發(fā)布時間：2018-05-18 19:00

  本文選題：血管緊張素Ⅱ誘發(fā)的高血壓 + 己酮可可堿��； 參考：《山東大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：研究背景炎癥是多種心血管疾病(包括冠心病,心衰和高血壓)常見的一種病理生理特征。腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的激活被認(rèn)為是引起高血壓炎癥反應(yīng)的主要機(jī)制。血管緊張素Ⅱ是腎素-血管緊張素系統(tǒng)的一種主要介質(zhì),它通過激活包括核因子κB (NFκB)在內(nèi)的多種細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)通路,引起促炎癥細(xì)胞因子的合成和釋放,如：腫瘤壞死因子α(TNF-α)和白細(xì)胞介素(IL)-1β。越來越多的證據(jù)表明：心肌炎癥在調(diào)節(jié)心肌重構(gòu)(包括心肌纖維化和病理性肥大)方面起著非常重要的作用。心肌逐漸纖維化和肥大會導(dǎo)致擴(kuò)張的心室壁越來越僵硬,減弱心肌的舒張功能,因此它們是導(dǎo)致實驗動物和病人發(fā)生心衰的重要因素。減少促炎癥細(xì)胞因子水平的干預(yù)措施能顯著改善上述進(jìn)程,進(jìn)而預(yù)防心衰。己酮可可堿是一種甲基黃嘌呤衍生物和非特異性磷酸二酯酶抑制劑,臨床上用于治療阻塞性外周血管疾病已有30多年的歷史。除了它的流變特性,己酮可可堿還有抗炎、抗增生和抗纖維化的作用。已有研究表明：許多動物和病人在應(yīng)用己酮可可堿進(jìn)行系統(tǒng)性治療后,促炎癥細(xì)胞因子減少,對心肌梗死,心衰和特發(fā)性擴(kuò)張型心肌病具有良好的作用。然而,到目前為止,還沒有研究驗證己酮可可堿對血管緊張素Ⅱ誘發(fā)的高血壓導(dǎo)致的心肌損傷和心功能不全的作用。我們推測：己酮可可堿能抑制血管緊張素Ⅱ誘發(fā)高血壓大鼠促炎癥細(xì)胞因子的釋放,預(yù)防其心肌纖維化和病理性肥大,改善其心功能。研究目的觀察己酮可可堿對血管緊張素Ⅱ誘發(fā)高血壓大鼠促炎癥細(xì)胞因子的作用,對其心肌纖維化和病理性肥大的作用,對其心功能的影響。研究方法1.64只成年雄性Sprague-Dawley大鼠,分成四組,每組16只：(1)對照組(CON)；(2)生理鹽水+己酮可可堿組(CON+PTX);(3)單用血管緊張素Ⅱ組(ANG Ⅱ);(4)血管緊張素Ⅱ+己酮可可堿組(ANG Ⅱ+PTX);2. 將大鼠采用氯胺酮-甲苯噻嗪麻醉后,在皮下埋植微量真空泵,緩慢注射血管緊張素Ⅱ(200 ng/kg/min)或生理鹽水兩周。加己酮可可堿組,在皮下注射血管緊張素Ⅱ的同時,通過飲用水給予己酮可可堿(30mg/kg／天)。每天同一時間記錄液體攝取量和體重；3.每組大鼠取8只,每隔一天,通過尾套法測量血壓和心率；4.兩周后,采用異氟醚麻醉后,行超聲心動圖評估大鼠的心肌重構(gòu)和心功能；5.然后,將每組分成兩小組,每小組8只,其中一小組通過腹腔內(nèi)注射過量的戊巴比妥鈉(210mg/kg)處死后,收集血樣和心肌組織,稱量,行生化分析、分子學(xué)研究和心肌羥脯氨酸分析；6.每組內(nèi)剩余8只大鼠通過通過腹腔內(nèi)注射同樣劑量的戊巴比妥鈉處死后,心臟內(nèi)注滿4%的多聚甲醛,固定,脫水,石蠟包埋,行組織學(xué)研究；7.統(tǒng)計學(xué)分析：所有數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。各組間均數(shù)的比較采用單因素或雙因素的方差分析及N-K檢驗。P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。研究結(jié)果1 己酮可可堿對血管緊張素Ⅱ引起的高血壓沒有降壓作用(見圖1A)1.1高血壓模型組(ANG Ⅱ組和ANGⅡ+PTX組)的大鼠,平均動脈壓迅速、持續(xù)升高；與CON組相比,高血壓模型組6天及以后的MBP顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義；1.2 CON+PTX組與CON組相比,平均動脈壓無明顯差異；1.3 ANGⅡ+PTX組與ANG Ⅱ組相比,平均動脈壓無明顯差異；1.4各組之間的心率無明顯差異(見圖1B)。2 己酮可可堿改善了血管緊張素Ⅱ誘發(fā)高血壓大鼠的心肌肥厚和心功能(見表2)2.1四組大鼠之間的體重,EF(射血分?jǐn)?shù))無明顯差異；2.2與CON組相比,CON+PTX組大鼠的HW/BW值(心臟重量／體重)值,相對室壁厚度(RWT),等容舒張期(IVRT), E/A值無明顯差異；2.3與CON組相比,ANG Ⅱ組和ANGⅡ+PTX組大鼠的HW/BW值顯著增高,相對室壁厚度(RWT)顯著增大,等容舒張期(IVRT)顯著延長,E/A值顯著減�。