瘦素對主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的影響
本文選題:瘦素 + 主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞; 參考:《南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)》2017年08期
【摘要】:目的 :探討瘦素對主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞(valvular interstitial cells,VICs)表型轉(zhuǎn)化的影響,揭示瘦素在鈣化性主動脈瓣疾病(calcific aortic value disease,CAVD)發(fā)生發(fā)展中所扮演的角色。方法:膠原酶消化法分離并培養(yǎng)豬主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞,采用含不同濃度的瘦素分別刺激細(xì)胞24 h,檢測細(xì)胞裂解液堿性磷酸酶(ALP)活性,并確定最佳刺激濃度。用最佳刺激濃度的瘦素刺激細(xì)胞24 h,提取細(xì)胞RNA以及蛋白,通過RT-PCR以及Western blot分別測定肌動蛋白(α-SMA)、骨橋蛋白(OPN)的表達(dá)情況。結(jié)果:瘦素刺激導(dǎo)致ALP表達(dá)上調(diào)且最大刺激濃度為100 ng/m L。相較于對照組,瘦素刺激組OPN mRNA及蛋白表達(dá)增高,而α-SMA表達(dá)無明顯變化。結(jié)論:瘦素能夠誘導(dǎo)VICs向成骨細(xì)胞分化,從而促進VICs鈣化。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of leptin on the phenotypic transformation of (valvular interstitial cells in aortic valve interstitial cells, and to reveal the role of leptin in the development of calcified aortic valve disease (calcific aortic value disease). Methods: porcine aortic valve mesenchymal cells were isolated and cultured by collagenase digestion. The cells were stimulated with different concentrations of leptin for 24 h. The alkaline phosphatase (ALP) activity in the cell lysate was measured and the optimal stimulating concentration was determined. RNA and protein were extracted from the cells stimulated by leptin at the best concentration for 24 h. The expression of 偽 -SMA and osteopontin (OPN) were detected by RT-PCR and Western blot, respectively. Results: leptin stimulation induced the up-regulation of ALP expression and the maximum stimulating concentration was 100 ng/m / L. Compared with the control group, the expression of OPN mRNA and protein in leptin stimulated group increased, but 偽 -SMA expression did not change significantly. Conclusion: leptin can induce VICs to differentiate into osteoblasts and promote calcification of VICs.
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟大血管外科;
【基金】:[基金項目]江蘇省六大人才高峰(2012-WSW-108)
【分類號】:R542.5
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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,本文編號:2114918
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