本文關鍵詞： 高鹽 血管平滑肌細胞 細胞增殖 辣椒素　出處：《中國動脈硬化雜志》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的研究辣椒素對高鹽誘導的大鼠血管平滑肌細胞(VSMC)增殖的抑制作用。方法組織貼壁法培養(yǎng)原代大鼠血管平滑肌細胞,根據(jù)MTT結果繪制大鼠血管平滑肌細胞的生長曲線,大鼠血管平滑肌細胞傳至第4代去血清同步化24 h,不同濃度辣椒素(0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L)進行高鹽培養(yǎng)72 h,MTT比色法檢測大鼠血管平滑肌細胞增殖情況,選取抑制血管平滑肌細胞增殖的辣椒素濃度進行后續(xù)實驗。CCK-8檢測滲透壓對大鼠血管平滑肌細胞增殖的影響,流式細胞儀分析細胞增殖周期,免疫熒光染色法和Western blot檢測增殖細胞核抗原(PCNA)的表達,實時熒光定量PCR檢測瞬時受體電位家族香草醛1型受體(TRPV1)mRNA的表達,Western blot檢測瞬時受體電位家族香草醛1型受體的蛋白表達。結果 MTT結果顯示,辣椒素濃度為10μmol/L時大鼠血管平滑肌細胞增殖開始受抑制,100μmol/L時抑制作用增強(P0.05),選取10μmol/L辣椒素進行后續(xù)實驗。CCK-8結果顯示,高鹽組細胞明顯增殖,而甘露醇組、正常組和高鹽+辣椒素組無差異。流式細胞儀測得高鹽組G0/G1、G2/M期細胞比例減少(P0.05),S期細胞比例增多(P0.05);與高鹽組比較,高鹽+辣椒素組G0/G1、G2/M期細胞比例增加(P0.05),S期細胞比例下降(P0.05)。免疫熒光及Western blot結果顯示,高鹽組增殖細胞核抗原陽性細胞核增多,蛋白表達增加(P0.05),而高鹽+辣椒素組增殖細胞核抗原陽性細胞核減少,蛋白表達減少(P0.05)。實時熒光定量PCR和Western blot結果顯示高鹽組瞬時受體電位家族香草醛1型受體mRNA及蛋白表達減少(P0.05),辣椒素組則增加(P0.05)。結論辣椒素可抑制高鹽所致的大鼠血管平滑肌細胞增殖,其作用機制可能與激活瞬時受體電位家族香草醛1型受體表達有關。
[Abstract]:Objective to study the inhibitory effect of capsaicin on the proliferation of rat vascular smooth muscle cells (VSMC) induced by high salt. Methods Primary rat vascular smooth muscle cells (VSMC) were cultured by tissue adherent method and the growth curve of VSMC was plotted according to MTT results. Rat vascular smooth muscle cells (VSMCs) were transferred to the 4th generation and synchronized for 24 h. The proliferation of rat vascular smooth muscle cells (VSMCs) was detected by MTT colorimetric assay at 72 h after high salt culture. The concentration of capsaicin was 0.01 渭 mol / L ~ (0.1 渭 mol / L) and 10 渭 mol / L ~ (10) 渭 mol / L ~ (10 渭 mol / L) respectively. The effect of osmotic pressure on proliferation of vascular smooth muscle cells in rats was detected by CCK-8. Flow cytometry was used to analyze cell proliferation cycle. Immunofluorescence staining and Western blot were used to detect the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA). Real time fluorescence quantitative PCR was used to detect the mRNA expression of vanillin type 1 receptor type 1 receptor in transient receptor potential family. Western blot was used to detect the protein expression of vanillin type 1 receptor family in transient receptor potential family. When the concentration of capsaicin was 10 渭 mol/L, the proliferation of vascular smooth muscle cells in rats was inhibited at 100 渭 mol/L. The results of 10 渭 mol/L capsaicin test. CCK-8 showed that the proliferation of vascular smooth muscle cells in high salt group was obvious, while that in mannitol group was higher than that in mannitol group. There was no difference between normal group and high salt capsaicin group. In high salt capsaicin group, the proportion of G _ 0 / G _ 1 G _ 2 / M phase increased and the proportion of P _ (0.05) / S phase decreased. The results of immunofluorescence and Western blot showed that the number of proliferating cell nuclear antigen positive cells increased in high salt group. Protein expression increased in P0.05, but decreased in high salt capsaicin group. The results of real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot showed that the expression of vanillin type 1 receptor mRNA and protein decreased in high salt group, but increased in capsaicin group. Conclusion capsaicin can inhibit the high salt level. Proliferation of rat vascular smooth muscle cells, The mechanism may be related to the activation of the transient receptor potential family vanillin type 1 receptor expression.
【作者單位】： 遵義醫(yī)學院臨床醫(yī)學研究所心血管病研究所高血壓研究室;遵義醫(yī)學院附屬醫(yī)院心內科;重慶市高血壓研究所;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81160041;81460077) 貴州省優(yōu)秀科技教育人才省長專項基金項目[黔省專合字(2012)15號] 貴州省國際科技合作計劃項目[G字(2012)7038號]
【分類號】：R544.1

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