護骨素信號介導Ghrelin調控A7r5主動脈平滑肌細胞鈣化
本文選題:胃促生長素 切入點:護骨素 出處:《中國動脈硬化雜志》2017年11期
【摘要】:目的探討胃促生長素(Ghrelin)與護骨素(OPG)/細胞核因子κB受體活化因子配體(RANKL)在鈣化發(fā)生過程中的調控機制。方法首先觀察高脂高糖培養(yǎng)基中A7r5(主動脈平滑肌細胞)鈣化過程中Ghrelin的變化情況,繼之觀察外源性Ghrelin干預后高脂高糖鈣化培養(yǎng)基中A7r5中OPG、RANKL的表達變化。最后觀察Ghrelin與OPG/RANKL在鈣化發(fā)生過程中的調控機制。各組細胞均于培養(yǎng)14天后進行相關檢測(Von Kossa染色、茜素紅染色、細胞外鈣沉積量測定、免疫組織化學染色、Western blot檢測)。結果 Von Kossa染色、茜素紅染色及細胞外鈣沉積量檢測顯示,高脂高糖及β-甘油磷酸鹽模擬的糖尿病代謝紊亂環(huán)境下,A7r5鈣沉積量顯著增加了5.21倍。Ghrelin免疫組織化學染色及IPP6定量分析顯示,隨著鈣化的形成與發(fā)展,Ghrelin表達明顯下調。外源性Ghrelin可上調OPG相對表達量6.25倍。相對于高脂高糖鈣化組,anti-OPG組鈣沉積量增加了1.33倍(P0.05),RANKL組鈣沉積量增加了1.59倍(P0.05);相對于antiOPG組,anti-OPG+Ghrelin組鈣沉積量下調了41.9%(P0.05);相對于RANKL組,RANKL+Ghrelin組鈣沉積量下調了57.8%(P0.05)。結論 OPG/RANKL可介導Ghrelin調控A7r5主動脈平滑肌細胞鈣化。
[Abstract]:Objective to investigate the regulatory mechanisms of ghrelin (ghrelin) and osteoprotegerin (OPGG) / nuclear factor 魏 B receptor activating factor ligand (RANKL) in the process of calcification.Methods the changes of Ghrelin during calcification of A7r5 (aortic smooth muscle cells) in high fat and high glucose medium were observed at first, and then the expression of A7r5 in high fat and high glucose calcified medium was observed after intervention of exogenous Ghrelin.Finally, the regulatory mechanisms of Ghrelin and OPG/RANKL during calcification were observed.After 14 days of culture, the cells in each group were detected for Von Kossa staining, alizarin red staining, extracellular calcium deposition and immunohistochemical staining.Results Von Kossa staining, alizarin red staining and extracellular calcium deposition were observed.In hyperlipidemic hyperglycemia and 尾 -glycerophosphate simulated diabetic metabolic disorder environment, the calcium deposition of A7r5 increased 5.21-fold. Ghrelin immunohistochemical staining and IPP6 quantitative analysis showed that the expression of ghrelin was down-regulated with the formation and development of calcification.Exogenous Ghrelin could up-regulate the relative expression of OPG by 6.25 times.Conclusion OPG/RANKL can mediate Ghrelin to regulate the calcification of A7r5 aortic smooth muscle cells.
【作者單位】: 江蘇大學附屬醫(yī)院科教科;江蘇大學附屬醫(yī)院心內科;江蘇大學附屬醫(yī)院病理科;
【基金】:國家自然科學基金(81370408,81770450) 江蘇省自然科學基金(BK20131246) 江蘇省衛(wèi)計委項目(Q201308,QNRC2016836) 江蘇省研究生科研創(chuàng)新計劃(KYCX17_1801) 鎮(zhèn)江市社會發(fā)展項目(SH2015038,SH2015023) 江蘇大學臨床專項(JDLCZX001)
【分類號】:R543.5
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,本文編號:1696151
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