(zhuǎn)移孔(mPTP)開放的影響;電鏡觀察白藜蘆醇對缺氧所致心肌細胞超微結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果:與對照組相比,缺氧3 h導(dǎo)致H9c2細胞GRP 78和GRP 94表達增加最多;白藜蘆醇明顯抑制缺氧所致GRP 78和GRP 94的表達及GSK-3β磷酸化水平。與對照組相比,缺氧組TMRE熒光強度明顯減少,白藜蘆醇明顯抑制缺氧所致TMRE熒光強度的減少(即線粒體膜電位減少、mPTP開放)。與對照組相比,白藜蘆醇明顯減輕缺氧所致心肌細胞線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等超微結(jié)構(gòu)的損傷。結(jié)論:白藜蘆醇對缺氧所致H9c2心肌細胞損傷具有保護作用,該作用可能與抑制ERS使GSK-3β失活,進而阻止mPTP開放有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate whether resveratrol (resveratrol) can protect hypoxic cardiomyocytes by inhibiting endoplasmic reticulum stress. Methods: (1) H9c2 cardiomyocytes were randomly divided into two groups: control group and hypoxia group (1h). The expression of glucone-regulated protein 78 (GRP78) and glucose-regulated protein 94 (GRP94) in endoplasmic reticulum stress (ER) stress (ERS) were detected by Western blot to determine the time of hypoxia induced ERS. Hypoxia model was established by H9c2 cardiomyocytes. The rats were randomly divided into control group, hypoxia group, resveratrol hypoxia group and resveratrol group. Western blot was used to detect the expression of GRP 78 GRP94, glycogen synthase kinase 3 尾 (GSK-3 尾) and the effect of resveratrol on the phosphorylation of GSK-3 尾 in GRP 78 GRP94 induced by hypoxia. The effect of resveratrol on the opening of mitochondrial permeability transfer pore (mPTP) was observed by confocal microscope and the ultrastructure of cardiomyocytes induced by hypoxia was observed by electron microscope. Results: compared with the control group, the expression of GRP 78 and GRP 94 increased most in H9c2 cells after 3 h hypoxia, and resveratrol significantly inhibited the expression of GRP 78 and GRP 94 and the phosphorylation of GSK-3 尾. Compared with the control group, the fluorescence intensity of TMRE in hypoxia group was significantly decreased, and resveratrol significantly inhibited the decrease of TMRE fluorescence intensity induced by hypoxia (that is, the mitochondrial membrane potential decreased and TMRE opened). Compared with the control group, resveratrol significantly alleviated the damage of mitochondria, endoplasmic reticulum and other ultrastructure induced by hypoxia. Conclusion: resveratrol has a protective effect on H9c2 cardiomyocyte injury induced by hypoxia, which may be related to the inhibition of ERS inactivation of GSK-3 尾 and the prevention of mPTP opening.
【作者單位】： 華北理工大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗研究中心中匈合作中醫(yī)藥實驗室唐山市新藥基礎(chǔ)研究重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81570275) 河北省高等學(xué)�？茖W(xué)技術(shù)研究項目(ZD2014006,QN2014092) 華北理工大學(xué)杰出青年基金(JP201302) 大學(xué)生創(chuàng)新性實驗計劃項目(X2015046)
【分類號】：R54

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本文編號：2204066