【摘要】：背景甲狀腺功能亢進是心房顫動最常見的病因之一,但甲狀腺激素水平偏高導致房顫容易發(fā)作和持續(xù)的細胞分子機制尚不清晰,制約了該類房顫的更有效治療。甲狀腺激素受體位于細胞核,其與靶器官細胞核受體結合后發(fā)揮直接作用,但還發(fā)現(xiàn)甲狀腺激素的某些作用,非直接作用于靶器官,而是通過激活其它系統(tǒng)間接對靶器官產生作用。目的兔腹腔內注射甲狀腺素制備甲亢相關性房顫易患模型并給予厄貝沙坦灌胃,實施甲狀腺素和厄貝沙坦雙重暴露,乳兔左心房肌細胞體外培養(yǎng)藥物干預,觀察左心房電生理特征和房顫易患性,左心房肌細胞凋亡現(xiàn)象,檢測與RAS過度激活相關的AngⅡ等多種細胞因子表達水平,檢測ASK1-p38MAPK信號通路及凋亡相關基因、蛋白表達情況,明確甲狀腺素、RAS與左心房肌細胞凋亡和房顫發(fā)生的相關性。為探索甲亢源性房顫新的治療方法提供科學依據(jù)。方法(一)動物實驗1、建立兔甲亢源性房顫易患模型成年健康兔70只隨機分為五組：對照組、給藥2月組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組；對照組10例,每日腹腔注射等劑量生理鹽水；給藥2月組10例,每日腹腔注射甲狀腺素50μg/kg,2月后抽血并取心臟(為亞組,與持續(xù)給藥4個月組比較)；中途撤藥組20例,每日腹腔注射甲狀腺素50μg/kg,2個月后撤藥改為注射等劑量生理鹽水；持續(xù)給藥組20例,每日腹腔注射甲狀腺素50μg/kg;厄貝沙坦組10例,每日腹腔注射甲狀腺素50μg/kg+厄貝沙坦灌胃50mg/kg。實驗持續(xù)4月。2、兔左心房電生理檢測實驗2月及4月行兔心程序電刺激,檢測左心房多項電生理指標。刺激周長200ms、150ms時左心房有效不應期(AERP)、左心房激動傳導速度(CV)、激動波長(WL)、房顫誘發(fā)率；實驗結束后耳緣靜脈探血、處死動物,開胸取左心房肌活體組織。3、TUNEL法檢測兔左心房肌細胞凋亡情況4、檢測RAS相關因子的表達情況實時熒光定量PCR檢測左心房肌組織ACE、ACE2mRNA相對表達量。ELISA檢測ACE、ACE2、AngⅡ血漿濃度及左心房肌組織表達量。5、檢測ASK1-p38MAPK信號通路及凋亡相關基因、蛋白表達情況實時熒光定量PCR檢測左心房肌組織Bax、Bcl-2mRNA相對表達量。Western blot檢測左心房肌組織p-ASK1、ASK1、p-p38MAPK、p38MAPK、Bax、Bcl-2、 PARP剪切體、caspase3剪切體蛋白相對表達量。(二)細胞實驗1、兔左心房肌細胞體外培養(yǎng)標準方法完成乳兔左心房肌細胞的分離、培養(yǎng)、純化和鑒定。2、藥物干預取第2代培養(yǎng)至第7天的左心房肌細胞,分為六組：對照組,加入適量生理鹽水;NQDI(ASK1抑制劑)組,加入5×10-7mol/L的NQDI;AngⅡ組,加入1×10-6mol/L的AngⅡ; AngⅡ+NQDI組,加入1×10-6mol/L的AngⅡ+5×10-7mol/L的NQDI;甲狀腺素組,加入1×10-7mol/L的甲狀腺素；甲狀腺素+NQDI組,加入1×10-7mol/L的甲狀腺素+5×10-7mol/L的NQDI;藥物干預24小時。3、檢測左心房肌細胞凋亡Annexin V-FITC/PI流式細胞儀檢測左心房肌細胞凋亡情況。4、檢測ASK1-p38MAPK信號通路及凋亡相關基因、蛋白表達情況實時熒光定量PCR檢測左心房肌細胞Bax、Bcl-2mRNA相對表達量。Western blot檢測左心房肌細胞p-ASK1、ASK1、p-p38MAPK、p38MAPK、Bax、Bcl-2、PARP剪切體、caspase3剪切體蛋白相對表達量。結果(一)動物實驗1、左心房電生理特征1.1干預2個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組AERP200分別為129.46±5.21、104.55±5.12、105.78±4.10、123.40、6.71ms;中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組較對照組AERP200縮短,P0.05,中途撤藥組、持續(xù)給藥組較厄貝沙坦組AERP200縮短,P0.05;干預2個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組AERP150分別為103.68±5.21、79.64±5.22、80.76±5.58、100.54±6.39ms；中途撤藥組、持續(xù)給藥組較對照組、厄貝沙坦組AERP150縮短,P0.05。干預4個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組AERP200分別為128.75±5.05、120.55±5.12、92.78±4.20、125.16±8.03ms;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組AERP200縮短,P0.05,中途撤藥組較對照組、厄貝沙坦組AERP200縮短,P0.05；干預4個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組AERP150分別為104.32±5.20、98.08±5.36、67.34±5.02、102.52±7.05ms;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組AERP150縮短,P0.05,中途撤藥組較對照組AERP150縮短,P0.05。1.2干預2個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組CV分別為85.42±3.81、76.50±4.25、75.12±4.37、81.61±1.71cm/s；中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組較對照組CV減慢,P0.05,中途撤藥組、持續(xù)給藥組較厄貝沙坦組減慢,P0.05；干預4個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組CV分別為84.59±3.81、85.66±4.08、70.94±4.07、 82.26±2.30cm/s;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組CV減慢,P0.05。