本文選題：Dock180 + 心肌梗死��； 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:探討敲除細(xì)胞質(zhì)移動蛋白1(Dock180)重組慢病毒對大鼠心肌梗死后缺血性心肌病的影響及其相關(guān)分子機(jī)制。方法:用CRISPR/Cas9系統(tǒng)構(gòu)建single guide RNA(sgRNA)Dock180質(zhì)粒,并將其包裝成敲除Dock180重組慢病毒再進(jìn)行篩選。體內(nèi)實(shí)驗(yàn),以結(jié)扎冠狀動脈左前降支制作SD雄性大鼠心肌梗死模型,用此慢病毒感染大鼠心肌梗死灶及其周圍非梗死區(qū)心肌組織,實(shí)驗(yàn)分為假手術(shù)+陰性慢病毒組(Sham+Cas9),假手術(shù)+敲除Dock180重組慢病毒組,心肌梗死+陰性慢病毒組,心肌梗死+敲除Dock180重組慢病毒組。體外實(shí)驗(yàn),將此慢病毒感染大鼠H9C2心肌細(xì)胞株,篩選建立敲除Dock180基因的單克隆H9C2心肌細(xì)胞株,再進(jìn)行低氧處理,實(shí)驗(yàn)分為陰性慢病毒組(Cas9),敲除Dock180組,陰性慢病毒低氧組,敲除Dock180低氧組。SD大鼠在術(shù)后第12周時分別行多普勒超聲測定心臟結(jié)構(gòu)和功能,并獲取心臟標(biāo)本且稱重,HE染色、苦味酸天狼星紅染色和TUNEL染色觀察心肌組織學(xué)變化;RT-PCR和免疫組化檢測Dock180 mRNA和蛋白表達(dá)水平;Western blot檢測Dock180、p-ERK1/2、Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)情況;MTT和流式細(xì)胞術(shù)分別檢測H9C2心肌細(xì)胞的增殖率和凋亡率。結(jié)果:在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,分別較假手術(shù)+陰性慢病毒組和心肌梗死+陰性慢病毒組,假手術(shù)+敲除Dock180重組慢病毒組和心肌梗死+敲除Dock180重組慢病毒的Dock180 mRNA和蛋白表達(dá)降低(P0.05),p-ERK1/2和Bcl-2蛋白表達(dá)降低(P0.05),Bax蛋白表達(dá)增加(P0.05),心臟結(jié)構(gòu)和功能惡化,心肌組織細(xì)胞間質(zhì)的膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)和細(xì)胞凋亡增加(P0.05);并且,在體外實(shí)驗(yàn)中,分別較陰性慢病毒組和陰性慢病毒低氧組,敲除Dock180組和敲除Dock180低氧組Dock180mRNA和蛋白無表達(dá),p-ERK1/2和Bcl-2蛋白表達(dá)降低(P0.05),Bax蛋白表達(dá)增加(P0.05),心肌細(xì)胞增殖存活降低和凋亡增加(P0.05)。結(jié)論:敲除Dock180重組慢病毒通過下調(diào)Dock180及其下游的促存活蛋白p-ERK1/2和Bcl-2,上調(diào)促凋亡蛋白Bax,從而抑制心肌細(xì)胞存活,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,加重心肌梗死后病理性心室重構(gòu)和缺血性心肌病。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of recombinant lentivirus ( Dock180 ) on myocardial infarction in rats with acute myocardial infarction and its relative molecular mechanism . The expression of Dock180 mRNA and protein was determined by MTT and flow cytometry . The expression of Dock180 mRNA and protein was detected by RT - PCR and immunohistochemistry . It promotes cell apoptosis , increases pathological ventricular remodeling and ischemic cardiomyopathy after myocardial infarction .
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R542.22

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 張蕾;李剛;張志升;楊東艷;扶艷波;;過表達(dá)CrkL對缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡和生存力的影響及其機(jī)制[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2014年06期

2 張旭;李剛;;鳥苷酸交換因子C3G對心肌細(xì)胞生存力的影響及其可能機(jī)制[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2012年11期

3 馮全洲,李天德,王兆霞,易軍,王莉,楊庭樹;鈣離子拮抗劑對大鼠心肌梗死后心肌細(xì)胞凋亡的影響[J];中國危重病急救醫(yī)學(xué);2004年03期

，

本文編號：2042509