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心肌細胞肥大過程中心臟發(fā)育相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子及下游心臟肥大標志基因的時序性表達規(guī)律研究

發(fā)布時間:2018-04-28 12:21

  本文選題:心肌細胞肥大 + 心臟發(fā)育相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子。 參考:《解放軍醫(yī)學雜志》2017年05期


【摘要】:目的觀察在心肌細胞肥大過程中心臟發(fā)育相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子及下游心臟肥大標志基因時序性表達規(guī)律,為心肌肥大機制研究提供線索。方法用異丙腎上腺素(ISO)干預心肌細胞,用CCK-8、細胞計數(shù)儀、免疫組化分別檢測細胞存活率、細胞直徑及表面積,用RT-PCR、Western blotting分別檢測相關(guān)基因mRNA及蛋白表達水平。結(jié)果用ISO成功構(gòu)建心肌細胞肥大模型。ISO干預后,GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)、肌細胞增強因子2C(MEF2C)、GATA5、腦鈉肽(BNP)、心房利鈉因子(ANP)于24h開始升高,P300、α-肌球蛋白重鏈(α-MHC)、T-框蛋白5(TBX5)于12h開始升高,血清應(yīng)答因子(SRF)、β-MHC mRNA于6h開始升高(P0.05);其中GATA4、α-MHC、β-MHC、SRF、P300 mRNA表達呈先升后降的趨勢,至干預72h GATA4、SRF、α-MHC、β-MHC、P300 mRNA表達仍高于正常(P0.05),而MEF2C降至正常(P0.05);GATA5、TBX5、ANP、BNP mRNA表達與對照組相比持續(xù)升高(P0.05),而NKX2.5 mRNA(P0.05)無明顯變化。ISO干預48h后,GATA4蛋白表達水平升高,HEY2蛋白表達水平降低(P0.05)。結(jié)論在心肌細胞肥大過程中,MEF2C的時序表達規(guī)律與心臟發(fā)育過程相似,而GATA4、GATA5、SRF、TBX5的時序性表達規(guī)律與心臟發(fā)育過程不完全一致,提示其在心肌細胞肥大由代償轉(zhuǎn)為失代償過程中的重要作用。同時GATA4、MEF2C、SRF與乙;窹300的時序性表達規(guī)律相似,提示在心肌細胞肥大過程中其時序性表達可能受P300調(diào)控。
[Abstract]:Objective to observe the temporal expression of transcription factors associated with cardiac development and downstream markers of cardiac hypertrophy during cardiomyocyte hypertrophy so as to provide clues for the study of cardiac hypertrophy mechanism. Methods Cardiac myocytes were treated with isoproterenol (ISO). The cell survival rate, cell diameter and surface area were detected by CCK-8, cell counter and immunohistochemistry, and the expression of mRNA and protein were detected by RT-PCR- Western blotting. Results the model of cardiomyocyte hypertrophy was successfully constructed with ISO. After the intervention of ISO, GATA4, GATA5, brain natriuretic peptide and atrial natriuretic factor began to increase at 24 h, and 偽 -MHCT- THC THC 5 TBX5 began to increase at 12 h. The expression of 尾 -MHC mRNA began to increase at 6 h, and the expression of GATA4, 偽 -MHC, 尾 -MHC1 SRFFP300 mRNA increased first and then decreased. At 72 h after intervention, the expression of GATA4, 偽 -MHC, 尾 -MHCP300 mRNA was still higher than that of normal P0.05, while the expression of MEF2C decreased to P0.05TBX5ANPNP-BNP mRNA, but NKX2.5 mRNAP0.05) had no significant change. Conclusion the temporal expression of MEF2C in cardiomyocyte hypertrophy is similar to that in cardiac development, but the temporal expression of GATA4, GATA5, SRF5, TBX5 is not completely consistent with that of cardiac development. The results suggest that it plays an important role in the process of cardiomyocyte hypertrophy from compensation to decompensation. At the same time, the sequential expression of GATA4MEF2CfSRF was similar to that of acetylase P300, suggesting that its timing expression might be regulated by P300 in the process of cardiomyocyte hypertrophy.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院心血管內(nèi)科與小兒心血管病研究室、兒童發(fā)育疾病研究省部共建教育部重點實驗室、重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預防國際科技合作基地、兒科學重慶市重點實驗室;
【基金】:國家自然科學基金(81270234,81570218) 重慶市社會民生科技創(chuàng)新專項項目(cstc2015shmszx120043)~~
【分類號】:R542.2

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本文編號:1815252

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