1.3干預2個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組WL分別10.99±2.75、7.95±3.11、7.93±2.67、9.76±2.98cm；中途撤藥組、持續(xù)給藥組較對照組、厄貝沙坦組WL縮短,P0.05；干預4個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組WL分別10.89±2.91、10.32±2.59、6.57±2.80、9.57±3.14cm；持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組WL縮短,P0.05。1.4干預2個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組房顫誘發(fā)率分別為0%、35%、31.6%、0%；中途撤藥組、持續(xù)給藥組較對照組、厄貝沙坦組房顫誘發(fā)率增高,P0.05；干預4個月后對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組房顫誘發(fā)率分別為0%、15%、57.9%、11.1%；持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組房顫誘發(fā)率增高,P0.05。2、左心房肌細胞凋亡情況對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌細胞凋亡率分別為4.58±1.75%、26.10±6.36%、20.49±6.74%、37.51±9.57%、17.60±4.45%;中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組較對照組凋亡率增高,P0.05；中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組凋亡率下降,但仍高于對照組,P0.05；中途撤藥組與厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組凋亡率增高,P=-0.003。3、RAS相關因子的表達情況3.1對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織ACEmRNA相對表達量分別為0.0180±0.0035、0.0270±0.0118、0.0593±0.0284、0.0321±0.0084、0.0354±0.0080;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組ACEmRNA相對表達量增高,P0.05,對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組ACEmRNA相對表達量增高,P0.05。3.2對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織ACE2mRNA相對表達量分別0.0171±0.0025、0.0061±0.0025、0.0024±0.0013、0.0116±0.0038、0.0047±0.0010;中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組較對照組ACE2mRNA相對表達量下降,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組ACE2mRNA相對表達量增高,P0.05,厄貝沙坦組高于中途撤藥組,P0.05；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組ACE2mRNA相對表達量顯著下降,P0.001。3.3對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組ACE血漿濃度分別為3.616±0.582、6.413±0.771、13.402±1.991、6.723±0.914、8.559±0.854ng/ml;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組ACE血漿濃度增高,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組ACE血漿濃度下降,但仍高于對照組,P0.05,中途撤藥組與厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組ACE血漿濃度顯著增高,P0.001。對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織ACE表達量分別為517.91±85.26、758.38±73.42、1392.4±153.84、880.13±106.94、1006.4±103.71ng/100mg;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組ACE組織表達量增高,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組ACE組織表達量下降,但仍高于對照組,P0.05,厄貝沙坦組高于中途撤藥組,P0.05；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組ACE組織表達量顯著增高,P0.001。