發(fā)布時間：2018-03-22 04:20

  本文選題：酮色林　切入點：動脈壓力感受性反射功能　出處：《第二軍醫(yī)大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：研究目的:心力衰竭又稱心功能不全,簡稱心衰,是由任何原因導致的心臟器質性或功能性損害以致心臟舒縮功能障礙、心室充盈及射血能力不足而引發(fā)的一組臨床綜合征。臨床主要表現(xiàn)有呼吸困難、疲乏、運動耐量受限以及體液潴留等。隨著生活水平的提高以及人口老齡化的發(fā)展,心血管疾病的發(fā)病率逐年提高,心衰的發(fā)病率也逐年增加,并且有很高的致殘率和病死率。酮色林為選擇性5-HT_(2A)受體阻斷劑,同時具有較弱的和H受體拮抗作用,臨床上用于治療高血壓和雷諾病。我們前期研究結果表明,酮色林可以在不改變血壓的前提下改善大鼠動脈壓力感受性反射(arterial baroreflex,ABR)功能。我們在研究中發(fā)現(xiàn),急性心肌缺血大鼠,其反射功能顯著低于正常動物。同時,自發(fā)性ABR功能缺陷大鼠(arterial baroreflex-deficient rats,ABR-DRs),與其正常對照(arterial baroreflex-normal rats,ABR-NRs)相比,在冠狀動脈左前降支結扎導致的心肌梗死損傷模型中,前者的心肌損傷程度更為嚴重�；谶@些結果我們考慮到,改善ABR功能的藥物酮色林,應該具有改善心衰動物心功能的作用。我們通過急性心肌缺血實驗篩選出了酮色林改善心功能的最合適劑量1 mg/kg,并從酮色林對心衰大鼠的直觀保護作用入手,研究了酮色林對兩種心衰模型大鼠的治療效果,檢測指標包括超聲心動圖、心臟血流動力學、心重指數(shù)、血生化、心肌病理生理,并觀察記錄了長期生存時間。本課題的研究結果明確了酮色林在心衰治療中的作用,為后期藥品研發(fā)打下基礎,也希望能為心衰的治療帶來一些新思路。實驗設計和方法:我們首先利用Sprague-Dawley(SD)大鼠制備急性心肌缺血模型,觀察急性心梗前后的BRS及血壓心率變化,再使用ABR-DRs及其對照,觀察反射功能缺陷對急性心梗后心肌損傷的影響,進而使用不同劑量酮色林觀察其對ABR功能以及心功能的改善作用,確定了酮色林改善心功能的最優(yōu)劑量。在這一劑量基礎上我們利用大鼠制備了兩種心衰模型,模型一是心臟冠狀動脈左前降支結扎誘導心衰,模型二是皮下注射異丙腎上腺素合并冷水刺激誘導心衰。分別觀察酮色林對其各項指標的改善作用。具體實驗如下:實驗一:反射功能低下對大鼠心梗損傷程度的影響。1.急性心梗后SD大鼠的BRS及血壓心率變化。雄性SD大鼠重約220g,分為2組,每組10只。一組實施冠狀動脈左前降支結扎手術,制備急性心肌缺血模型,另外一組為假手術組,僅開胸打松結。七天后測定BRS(baroreflex sensibility)、收縮壓(systolic blood pressure,SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure,DBP)和心率(heart rate,HR),比較兩組差異。2.ABR-DRs及其對照組ABR-NRs急性心肌梗死損傷程度差異比較。雄性2月齡ABR-DRs及ABR-NRs各9只,重200g左右,實施冠狀動脈左前降支結扎手術,觀察兩組動物心肌損傷程度差異。實驗二:確定酮色林治療心衰的最優(yōu)劑量。1.酮色林不同劑量對反射功能低下大鼠(ABR-DRs)的BRS及血壓、心率的影響。雄性ABR-DRs 24只,重220 g左右,隨機分成三組,酮色林0.3 mg/kg、1 mg/kg和3 mg/kg。在測量完BRS、SBP、DBP、BRS的基礎值后分別通過胃瘺給予不同劑量的酮色林,30 min后再次測量給藥之后的BRS、SBP、DBP和HR,比較各組的指標變化。2.酮色林不同劑量對急性心衰大鼠的心功能影響。雄性SD大鼠25只隨機分成五組,一組為假手術組,其余四組實施冠狀動脈左前降支結扎手術制備心肌缺血導致的急性心衰模型。手術后假手術組和對照組給予生理鹽水,其他三組分別灌胃給予酮色林0.3 mg/kg、1 mg/kg和3 mg/kg治療,一小時后通過血流動力學檢測各組心功能改變。實驗三:酮色林對心梗后心衰模型大鼠的治療作用。1.酮色林對心梗后心衰模型大鼠的心功能影響。(1)超聲心動圖檢測心功能。雄性SD大鼠,體重200 g左右,乙醚氣體麻醉,實施大鼠冠狀動脈左前降支結扎手術,其中6只為假手術組,其余40只大鼠手術一周后通過超聲心動圖檢測心功能,射血分數(shù)(ejection fraction,EF)大于45%的動物淘汰(手術不成功),剩余動物隨機分成對照組和酮色林組并開始給藥,假手術組和對照組給予正常飼料,酮色林組給予藥物飼料(1 mg/kg/d)。手術六周后行小動物超聲心動圖檢測心功能。(2)血流動力學檢測心功能。造模方法同上,其中6只為假手術組,另外20只大鼠手術后一周經(jīng)超聲心動圖淘汰射血分數(shù)45%的動物后,隨機分成對照組和酮色林組,給藥方法同上。造模六周后行股動脈和左心室插管,測量血流動力學相關指標。