OPG基因缺失加重股動(dòng)脈結(jié)扎模型小鼠下肢缺血損傷
發(fā)布時(shí)間:2018-06-09 07:11
本文選題:骨保護(hù)素 + 新生血管 ; 參考:《浙江大學(xué)》2017年碩士論文
【摘要】:實(shí)驗(yàn)?zāi)康谋狙芯恳設(shè)PG基因敲除小鼠(OPG-/-)和野生型(WT)C57BL/6種屬小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,觀察OPG基因缺失在小鼠急性下肢缺血模型中對(duì)組織缺血壞死的作用。實(shí)驗(yàn)方法采用兩種喂養(yǎng)模型:普通飼料和高脂飼料。根據(jù)基因鑒定結(jié)果把小鼠分為OPG-/-小鼠和WT小鼠兩組,同時(shí)給予右側(cè)股動(dòng)脈結(jié)扎建立下肢缺血模型,用多普勒血流掃描儀監(jiān)測(cè)術(shù)后1、3、7、14、21天的血流恢復(fù)情況;在第21天評(píng)估下肢缺血壞死,評(píng)分標(biāo)準(zhǔn):0-無壞死;1-1個(gè)腳趾壞死;2-2個(gè)或多個(gè)腳趾壞死;3-足壞死;4-下肢有壞死;5-整個(gè)大腿自行離斷。并且在第21天用取下肢腓腸肌做內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD31、血管平滑肌細(xì)胞標(biāo)記物α-SMA的免疫熒光和HE染色。用含60%脂肪的高脂飼料分別喂養(yǎng)OPG-/-小鼠和WT小鼠兩組8周之后,再行股動(dòng)脈結(jié)扎術(shù),用多普勒血流掃描儀監(jiān)測(cè)術(shù)后1、3、7、14、21天的血流恢復(fù)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果在普通飼料喂養(yǎng)組中,多普勒結(jié)果顯示OPG-/-小鼠下肢血管灌注率顯著低于WT組,在術(shù)后的第1、3、7、14天OPG-/-組和WT組灌注率分別為0.094±0.101 vs0.232±0.184(P0.05)、0.195±0.191vs0.347±0.181(P0.05)、0.414±0.238vs 0.651±0.188(P0.0001)、0.665±0.318vs0.839±0.174(P0.05);OPG-/-小鼠在第21天下肢壞疽程度要比WT小鼠嚴(yán)重,OPG-/-小鼠和WT小鼠的下肢壞死評(píng)分為1.792±1.290 vs 1.212±0.844(P0.05)。免疫熒光結(jié)果顯示:與WT小鼠相比,OPG-/-小鼠的腓腸肌第21天內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD31和血管平滑肌標(biāo)記物α-SMA有減少的趨勢(shì)。HE染色顯示:OPG-/-小鼠的腓腸肌肌纖維比WT小鼠有更加萎縮的趨勢(shì)。在高脂飼料喂養(yǎng)組中,多普勒結(jié)果顯示術(shù)后第3、7、14天OPG-/-組和 WT 組灌注率分別為 0.209±0.182 vs 0.520±0.156、0.197±0.187 vs 0.528±0.235、0.558±0.273 vs 0.905±0.155(均 P0.01);OPG-/-小鼠和 WT 小鼠在第 21 天的下肢壞死評(píng)分為 2.333±0.615 vs 0.667±0.289(P=0.017)。實(shí)驗(yàn)結(jié)論OPG基因缺失加重小鼠下肢缺血損傷,其可能機(jī)制之一就是減少血管新生,需要下一步深入研究證實(shí)。
[Abstract]:The results showed that OPG - / - mice were divided into two groups : OPG - / - mouse and WT mice . The results showed that OPG - / - mice were divided into two groups : OPG - / - mouse and WT mice .
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R543;R-332
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1999499
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