3.4對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組ACE2血漿濃度分別為755.52±54.03、511.91±47.10、352.27±43.16、710.81±31.07、554.54±43.73pg/ml;中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組較對照組ACE2血漿濃度下降,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組ACE2血漿濃度增高,但仍低于對照組,P0.05,厄貝沙坦組較中途撤藥組增高,P0.05；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組ACE2血漿濃度顯著下降,P0.001。對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織ACE2表達量分別為255.36±19.38、156.78±17.38、79.67±11.60、187.60±9.06、137.23±12.92pg/100mg;中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組較對照組ACE2組織表達量下降,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組ACE2組織表達量增高,但仍低于對照組,P0.05,厄貝沙坦組高于中途撤藥組,P0.05；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組ACE2組織表達量顯著下降,P0.001。3.5對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組AngⅡ血漿濃度分別為0.321±0.093、0.590±0.142、1.284±0.197、0.530±0.092、0.940±0.271ng/ml;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組AngⅡ血漿濃度增高,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組Ang Ⅱ血漿濃度下降,但仍高于對照組,P0.05,中途撤藥組與厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組AngⅡ血漿濃度增高,P=0.001。對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織Ang Ⅱ表達量分別為0.166±0.053、0.291±0.068、0.644±0.092、 0.264±0.039、0.452±0.099ng/100mg;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組AngⅡ組織表達量增高,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組AngⅡ組織表達量下降,但仍高于對照組,P0.05,中途撤藥組與厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組AngⅡ組織表達量顯著增高,P0.001。4、左心房肌組織ASK1-p38MAPK信號通路及凋亡相關基因、蛋白表達情況4.1對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織BaxmRNA相對表達量分別為0.0202±0.0060、0.0197±0.0090、0.0392±0.0199、0.0217±0.0032、0.0213±0.0087；持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組BaxmRNA相對表達量增高,P0.05,對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組BaxmRNA相對表達量增高,P0.05。4.2對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織Bcl-2mRNA相對表達量分別為0.0015±0.0003、0.0008±0.0005、0.0004±0.0002、0.0010±0.0003、0.0006±0.0001；中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組較對照組Bcl-2mRNA相對表達量下降,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組增高,但仍低于對照組,P0.05,厄貝沙坦組與中途撤藥組無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組Bcl-2mRNA相對表達量下降,P0.05。4.3對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織p-ASK1/ASK1蛋白相對表達量分別為0.5825±0.0608、0.5276±0.0537、0.8746±0.1010、0.6298±0.0383、0.8344±0.0511；持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組p-ASK1/ASK1蛋白相對表達量增高,P0.05,厄貝沙坦組高于中途撤藥組,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組與對照組無差異；持續(xù)給藥4月組與給藥2月組p-ASK1/ASK1蛋白相對表達量無差異,P=0.273。4.4對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相對表達量分別為0.3609±0.0596、0.7245±0.0919、1.0473＋0.1310、0.8062±40.0931、0.4838±0.0776；持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相對表達量增高,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相對表達量下降,但仍高于對照組,P0.05,中途撤藥組與厄貝沙坦組無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相對表達量顯著增高,P0.001。