2.酮色林對心梗后心衰模型大鼠心肌病理的改善。以上檢測完血流動力學的大鼠頸椎脫臼處死,取心臟進行病理切片,并通過HE和Masson染色觀察心肌細胞病理生理改變。實驗四:酮色林對異丙腎上腺素誘導的心衰模型大鼠的治療作用。1.酮色林對異丙腎上腺素誘導的心衰模型大鼠的心功能影響。用異丙腎上腺素誘導的方法制作了心衰模型二,其中空白組6只大鼠,模型組和給藥組各12只大鼠。成模后開始給藥,酮色林1 mg/kg/d均勻拌入飼料內(nèi)自由采食,空白組和模型組給予正常飼料,造模六周后行小動物超聲心動圖檢測心功能。2.酮色林對異丙腎上腺素誘導的心衰模型大鼠的心重指數(shù)影響。以上檢測完超聲心動圖的大鼠麻醉后股動脈取血(檢測血生化指標用),然后取心臟,稱量動物體重、全心重、心室重和左心室重量,分別計算其全心重指數(shù)、心室重指數(shù)和左心室重指數(shù)。3.酮色林對異丙腎上腺素誘導的心衰模型大鼠血生化指標的影響。以上取得的股動脈血放入低溫抗凝管中,迅速離心取得血漿。其中一管預加抑肽酶,用于心房利鈉肽(ANP)的檢測,另一管用于血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的檢測。實驗五:酮色林對心衰模型大鼠長期生存時間的影響。實驗三當中,超聲心動圖實驗里的對照組和酮色林組大鼠從給藥開始(手術一周后)每天記錄動物死亡時間,設置觀察時間為400天,實驗結束后用SPSS 21Kaplan-Meier繪制生存曲線并比較兩組差異。實驗結果:一、急性心梗后大鼠的BRS顯著降低,血壓心率無明顯變化。與ABR-NRs相比,ABR-DRs在急性心梗后的心肌梗死程度顯著加重。二、酮色林0.3 mg/kg、1 mg/kg和3 mg/kg給藥均能改善反射功能低下大鼠的BRS,其中1 mg/kg和3 mg/kg效果更為明顯。三個劑量下均對其SBP,DBP和HR無影響。急性心梗實驗中,酮色林從0.3 mg/kg開始有心功能改善作用,1 mg/kg和3 mg/kg療效更為突出,但兩者之間無明顯差異。綜合考慮藥物作用及劑量安全性,最終選擇1 mg/kg作為后續(xù)長期實驗劑量。三、酮色林治療心梗后心衰模型大鼠,超聲心動圖檢測結果顯示,與假手術組相比,對照組的左室收縮末期內(nèi)徑、左室舒張末期內(nèi)徑、左室收縮末期容積以及左室舒張末期容積顯著升高,而射血分數(shù)和短軸縮短率顯著降低,表明造模成功。與對照組相比,酮色林1 mg/kg/d治療可以明顯降低心衰大鼠的左室收縮末期內(nèi)徑、左室舒張末期內(nèi)徑、左室收縮末期容積以及左室舒張末期容積(P0.01),而射血分數(shù)和短軸縮短率顯著升高(P0.05),表明心衰大鼠的心室擴張情況和心肌收縮力得到改善,酮色林對心衰大鼠的心功能具有保護作用。血流動力學檢測結果顯示,與假手術組相比,對照組的左心室收縮壓、左心室內(nèi)壓最大上升速率和左心室內(nèi)壓最大下降速率明顯下降,表明造模成功(P0.01)。與對照組相比,酮色林可以提高心衰大鼠的左心室收縮壓、左心室內(nèi)壓最大上升速率和左心室內(nèi)壓最大下降速率(P0.05),平均動脈壓和心率稍有提高但無統(tǒng)計學差異。再次證實酮色林可以改善心衰大鼠的心臟舒縮功能,且不影響血壓和心率。對其心臟進行HE染色,假手術組心肌細胞排列整齊,形態(tài)正常;對照組心肌細胞呈區(qū)域性不規(guī)則肌溶性改變,肌細胞破壞中斷,肌膜肌漿消失,間質細胞增多且排列混亂;酮色林組心肌細胞結構比較正常,排列、走行有序,間質輕度充血水腫。Masson染色結果中,與對照組相比,給予酮色林治療后,大鼠的心肌纖維化程度降低明顯。四、用酮色林治療異丙腎上腺素誘導的心衰模型大鼠,超聲心動圖結果與模型一相似,酮色林可以改善該模型大鼠的心室擴張情況和心肌收縮力。心重指數(shù)結果顯示,給藥組大鼠的全心重、全心重指數(shù)、心室重指數(shù)、左心室重和左心室重指數(shù)均有下降,心室重有降低趨勢但無統(tǒng)計學差異,這些結果表明酮色林治療可以改善心重指數(shù),逆轉心衰大鼠的心肌肥厚。血生化檢測結果顯示,與對照組相比,給藥組大鼠血漿中ANP和AngⅡ含量明顯降低,表明酮色林可以降低心臟阻力,減輕心衰大鼠的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的過度激活。五、心衰后大鼠長期給予酮色林1 mg/kg/d治療,其長期生存率明顯高于對照組(P0.05)。結論:1、反射功能低下可加重大鼠心梗損傷程度。2、酮色林單次給藥改善急性心梗大鼠的心功能,長期給藥提高兩種不同心衰模型大鼠的心功能,并顯著延長其生存時間。3、酮色林減輕心衰模型大鼠的心肌膠原纖維化程度,降低心重指數(shù),逆轉其心肌肥厚,并且降低其血漿ANP和AngⅡ含量。以上作用可能是通過改善ABR功能實現(xiàn)的。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R541.6

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本文編號：1647034