本文選題：FⅧ基因　切入點：組蛋白乙酰化　出處：《重慶醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的:通過對人永生化正常肝細胞LO2中凝血因子Ⅷ(coagulation factor Ⅷ,FⅧ)啟動子區(qū)域組蛋白乙�；腿ヒ阴；难芯�,探索NO信號激活LO2細胞中FⅧ高表達的分子機制。方法:建立L-精氨酸激活人肝細胞L02內源凝血因子FⅧ高表達的分子細胞模型。取對數生長期人類永生化肝細胞LO2隨機分為:對照組和L-精氨酸組、組蛋白乙酰化抑制劑組和組蛋白去乙�；种苿┙M。L-精氨酸組(L-精氨酸的終濃度10mM),對照組用同等體積的PBS取代L-精氨酸,組蛋白乙�；种苿┙M(C646的終濃度25uM),組蛋白去乙酰化抑制劑組(SAHA的終濃度50nM),分別培養(yǎng)0h、12h、24h、36h、48h、60h。用RT-PCR方法檢測各組中人FⅧ基因的轉錄水平。用染色質免疫共沉淀(ChIP)分別檢測對照組,L-精氨酸組,組蛋白乙�；种苿┙M,組蛋白去乙酰化抑制劑組FⅧ基因啟動子區(qū)域組蛋白乙�；健嫿ê宿D錄因子(Nuclear factor kB,NF-kB1)flag標簽質粒,轉染LO2細胞。用ChIP檢測NF-kB1與FⅧ基因啟動子區(qū)域轉錄因子結合位點的結合能力。結果:RT-PCR結果顯示L-精氨酸組和組蛋白去乙�；种苿┙M中FⅧ基因表達上調,正常組和組蛋白乙酰化抑制劑組中FⅧ基因為本底表達。ChIP檢測到L-精氨酸組和組蛋白去乙�；种苿┙M比正常組和組蛋白乙�；种苿┙M中NF-kB1與FⅧ基因啟動子區(qū)域轉錄因子結合位點的結合能力強,ChIP檢測到對照組和組蛋白乙酰化抑制劑組FⅧ基因啟動子區(qū)域組蛋白乙�；綖楸镜妆磉_,L-精氨酸組和組蛋白去乙�；种苿┙MFⅧ基因啟動子區(qū)域組蛋白乙酰化水平提高。結論:上述研究表明組蛋白乙酰化抑制劑能取消LO2細胞中內源人FⅧ基因的上調,而組蛋白去乙�；种苿┠軈f(xié)同LO2細胞中內源人FⅧ基因的上調。NO信號在LO2細胞中通過調節(jié)FⅧ基因啟動子區(qū)域組蛋白乙�；�,招募轉錄因子NF-kB1上調人FⅧ基因的表達。
[Abstract]:Aim: to study the acetylation and deacetylation of the promoter region of factor 鈪，

本文編號：1670806