4.5對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織Bax蛋白相對表達量分別為0.8274±0.0864、0.8375±0.0638、1.1232±10.1347、0.8265±0.0642、0.8054±0.1117;持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組Bax蛋白相對表達量增高,P0.05,對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組Bax蛋白相對表達量顯著增高,P0.001。4.6對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織Bcl-2蛋白相對表達量分別為0.5429±0.0870、0.3844±0.0471、0.2305±0.0488、0.4142±0.0330、0.3752±0.0827；中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組較對照組Bcl-2蛋白相對表達量下降,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組Bcl-2蛋白相對表達量增高,但仍低于對照組,P0.05,厄貝沙坦組與中途撤藥組無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組Bcl-2蛋白相對表達量顯著下降,P0.001。4.7對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織PARP蛋白剪切體相對表達量分別為0.4841±0.0995、0.6129±0.0938、0.8318±0.0620、0.6292±0.0640、0.6499±0.0873；持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組PARP蛋白剪切體相對表達量增高,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組PARP蛋白剪切體相對表達量下降,但仍高于對照組,P0.05,中途撤藥組與厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組PARP蛋白剪切體相對表達量顯著增高,P0.001。4.8對照組、中途撤藥組、持續(xù)給藥組、厄貝沙坦組、給藥2月組左心房肌組織caspase3蛋白剪切體相對表達量分別為0.3861±0.0699、0.5262±0.1095、0.6884±0.0929、0.5451±0.0815、0.6036±0.0763；持續(xù)給藥組較對照組、中途撤藥組、厄貝沙坦組caspase3蛋白剪切體相對表達量增高,P0.05,中途撤藥組、厄貝沙坦組較持續(xù)給藥組caspase3蛋白剪切體相對表達量下降,但仍高于對照組,P0.05,中途撤藥組與厄貝沙坦組間無差異；持續(xù)給藥4月組較給藥2月組caspase3蛋白剪切體相對表達量增高,P=0.025。(二)細胞實驗1、左心房肌細胞體外培養(yǎng)結果1.1培養(yǎng)的左心房肌細胞鏡下觀察：2-3h后可見少量細胞貼壁,接種16～24h后細胞完全貼壁,細胞為長梭形、三角形,可見單個搏動細胞,頻率較慢；培養(yǎng)48h部分細胞融合在一起；培養(yǎng)72h大部分細胞間相互連接,搏動趨于同步；培養(yǎng)4天后細胞達瓶底70%,相互連接在一起成簇,搏動基本同步；培養(yǎng)7天后細胞達瓶底80-90%以上,偽足相互交織成網,融合呈同心圓放射狀排列,呈現(xiàn)同步搏動。1.2心肌細胞存活率：經臺盼藍染色,細胞計數(shù)板計數(shù),測得酶消化后細胞存活率平均為85.2%。1.3左心房肌細胞能在較長時間內保持較高的活力,左心房肌細胞數(shù)在1-4×106/ml之間,即接種后2-5天為左心房肌細胞對數(shù)生長期,5天后進入平頂期。倍增時間約24h。1.4采用間接免疫熒光法,鑒定培養(yǎng)的細胞為左心房肌細胞,陽性率達95%。2、細胞凋亡情況對照組、NQDⅠ組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組左心房肌細胞凋亡率分別為0.0400±0.0100%、0.7000±0.2291%、51.3067±6.0515%、31.8300±13.3143%、6.1200±2.8319%、0.7000±0.1967%；經Annexin V-FITC/PI染色后,AngⅡ組較其它組左心房肌細胞凋亡率顯著升高,P0.001; AngⅡ+NQDⅠ組細胞凋亡率較AngⅡ組下降,但仍高于其他組,P0.05；對照組、NQDI組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDI組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。3、左心房肌細胞ASK1-p38MAPK信號通路及凋亡相關基因、蛋白表達情況3.1對照組、NQDⅠ組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組左心房肌細胞BaxmRNA相對表達量分別為1.0000±0.0000、1.1542±0.3566、3.4350±0.7997、1.2908±0.5254、1.0825±0.3835、1.1341±0.3269;AngⅡ組較其它組左心房肌細胞BaxmRNA相對表達量顯著增高,P0.001；對照組、NQDⅠ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。