�2.4與ANGⅡ組相比,ANGⅡ+PTX組大鼠的HW/BW值顯著降低；相對室壁厚度(RWT)顯著減少,等容舒張期(IVRT)顯著縮短,E/A值顯著增大；3 己酮可可堿減弱了ANGⅡ誘發(fā)高血壓大鼠的心肌纖維化3.1與CON組相比,CON+PTX組大鼠心肌間質(zhì)和血管周圍的纖維化、心肌纖維化區(qū)域(%)、心肌內(nèi)羥脯氨酸的含量無明顯差別(見圖2)。3.2與CON組相比,ANGⅡ組和ANGⅡ+PTX組大鼠心肌間質(zhì)和血管周圍的纖維化明顯增加(見圖2A),心肌纖維化區(qū)域(%)明顯增高(見圖2B),心肌羥脯氨酸的含量明顯增多(見圖2C)；3.3與ANGⅡ組相比,ANGⅡ+PTX組大鼠心肌間質(zhì)和血管周圍的纖維化明顯減少(見圖2A),心肌纖維化區(qū)域(%)明顯降低(見圖2B),心肌羥脯氨酸的含量明顯減少(見圖2C)；3.4 CON組和CON+PTX組大鼠的心肌內(nèi)只有少量α-SMA表達(dá)；與CON組相比,ANGⅡ組和ANGⅡ+PTX組大鼠心肌內(nèi)α-SMA的表達(dá)明顯升增多；與ANGⅡ組相比,ANGⅡ+PTX組大鼠心肌內(nèi)α-SMA的表達(dá)顯著減少(見圖3A和3C)。4 PTX減少了血管緊張素Ⅱ誘發(fā)高血壓大鼠心肌組織內(nèi)促炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)和血管周圍巨噬細(xì)胞的浸潤4.1 CON組和CON+PTX組之間各促炎癥細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)和抗炎癥細(xì)胞因子(IL-10)的mRNA、蛋白表達(dá)沒有顯著差異(見圖4)；4.2與CON組相比,ANGⅡ組和ANGⅡ+PTX組大鼠心肌組織內(nèi)促炎癥細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)和抗炎癥細(xì)胞因子(IL-10)的mRNA和蛋白表達(dá)顯著增加(見圖4)；4.3與ANGⅡ組相比,ANGⅡ+PTX組大鼠心肌組織內(nèi)促炎癥細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)和抗炎癥細(xì)胞因子(IL-10)的mRNA表達(dá)無明顯差異,蛋白表達(dá)顯著減少(見圖4)；4.4免疫組化結(jié)果顯示：與CON組相比,ANGⅡ組和ANGⅡ+PTX組大鼠血管周圍巨噬細(xì)胞的浸潤顯著增多；與ANGⅡ組相比,ANGⅡ+PTX組大鼠血管周圍巨噬細(xì)胞的浸潤顯著減少；CON+PTX組和CON組之間血管周圍巨噬細(xì)胞的浸潤情況無明顯差異(見圖3B和3D)。5 PTX抑制了ANG-Ⅱ誘發(fā)高血壓大鼠心肌內(nèi)F-KB的激活(見圖5)5.1 CON+PTX組和CON組大鼠心肌內(nèi)NF-K B p65的DNA結(jié)合活性和抑制蛋白IkBa的表達(dá)類似；5.2與CON組相比,ANGⅡ組和ANGⅡ+PTX組大鼠心肌內(nèi)NF-K Bp65的DNA結(jié)合活性顯著增強(qiáng),而IkBα的蛋白表達(dá)顯著減少；5.3與ANGⅡ組相比,ANGⅡ+PTX組大鼠心肌內(nèi)NF-K B p65的DNA結(jié)合活性顯著減弱,而IkBα的蛋白表達(dá)顯著增加。6 PTX減弱了ANGⅡ誘發(fā)高血壓大鼠心肌重構(gòu)基因標(biāo)志物的基因表達(dá)(見圖6)6.1與CON組相比,ANGⅡ組和ANGⅡ+PTX組大鼠心肌組織中Ⅰ型膠原蛋白、TGF-β, CTGF,β-MHC,MCP-1,ICAM和VCAM的mRNA表達(dá)顯著增加；6.2與ANGⅡ組相比,ANG Ⅱ+PTX組大鼠心肌組織中這些參數(shù)的表達(dá)顯著減弱；6.3與CON組相比,CON+PTX組大鼠心肌組織內(nèi)這些參數(shù)的表達(dá)無顯著差異。7 PTX降低了NG-Ⅱ誘發(fā)高血壓大鼠循環(huán)系統(tǒng)中促炎癥細(xì)胞因子的水平(見圖7)7.1與CON組相比,ANGⅡ組和ANGⅡ+PTX組大鼠血漿中的TNF-α和IL-1p水平更高；7.2與ANGⅡ組相比,ANGⅡ+PTX組大鼠血漿中的TNF-α和IL-1β水平更低。研究結(jié)論己酮可可堿通過抑制血管緊張素Ⅱ誘發(fā)的高血壓引起的炎癥反應(yīng),改善了SD大鼠的心肌纖維化,病理性肥大和心功能,而且這些優(yōu)點是獨立于降壓效應(yīng)之外的。
[Abstract]:It is suggested that pentoxifylline can inhibit the release of inflammatory cytokines in hypertensive rats induced by angiotensin 鈪，

本文編號：1906816