3.2對照組、NQDⅠ組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組左心房肌細胞Bcl-2mRNA相對表達量分別為1.0000±0.0000、1.0210±0.1609、0.2455±0.0699、0.5417±0.1792.0.8915±0.2128、0.8796±0.1859; AngⅡ組較其它組左心房肌細胞Bcl-2 mRNA相對表達量下降,P0.05; AngⅡ+NQDⅠ組Bcl-2mRNA相對表達量較AngⅡ組增高,但仍低于其他組,P0.05；對照組、NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。3.3對照組、NQDⅠ組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組左心房肌細胞p-ASK1/ASK1蛋白相對表達量分別為0.9142±0.1208、0.9481±0.2169、1.2989±0.2754、0.7840±0.0963、0.9391±0.1281、0.9284±0.1904；AngⅡ組較其它組左心房肌細胞p-ASK1/ASK1蛋白相對表達量增高,P0.05；對照組、NQDⅠ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。3.4對照組、NQDI組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDI組、甲狀腺素組、甲狀腺素-NQDI組左心房肌細胞p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相對表達量分別為0.7341±0.1689、0.7467±0.1254、1.1603＋0.1413、0.9261±0.1447、0.7565±0.1434、0.7523±0.2065：Ang Ⅱ組較其它組左心房肌細胞p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相對表達量增高,P0.05; AngⅡ+NQDⅠ組左心房肌細胞p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相對表達量較Ang Ⅱ組下降,但仍高于其它組,P0.05;對照組、NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。3.5對照組、NQDⅠ組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素-NQDⅠ組左心房肌細胞Bax蛋白相對表達量分別為1.1658±0.0945、1.1103±0.1082、1.4355±0.1280、0.8288±0.0644、1.1231±0.1179、1.1030±0.1415; AngⅡ組較其它組左心房肌細胞Bax蛋白相對表達量增高,P0.05;AngⅡ+NQDⅠ組低于其它組,P0.05；對照組、NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。3.6對照組、NQDⅠ組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDI組左心房肌細胞Bcl-2蛋白相對表達量分別為0.9816±0.1284、0.9675±0.1605、0.6059±0.0949、0.7452±0.1258、0.7983±0.1407、0.7496±0.1331; AngⅡ組較其它組左心房肌細胞Bcl-2蛋白相對表達量下降,P0.05；對照組、NQDⅠ組Bcl-2蛋白相對表達量高于其它組,P0.05；對照組與NQDⅠ組無差異；AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。3.7對照組、NQDⅠ組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組左心房肌細胞PARP蛋白剪切體相對表達量分別為0.5456±0.0525、0.5574±0.0696、0.9876±0.0800、0.7921±0.1113、0.5795±0.0679、0.5911±0.0624;AngⅡ組較其它組左心房肌細胞PARP蛋白剪切體相對表達量增高,P0.05;AngⅡ+NQDⅠ組較AngⅡ組下降,但仍高于其它組,P0.05；對照組、NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。3.8對照組、NQDI組、AngⅡ組、AngⅡ+NQDⅠ組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDⅠ組左心房肌細胞caspase3蛋白剪切體相對表達量分別為0.4322±0.0569、0.6229±0.0882、0.7437±0.1075、0.6328±0.0955、0.6230±0.1278、 0.6460±0.1139; AngⅡ組較其它組左心房肌細胞caspase3蛋白剪切體相對表達量增高,P0.05;對照組左心房肌細胞caspase3蛋白剪切體相對表達量低于其它組,P0.05；NQDI組、AngⅡ+NQDI組、甲狀腺素組、甲狀腺素+NQDI組兩兩比較均無統(tǒng)計學差異。結論1、本研究采用的兔甲亢源性房顫易患模型制作方法簡便、可行、成功率高,并可采用電生理指標定性和定量,似可用于甲亢源性房顫的基礎研究。2、在高甲狀腺素導致房顫過程中有左心房肌細胞凋亡發(fā)生。3、高劑量甲狀腺素暴露導致房顫的機制之一,可能是前者間接過度激活RAS使循環(huán)和組織內AngⅡ高表達,進而誘導左心房肌細胞凋亡,引發(fā)左心房電-解剖重構。4.ASK1-p38MAPK信號通路可能參與了甲亢源性房顫的發(fā)生和持續(xù),機理可能是過多的甲狀腺素通過間接作用經線粒體途徑誘導左心房肌細胞凋亡。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R541.85

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本文編號：2145466